實(shí)驗(yàn)性“痰瘀伏邪”模型病理演變規(guī)律及中藥干預(yù)作用研究

陳 穎，李 松

（長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林長春130117）

實(shí)驗(yàn)性“痰瘀伏邪”模型病理演變規(guī)律及中藥干預(yù)作用研究

陳 穎，李 松

（長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林長春130117）

目的：建立大鼠高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化模型及中藥參紅化濁通絡(luò)顆粒對其干預(yù)的影響。方法：將實(shí)驗(yàn)性大鼠80只分為空白組、模型組、中劑量給藥組和高劑量給藥組，采用喂飼高脂飼料和腹腔注射維生素D3的方法復(fù)制大鼠高脂血癥模型和動(dòng)脈粥樣硬化模型，觀察實(shí)驗(yàn)大鼠TC、TG、LDL－C、HDL－C含量變化以及主動(dòng)脈組織形態(tài)學(xué)改變。結(jié)果：高脂飼料的喂養(yǎng)可以使大鼠TC、LDL－C、HDL－C明顯升高，形成高膽固醇血癥；高脂飼料喂養(yǎng)配合維生素D3腹腔注射，未能形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊；參紅化濁通絡(luò)顆粒對升高HDL－C具有一定療效。結(jié)論：中藥參紅化濁通絡(luò)顆粒對升高HDL－C具有一定療效。

參紅化濁通絡(luò)顆粒；動(dòng)脈硬化；高脂血癥；大鼠

中醫(yī)伏痰伏瘀理論認(rèn)為，冠心病在臨床前期痰瘀伏邪內(nèi)藏，蘊(yùn)結(jié)成毒，伏于血絡(luò)，而正能勝邪，邪氣內(nèi)藏，伏而待發(fā)；臨床期正不勝邪，觸動(dòng)而發(fā)；緩解期正能勝邪，邪氣內(nèi)藏，伏而待發(fā)。中藥參紅化濁通絡(luò)顆粒具有活血通絡(luò)，化濁祛瘀等功效。動(dòng)脈粥樣硬化是導(dǎo)致心腦血管疾病的主要病理因素，而長期高脂血癥易導(dǎo)致動(dòng)脈硬化加速形成。其發(fā)病機(jī)制一般認(rèn)為，隨著高膽固醇食物攝入及年齡的不斷增長，動(dòng)脈血管內(nèi)皮下脂質(zhì)蛋白的滯留［1］，及動(dòng)脈粥樣斑塊與血栓的形成，促發(fā)心腦疾病。［2－3］因此，為研究本方的藥理作用機(jī)制，筆者通過觀察大鼠TC、TG、LDL－C，Hdl－c以及主動(dòng)脈組織形態(tài)學(xué)的改變，對該方進(jìn)行藥效學(xué)研究。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 選用6周齡Wistar幼鼠80只，由吉林大學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供。

1.2 飼料制備 飼料有普通飼料和高脂飼料。基礎(chǔ)飼料的組成：由面粉20％，米粉2％，玉米20％，麩皮25％，豆料20％，骨粉2％，魚粉2％組成。大鼠維持了和大鼠面料均購自吉林大學(xué)基礎(chǔ)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部。高脂飼料：由10％豬油，1％膽固醇，0.2％丙基硫氧嘧啶，0.2％膽酸鈉，8％蛋黃粉，80.6％基礎(chǔ)飼料配制而成。豬油自備，膽固醇和膽酸鈉購自長春市鼎國生物技術(shù)有限公司，丙基硫氧嘧啶購自長春市義善堂大藥房，蛋黃粉購自北京康德生物制品有限公司。

1.3 藥物組成與制備 維生素D3注射液，購自長春市義善堂大藥房。蘇丹Ⅲ染色劑和甲醛溶液，均購自長春市科技化玻站。參紅化濁通絡(luò)顆粒（藥物組成：黨參10g，紅景天15g，丹參20g，水蛭6g，降香10g，瓜蔞20g，甘松10g，石菖蒲10g），由長春中醫(yī)藥大學(xué)屬附醫(yī)院心病內(nèi)科自擬，藥物購自吉林省仙草醫(yī)藥有限公司，并由此公司中藥制劑室提供水煎濃縮至所需濃度，放置于4℃冰箱內(nèi)儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 相關(guān)耗材與試劑盒制備 EP管、5mL注射器、1mL注射器、烏拉坦、脫脂棉及取材所需物品均購自長春市科技化玻站。前列環(huán)素Elisa試劑盒（PGI2 48T）、血栓素Elisa試劑盒（TAX2 48T）、內(nèi)皮素Elisa試劑盒（ET 48T）、一氧化氮Elisa試劑盒（NO 48T）均購自長春市鼎國生物技術(shù)有限公司。

1.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與造模 80只健康實(shí)驗(yàn)大鼠，雌雄各半，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，觀察活動(dòng)、糞便等均未見異常后，采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為4組：空白組10只、模型對照組20只、中劑量給藥組25只、高劑量給藥組25只。空白組、模型組大鼠每日等容積生理鹽水灌胃。給藥組在造模后即開始給藥。按照實(shí)驗(yàn)藥理方法學(xué)進(jìn)行計(jì)算，高劑量組以參紅化濁通絡(luò)顆粒懸液24g/kg灌胃，中劑量組以參紅化濁通絡(luò)顆粒懸液12g/kg灌胃。空白組和模型組，按照相應(yīng)體質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)給予等容積生理鹽水灌胃。每組每天灌胃1次，每次灌胃的體積按照每100g給予1mL計(jì)算。造膜方法參考相關(guān)文獻(xiàn)［4－5］，空白組大鼠飼喂基礎(chǔ)飼料，其余組均飼喂高脂飼料，喂養(yǎng)10周。除空白組外其余組飼喂高脂飼料，飼養(yǎng)4周后，模型組、中劑量給藥組和高劑量給藥組采用一次性腹腔靜脈注射維生素D3（60萬IU/kg）的方法，促進(jìn)鈣離子沉積，制作動(dòng)脈粥樣硬化斑塊模型。在高脂飼料喂養(yǎng)基礎(chǔ)上造成“痰瘀”模型。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s，mmol/L）表示。用單因素方差分析來表示多組均數(shù)間的比較，兩兩間比較用LSD檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠血清TC、TG、LDL－C、HDL－C含量變化比較 見表1。

表1 各組大鼠血清TC、TG、LDL－C和HDL－C含量變化比較（±s）

表1 各組大鼠血清TC、TG、LDL－C和HDL－C含量變化比較（±s）

注：與空白組比較，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

組 別n TC TG LDL－C HDL－C空白組 10 1.21±0.23 0.75±0.28 0.10±0.07 0.71±0.16模型組 20 3.34±1.70＃＃0.62±0.26 0.87±0.63＃ 1.53±0.54＃＃中劑量組25 4.32±2.50＃＃0.53±0.29 1.11±0.92＃＃△1.75±0.81高劑量組25 5.51±2.35＃＃0.65±0.36 1.31±0.98＃＃△△2.11±0.67＃＃

2.2 參紅化濁通絡(luò)顆粒方對大鼠主動(dòng)脈組織形態(tài)學(xué)的影響 主動(dòng)脈組織在光鏡下可見：空白組大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完整，主動(dòng)脈壁的內(nèi)膜光滑，無增生性改變，無奶油色病變及炎性細(xì)胞的侵潤；模型組大鼠的主動(dòng)脈壁內(nèi)膜光滑，見少許脂肪沉積，無奶油色病變及炎性細(xì)胞侵潤，內(nèi)皮細(xì)胞完整；中劑量給藥組和高劑量給藥組大鼠的主動(dòng)脈壁內(nèi)膜光滑，內(nèi)皮細(xì)胞完整，無奶油色病變，見少許脂肪沉積，無增生性改變。

3 討論

3.1 冠心病痰瘀模型的制作 對于冠心病的造膜方法中，給予高脂飼料喂養(yǎng)，是動(dòng)脈粥樣硬化模型制作的一個(gè)基礎(chǔ)，在高脂飼料喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上配合多種方法，如心肌缺血、球囊損傷、冠脈結(jié)扎以及維生素D3的注射等等，均可有效的促使動(dòng)脈硬化斑塊的形成，縮短模型制作的時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)采用給大鼠飼喂高脂飼料配合一次性腹腔注射維生素D3的方法，復(fù)制大鼠冠心病模型。考慮到大鼠沒有膽囊，膽鹽分泌不足，對膽固醇的吸收充分，因此，在高脂飼料中加入膽酸鈉，促進(jìn)大鼠對膽固醇的吸收。同時(shí)在高脂飼料中加入丙基硫氧嘧啶，以抑制大鼠甲狀腺功能亢進(jìn)，致使大鼠脂質(zhì)代謝紊亂，最終誘發(fā)大鼠高脂血癥的形成。

3.2 參紅化濁通絡(luò)顆粒方組方依據(jù) 本方由人參、丹參、紅景天、水蛭、絳香、瓜蔞、甘松、石菖蒲8味藥組成，本方主要功能是養(yǎng)心安神，化痰通絡(luò)。人參大補(bǔ)元?dú)猓堂撋颍采瘢F(xiàn)代研究可改善心臟功能，增加心肌收縮力；丹參祛瘀止痛，養(yǎng)血除煩安神，加強(qiáng)心肌收縮力，降低血黏度，改善微循環(huán)促進(jìn)組織的修復(fù)與再生；紅景天具有益氣活血，益智養(yǎng)心的功效，能降低心臟的負(fù)荷，改善心臟功能。紅景天與丹參2藥配伍，輔助人參，共奏穩(wěn)心、強(qiáng)心、改善心臟功能的作用。水蛭、降香、瓜蔞3味藥，共奏其化瘀理氣通絡(luò)之功效；干松理氣止痛，具有通絡(luò)功效；石菖蒲開竅凝神，化濕和胃，對于痰蒙神竅者具有良好的療效，研究［6－8］表明，石菖蒲中含有大量揮發(fā)油，其中二聚－細(xì)辛醚具有明顯降脂效果，α－細(xì)辛醚可顯著降低血清膽固醇，但此揮發(fā)油的降脂作用需要對石菖蒲進(jìn)行水煎醇沉，如未經(jīng)水煎醇沉，則該揮發(fā)油的降脂作用不確切。

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R241.0

A

1007－4813（2013）02－0336－02

2013－01－10）

國家中醫(yī)臨床研究基地建設(shè)項(xiàng)目。

陳 穎（1966－），女，主任醫(yī)師，博士研究生導(dǎo)師。研究方向：心血管內(nèi)科。