新疆哈薩克族胃癌患者胃癌組織Smad4蛋白表達及意義

劉 璽，陳衛剛，劉曉燕，康 雪，鄭 勇

(1 石河子大學醫學院，新疆石河子 832000;2 石河子大學醫學院第一附屬醫院)

我國是胃癌的高發區，胃癌病死率居各類癌癥病死率的第一位［1］。研究發現，新疆哈薩克族人群胃癌病死率為41.3/10萬，高于我國胃癌病死率的平均水平，也高于新疆地區漢族和維吾爾族胃癌病死率，居新疆少數民族之首。研究發現，TGF-β/SMADS信號通路與多種腫瘤的發生、發展有關，Smad4基因是TGF-β信號傳導系統的重要中間環節，TGF-β/Smad4基因突變及表達缺失可導致多種腫瘤的發生發展［2～8］。目前，對新疆哈薩克族胃癌組織中Smad4蛋白表達水平及其在哈薩克族胃癌發病中的機制尚不明確。2010年10月～2012年10月，我們進行了相關研究?，F報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 選擇來源于新疆新源縣哈薩克族胃癌研究現場的哈薩克族胃癌組織30份為胃癌組，選擇來源于新疆伊犁哈薩克自治州友誼醫院的哈薩克族正常胃黏膜組織30份為對照組。胃癌組織與正常胃黏膜組織均為經內鏡下活檢所得，均經病理學檢查證實。標本冷凍于液氮中-80℃保存備用。

1.2 Smad4蛋白檢測 采用Western blot法。組織經裂解液提取蛋白，采用Bicinchoninic acid法測定蛋白濃度并行蛋白定性。制備SDS-聚丙烯凝膠、上樣樣品后上樣;經電泳、轉膜(轉膜時間為52 min)、脫脂奶粉封閉后，4℃一抗(兔抗人Smad4多克隆抗體)孵育過夜。沖洗一抗。室溫下用二抗辣根過氧化物酶偶聯的山羊抗兔IgG抗體孵育1 h，沖洗二抗后在X片上經化學發光法顯影并掃描結果條帶，測定光密度值。特異性基因光密度/管家基因光密度(β-actin)為Smad4基因蛋白相對表達量。

1.3 統計學方法 采用SPSS13.0軟件，采用獨立樣本t檢驗，以P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

胃癌組、對照組Smad4蛋白表達水平分別為0.17 ±0.01、0.31 ±0.04，胃癌組明顯低于對照組(P ＜0.05)。

3 討論

Smad4基因是TGF-β信號傳導通路的重要中間環節，對其信號傳導具有重要影響。Smad4基因突變或表達缺失是胃癌發生發展的高危因素［9］。研究發現胃癌組織中Smad4蛋白表達水平降低［10］。Smad4基因沉默在早期賁門腺癌發病過程中也發揮了重要作用［11，12］。目前認為Smad4基因表達缺失、突變、甲基化和磷酸化導致了Smad4蛋白的失活。

我國少數民族中，新疆哈薩克族胃癌病死率居第一位。因患者聚居區地處我國新疆北部，患者以游牧生活為主，流行病學調查存在一定難度;加之當地基層醫務人員對胃癌疾病的診斷和治療研究比較薄弱，技術相對落后，因此開展有關腫瘤早期診斷、流行病學研究就顯得尤為重要。本研究發現，哈薩克族胃癌患者胃癌組織中Smad4蛋白表達水平明顯低于正常胃黏膜組織，提示新疆地區哈薩克族胃癌的發生與Smad4蛋白表達降低有關。研究發現，低分化癌組織Smad4蛋白表達低于高分化癌組織，低表達患者的預后也較差［13～15］。哈薩克族以游牧生活為主，有許多具有民族特色的飲食習慣，如食用馕、奶渣、烤肉等，絕大多數為高鹽、熏烤類或腌制食物，熏烤類食物及高鹽食物可增加胃癌的危險性。而熏烤食物在烹飪過程中，經高溫分解和不完全燃燒產生大量3，4-苯并芘等多環芳烴類致癌物，可明顯增加胃癌的發生率。研究證實，經常食用熏烤食品可以增加胃癌的危險性［16］。高鹽或腌制食物可損傷胃黏膜，導致胃腔內壁細胞的萎縮和脫落，增加機體對致癌物的易感性［17］。哈薩克族食用的發霉奶渣對胃癌的發生也有明顯的促進作用［18］。因此，哈薩克族胃癌發生率高的原因可能與其民族飲食習慣有關。

綜上所述，新疆哈薩克族居民胃癌高發與TGF-β/SMADS信號通路中Smad4蛋白表達降低密切相關。由于細胞增殖、分化及凋亡相關的信號通路及生物因子較多，TGF-β/SMADS信號通路及其Smad4抑癌基因的作用尚需更深入的研究。

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