海南甜瓜蔓枯病病原菌的有性階段鑒定

張學軍 王登明 伊鴻平 *

（1新疆農業科學院哈密瓜研究中心，新疆烏魯木齊 830052；2海南省甜瓜西瓜遺傳育種重點實驗室，海南三亞 572014）

甜瓜蔓枯病又叫黑斑病、黑腐病，是甜瓜上重要的土傳病害，可造成嚴重的經濟損失（Frantz & Jahn，2004；Joseph et al.，2009）。甜瓜蔓枯病還可侵染西瓜、籽瓜和黃瓜等瓜類作物，造成不同程度的減產（陳熙 等，1989；戴富明 等，2003）。1891年Fautrey和Roumegtuere首先在黃瓜上發現蔓枯病，其后Potebnia和Sterens（陳秀蓉 等，1993）也進行了相關研究，之后美國、瑞典、前蘇聯、日本等相繼發現了瓜類蔓枯病，不同程度地為害西瓜、甜瓜、黃瓜等葫蘆科作物。在我國，遼寧、黑龍江、陜西、廣西、吉林、新疆、上海、江蘇、甘肅等省市均有甜瓜蔓枯病的報道（陳秀蓉 等，1993；李偉 等，2008；胡鳳云，2012），但系統研究比較少，在對瓜類蔓枯病多年的研究工作中，從各地采集到的這一類病害的標本多見其無性階段，包括小型和大型孢子的分生孢子器的報道。1949年裘維蕃先生在美國對瓜類蔓枯病有性階段甜瓜球腔菌的形態和變異作了深入的研究，國內有關有性階段的正式報道是新疆農業大學賈菊生等（2003）報道了新疆溫室黃瓜蔓枯病的有性階段，鑒定為甜瓜球腔菌Mycosphaerella melonis（Pass. ）Chiu et J . C.Walk.，并詳細描述了該菌的形態特征。

2008年12月筆者在新疆農業科學院科技示范園（三亞）大棚采集甜瓜葉部病害標本，初步診斷為甜瓜蔓枯病，但與此前甜瓜蔓枯病病癥略有不同，鏡檢中，發現著生在甜瓜病體上的小黑點是蔓枯病病原菌的有性階段假囊殼。甜瓜蔓枯病有性階段在海南屬首次記錄。

1 甜瓜蔓枯病癥狀

甜瓜蔓枯病發病部位位于葉柄與葉片連接處，呈黑褐色，病部軟化，病斑上大量散生小黑點，沒有分泌琥珀色膠狀物。從癥狀上看，屬急性病型，在甜瓜莖上有系統發展的侵染現象，只是由下向上擴展時往往并非是呈整體式的，有時可見到由一方局部的側面向莖的上面發展，其長度可達5 cm左右。鏡檢發現，甜瓜莖部的小黑點為甜瓜蔓枯病病原菌的有性階段假囊殼，在病組織上同時發現無性階段分生孢子器，屬于有性階段與無性階段共存。

2 病原菌的形態特征

病原菌的假囊殼（圖1-A）為球形，具不明顯短頸，假囊殼絕大部分突起于表皮，散生、單生，黑色，直徑98.3～129.2 μm，孔口（圖1-A）圓形，直徑可達28～56 μm，未發現有兩個假囊殼連生的現象。假囊殼內無側絲，子囊著生在假囊殼底部，束狀生，圓筒形或棍棒形，以直型為主，多數兩側稍屈曲，子囊基部處明顯地向下漸變細，末端銳或鈍圓，無色透明，子囊大小（56.0～96.4）μm×（6.8～10.7）μm（圖1-B）。子囊內有8個子囊孢子，呈單行或雙行排列，1分隔，隔膜處明顯縊縮，橢球形，近基部向下變細，末端呈楔形，無色，子囊孢子大小（8.80～14.28）μm×（3.2～6.4）μm，未見有3細胞的子囊孢子（圖1-C）。該菌的形態、大小與裘維蕃等描述的甜瓜球腔菌一致，甜瓜球腔菌與小雙胞腔菌是同種異名，故按照現在國際慣例將本菌鑒定為小雙胞腔菌Didymella bryoniae（Auersw.） Rehm.。

3 討論

賈菊生等（2003）初步報道過黃瓜上的蔓枯病具有有性生殖的產孢功能，但在厚皮甜瓜上該菌是否也同樣具備有性階段的產孢功能，從數年來系統的專題研究結果看，從南疆的喀什、庫爾勒，東疆的哈密與吐魯番、鄯善、托克遜，北疆的伊寧、博樂、溫泉、精河、奎屯與瑪納斯等地采集到的瓜類病株上，都沒有報道過假囊殼菌態的存在。有關甜瓜蔓枯病有性階段假囊殼僅陳秀蓉和魏勇良（1997）報道過，甘肅蘭州地區多在7月上中旬采收白蘭瓜，此時正值高溫季節，且植株已接近衰枯，病株上可觀察到分生孢子器和子囊座，而河西地區的安西、民勤等地多在8月下旬采收，植株體內營養狀況雖可滿足，但氣溫偏低，所以僅形成分生孢子器而不形成子囊座。陳秀蓉和魏勇良（1997）認為在氣溫偏低，接近枯死的病株上僅產生分生孢子器，在氣溫偏高，接近枯死的病株上除產生分生孢子器外，還形成子囊座，即瓜類蔓枯病子實體的形成與植株的營養狀態有關。

海南是天然溫室，對于病原菌來說沒有越冬經歷，2009年12月底至2010年1月初，筆者在三亞發現甜瓜蔓枯病的有性階段，12月海南溫度范圍在18～29 ℃之間，相對濕度在55%～95%之間，且發病的植株沒有衰枯，生長正常，可見甜瓜蔓枯病有性階段的形成與植株營養狀態無關，與陳秀蓉和魏勇良（1997）的報道有所不同。甜瓜蔓枯病的有性階段在海南的發現充實了該病在自然侵染循環中的生活史，對病害發生的侵染循環研究，具有理論上的和生產實踐上的重要意義。但是，是什么條件促使其在海南產生有性階段值得進一步深入研究。

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