動物檢驗檢疫樣品血液樣品送檢

張慧燕 巴彥淖爾市鐵路動物衛生監督檢驗站 015000

采集動物檢驗樣品是動物檢疫工作的重要內容。采樣的時機是否適宜，樣品是否具有代表性，樣品的處理、保存、運送是否合適及時，這些與檢驗結果的準確性和可靠性關系極大，所以要按照規定采集檢驗樣品。

1 適時采樣

根據檢疫要求及檢驗項目的不同，選擇適當的采樣時機十分重要。采樣是有時間要求的，應該嚴格按規定時間采樣；有臨診癥狀需要作病原分離的，必須在病初的發熱期或癥狀典型時采樣，病死的動物應立即采樣。

2 合理采樣

按照檢疫規定要求，除了必須嚴格按照規定采集各種足夠數量的樣品外，不同疫病的需檢樣品各異，應按可能的疫病側重采樣。對未能確定為何種疫病的應全面采樣。

3 典型采樣

選取未經藥物治療、癥狀最典型或病變最明顯的樣品采樣，如有并發癥還應兼顧采樣。

4 無菌取樣

采集檢驗樣品除供病理組織學檢驗外，供病原學及血清學等檢驗的樣品必須無菌操作采樣，采樣用具和容器均須滅菌處理，尸體剖檢需采集樣品的先采樣后檢查，以免人為污染樣品。

5 適量采樣

采集樣品的數量要滿足檢疫檢驗的需要并留有余地，以備必要的復檢使用。

6 樣品處理

采集的樣品應一種樣品一個容器立即密封，根據樣品的性狀及檢疫檢驗要求不同，作暫時的冷藏、冷凍或其他處理。凍結方法是將樣品放入－30℃冰箱內凍結，然后再裝入有大小冰塊或干冰的冷藏瓶（箱）內運送，亦可將裝入樣品的容器放入隔熱保溫瓶內再放入冰塊，然后按100g 冰塊加入食鹽約35g，立即將隔熱瓶瓶口塞緊，保證瓶內溫度達到－21℃左右。供細菌學檢驗或血清學檢驗的樣品冷藏送實驗室即可。裝樣品的容器應貼上標簽，標簽要防止因凍結而脫落，標簽標明采集時間、地點、號碼和樣品名稱，并附上發病、死亡等相關資料，盡快送實驗室。

7 安全采樣

采樣過程中必須做好采樣人員的安全防護，并防止病原污染，尤其必須防止外來疫病的擴散，避免事故發生。

8 樣品包裝

裝載樣品的容器可選擇玻璃的或塑料的，可以是瓶式、試管式或袋式。容器必須完整無損，密封不漏出液體。裝供病原學檢驗樣品的容器，用前徹底清潔干凈，必要時經清潔液浸泡，沖洗干凈后經干熱或高壓滅菌并烘干。如選用塑料容器，能耐高壓的經高壓滅菌，不能耐高壓的經環氧乙烷熏蒸消毒或紫外線距離20cm 直射2h 滅菌后使用。根據檢驗樣品性狀及檢驗目的選擇不同的容器，一個容器裝量不可過多，尤其液態樣品不可超過容量的80%，以防凍結時容器破裂。裝入樣品后必須加蓋，然后用膠布或封箱膠帶固封。如果是液態樣品，在膠布或封箱膠帶外還須用熔化的石蠟加封，以防液體外泄。如果選用塑料袋則應用兩層袋，分別用線結扎袋口，防止液體漏出或入水污染樣品。

9 送檢迅速

樣品經包裝密封后必須盡快送往實驗室，延誤送檢時間常會嚴重影響檢疫結果。因此在樣品送檢過程中，要根據樣品的保存要求及檢驗目的妥善安排運送計劃。供細菌檢驗、寄生蟲檢驗及血清學檢驗的冷藏樣品，必須在24h 內送到實驗室；供病毒檢驗的冷藏處理樣品，須在數小時內送達實驗室；經凍結的樣品須在24h 內送到，24h 內不能送到實驗室的，必須使送檢樣品在運送過程中保持溫度處于-20℃以下。樣品在送檢過程中，為了防止樣品的容器破損，樣品裝入冷藏瓶(箱)后應妥善包裝，防止碰撞。用飛機運送時，樣品應放在增壓倉內，以防壓力改變導致樣品受損。

10 送檢樣品的采集

10.1 病毒檢驗樣品的采集

一般情況下，采集樣品適宜在動物發病初體溫升高時進行，對于沒有癥狀的帶毒動物，一般在進入隔離場后7天以前采樣。血樣品必須是脫纖血或是抗凝血。抗凝劑可選擇肝素或EDTA，枸櫞酸鈉對病毒有微毒性，一般不宜采用。采血前，在真空采血管或其他容器內按每10mL 血加入0.1%肝素1mL 或EDTA20mg。牛、馬、羊從頸靜脈或尾靜脈真空采血，豬從前腔靜脈真空采血或用注射器抽取，用量少時也可以從耳靜脈抽取，家禽從翅膀靜脈或頸靜脈用注射器抽取血液。采得的血樣立即與抗凝劑充分混合，防止凝固；采脫纖血時，先在容器內加入適量小玻珠，加入血液后反復振蕩血液，以便脫去血液纖維。采得的血液經密封后貼上標簽，以冷藏狀態立即送實驗室。必要時可在血中按每毫升加入青霉素和鏈霉素各500-1000IU，以抑制血源性或采血中污染的細菌。

10.2 細菌檢驗樣品的采集

采血應在動物發病初體溫升高或發病期，并未經藥物治療期間采集，血應脫纖或加肝素抗凝劑(或EDTA 或枸櫞酸鈉)，但不可加入抗生素。血液密封后貼上標簽，冷藏盡快送實驗室，否則須置4℃冰箱內作暫時保存，但時間不宜過久，以免溶血。

10.3 血清學檢驗樣品

全血用真空采血管或注射器由動物頸靜脈或其他靜脈采集，用作血清學檢驗的血液不加抗凝劑或脫纖處理。為了保障血清質量，一般情況下空腹采血較好。采得的血樣貼上標簽，室溫靜置待凝固后送實驗室，并盡快將自然析出的血清或經離心分離出的血清吸出，按需要分裝若干小瓶密封，再貼上標簽冷藏保存備檢或冷藏送檢。作血清學檢驗的血液，在采血、運送和分離血清的過程中應避免溶血，以免影響檢驗結果。中和試驗用的血清，數天內檢驗的可在4℃左右保存。較長時間才能檢驗的應凍結保存，但不能反復凍融，否則抗體效價下降。供其他血清學檢驗的血清，一般不必加入防腐劑或抗生素，若確有需要時也可加入抗生素(每毫升血清加青霉素、鏈霉素500-1000IU)，亦可加入0.01%硫柳汞、0.08%硫柳汞、0.08%疊氮鈉。加入防腐劑時不宜加入過量的液態量，以免血清被稀釋。加入防腐劑的血清可置4℃下保存，但存放時間過長應凍結保存。采集雙份血清檢測比較抗體效價變化的，第一份血清采于病的初期并作凍結保存，第二份血清采于第一份血清后3-4 周，雙份血清同時送實驗室。

10.4 寄生蟲檢驗樣品

因不同的血液寄生蟲在血液中出現的時機及部位各不相同，因此需要根據各種血液寄生蟲的特點，取相應時機及部位的血制成血涂片，送實驗室。

10.5 常規檢驗樣品

血液需加抗凝劑，防止血液凝固，抗凝劑可用肝素或枸酸鈉、EDTA 鈉，血由靜脈采得并與抗凝劑充分混合，盡快送實驗室。運輸中血漿不可凍結，不可劇烈振動，以免溶血。