紫外分光光度法測定苯酚滴耳液中苯酚的含量

鄧慧穎

紫外分光光度法測定苯酚滴耳液中苯酚的含量

鄧慧穎

目的建立紫外分光光度法測定苯酚滴耳液中苯酚的含量。方法采用紫外分光光度法測定苯酚滴耳液中苯酚的含量，并與藥典規定的溴量法比較。結果通過實驗苯酚在270nm波長處有最大吸收，在10～50ug/ml范圍內，濃度與吸收度線性關系良好，其回歸方程A=0.0155C+0.0089,(r=0.9999),平均回收率為99.71%，RSD為0.31%(n=9)，測定結果與溴量法結果一致。結論此法操作簡便，準確可靠，快速穩定，與溴量法含量測定比較無顯著差異(P>0.05)，可作為苯酚滴耳液的含量測定方法，適用于基層醫院制劑的快速檢查。

苯酚滴耳液；含量測定；紫外分光光度法

苯酚滴耳液作為醫院常用制劑,收載于《中國醫院制劑規范》中，具有消炎、止痛的作用，臨床主要用于治療早期急性中耳炎及外耳道炎，制劑中主要成分苯酚具有刺激性及腐蝕性，故必須嚴格控制其含量。苯酚及其制劑的含量測定方法，《中華人民共和國藥典》(2010年版)[1]和《中國醫院制劑規范》均采用溴量法[2]，該法需要進行硫代硫酸鈉標定以及剩余滴定，操作繁瑣費時，測定結果常受一些因素干擾且不易掌握，不能適應制劑配制時快速測定的要求。本文根據苯酚滴耳液的紫外吸收特性，即苯酚在270nm波長處有最大吸收，而制劑中其它成分甘油在此波長處幾乎無吸收，建立紫外分光光度法用于苯酚滴耳液的快速含量測定，并對其科學性、準確性和可行性進行驗證。

1 儀器與試藥

1.1儀器 UV-2550PC紫外可見分光光度計(日本島津)，AB104-S電子天平(梅特勒-托利多)。

1.2試藥 苯酚(分析純，揚子化工有限公司，批號20110927，符合《中國藥典》2010年版規定)；甘油(分析純，石家莊帥華工貿有限公司，批號20111019，符合《中國藥典》2010年版規定)；蒸餾水(本院制劑室自制)；苯酚滴耳液(本院制劑室配制)。

2 處方與制備

2.1處方苯酚20 g，甘油適量。制備取苯酚加入適量甘油中，攪拌至溶解，再加甘油配成1000 ml，混勻，即得。

3 測定波長的選擇

3.1對照品貯備液的制備 精密稱取苯酚0.2003 g，置100 ml容量瓶中，加水溶解并稀釋到刻度，搖勻，制成濃度為2.003 mg/ml的苯酚貯備液。

3.2紫外吸收光譜的測定 精密量取苯酚貯備液1 ml，置100 ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，得濃度為20.03ug/ml的苯酚標準溶液；另取輔料甘油2.5 ml，置100 ml容量瓶中，同法稀釋，得到按苯酚滴耳液處方相當于含苯酚20ug/ml的甘油輔料溶液，以蒸餾水為空白，狹縫5nm，分別在200～400nm波長范圍內進行紫外光譜掃描，結果顯示苯酚標準溶液在210nm和270nm處有吸收峰，而甘油溶液在210nm波長處有少量吸收，在270nm處幾乎無吸收，與文獻報道的一致[3]。故選用270nm作為檢測波長。

4 線性關系考查

精密量取上述苯酚貯備液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 ml,置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，配制成10.0,20.0,30.0,40.0,50.0ug/ml五種不同濃度的標準溶液。以蒸餾水為空白，在270nm波長處測定各溶液的吸收度，以苯酚濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標繪制標準曲線，計算得回歸方程為A=0.0155C+0.0089，(r=0.9999)。結果表明，苯酚濃度在10.0150～50.0750ug/ml的范圍內與吸光度線性關系良好。

5 精密度試驗

精密量取本院制劑室配制的2%苯酚滴耳液10 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。再精密吸取稀釋液1 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得標示量為20.00ug/ml的溶液。采用紫外分光光度法在270nm波長處，以蒸餾水為空白，測定吸光度，連續測定6次。結果表明紫外分光光度法用于苯酚滴耳液的含量測定具有良好的精密度，RSD=0.20%。

6 穩定性試驗

精密量取本院制劑室配制的2%苯酚滴耳液10 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。再精密吸取稀釋液1 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。在室溫下密封、避光保存0、2、4、6、8、24、48 h后，采用紫外分光光度法在270nm波長處，以蒸餾水為空白，重復測定吸光度。結果表明，苯酚滴耳液供試品在48h內吸光度基本不變，穩定性良好，以吸光度計算相對標準偏差RSD=0.65%。

7 回收率試驗

精密量取甘油10 ml共9份，分別置250 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，按處方比例10 ml苯酚滴耳液中苯酚含量的80%、100%及120%，分別精密稱取已知含量的苯酚置上述250 ml容量瓶中，振搖使溶解，加蒸餾水至刻度，搖勻，以蒸餾水為空白，在270nm波長處分別測定吸光度，代入上述標準曲線的回歸方程中計算苯酚的含量，并計算回收率。結果表明輔料甘油對主成分苯酚的測定結果無影響，平均回收率為99.71%,RSD=0.31%(n=9)。

8 樣品的測定

取本院制劑室配制的2%苯酚滴耳液5批，精密量取10 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。再精密量取稀釋液1 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得標示量為20.00ug/ml的溶液。采用紫外分光光度法在270nm波長處，以蒸餾水為空白，測定吸光度，代入標準曲線計算以標示量為100%的含量，并與溴量法測定結果進行比較。對兩種方法的測定結果進行t檢驗，結果表明紫外分光光度法與溴量法無顯著差異(P>0.05)。

9 討論

《中國醫院制劑規范》采用溴量法測定苯酚滴耳液中苯酚的含量，操作步驟復雜、費時且終點不易判斷，試驗誤差較大。本文采用紫外分光光度法測定苯酚滴耳液的含量，具有回收率高，精密度良好及簡便快速、適用性廣、干擾小等特點，對兩種方法的測定結果進行t檢驗無顯著性差異(P>0.05)，符合《分析方法驗證》中“簡便、快速、準確、重現性好”的要求，說明紫外分光光度可代替溴量法用于苯酚滴耳液的含量測定，適用于醫院自制制劑的快速檢測。

[1] 中國國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部).2010年版.北京：人民衛生出版社.

[2] 潘學田.中國醫院制劑規范.北京：中國醫藥科技出版社，1995.

[3] 周蕾，邵麗曉.紫外分光光度法測定苯酚滴耳液的含量.海峽藥學，2005，17(4)：55-56.

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