膀胱癌患者腫瘤組織Ki-67、CK7的表達及其臨床意義

羅松濤 王應洪 李緒鯤 柯井衛 唐義權

膀胱癌患者腫瘤組織Ki-67、CK7的表達及其臨床意義

羅松濤 王應洪 李緒鯤 柯井衛 唐義權

目的 探討膀胱癌組織中Ki-67與CK7的表達及其臨床意義。方法 采用免疫組化SP法對88例膀胱移行細胞癌組織中的Ki-67、CK7的表達水平進行檢測，并將其與患者的臨床特征及預后進行比較。結果 本組88例膀胱癌患者中，Ki-67與CK7的陽性表達率分別為43.2%（38/88）與54.5%（48/88）；淺表型膀胱癌組織中Ki-67陽性率顯著低于浸潤型（P＜0.05），CK7陽性率顯著高于浸潤型（P＜0.05）。Ki-67在腫瘤組織中的表達隨分級的增高而增加，CK7表達隨分級的增加而降低。淺表性膀胱癌2年內復發患者中Ki-67陽性率為73.3%，非復發組為54.0%，復發組顯著高于非復發組患者（P＜0.05）。結論 Ki-67與CK7表達與膀胱癌的臨床及病理分級存在一定的相關性，Ki-67表達陽性可能是術后復發的危險因素。

膀胱癌;Ki-67;CK7;免疫組織化學

膀胱癌是臨床上較為常見的泌尿系統惡性腫瘤，其發病確切原因仍不明確，可能與遺傳易感性、化學原料接觸等有關[1]。膀胱癌治療主要以手術為主，但患者的預后存在較大差異。有文獻報道，膀胱癌患者腫瘤組織中Ki-67和CK7的表達水平與膀胱癌的臨床特征及預后存在一定的關系，因此本研究采用免疫組化法SP法對88例膀胱癌組織中的Ki-67、CK7的表達進行檢測、評估其表達與患者臨床特征及預后的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2008年1月-2012年1月本科收治的88例膀胱癌患者的臨床資料，其中男54例，女34例；年齡41～82歲，平均（60.3±9.2）歲；淺表性腫瘤65例（其中Ta44例，T121例），浸潤型腫瘤 23例（其中T28例，T39例，T46例）；病理分級：G121例，G236例，G331例。

1.2 免疫組織化學檢測腫瘤標本 術后膀胱腫瘤標本采用免疫組化SP法檢測其Ki-67和CK7的表達水平。一抗分別為鼠抗Ki-67單抗與鼠抗人CK7單抗（產自Maxim公司）。組織切片脫蠟且水化之后，濃度為3%的雙氧水處理10～15min，過氧化酶阻斷溶液以及25℃條件下孵育10～15min。濃度為10%的山羊血清及室溫孵育5min。加入一抗，于4℃溫度條件下保存24h。生物素標記的二抗及SP復合物各為10min。DAB顯色，蘇木素復染，于透明條件下進行封片。以PBS替代一抗作陰性對照組，人乳腺癌組織作為陽性對照[2]。

1.3 判斷標準 每張切片隨機地對4個視野進行計數，共計數400個細胞，計算陽性細胞的構成比。判斷標準：陽性細胞≤10%為(-)；10～30%為（+），大于 30%為（++）[3]。

1.4 統計學方法 采用STATA13.0軟件完成，計量數據采t檢驗，計數資料采用用χ2檢驗，以P＜0.05為差異存在統計學意義。

2 結果

2.1 Ki-67與CK7在癌組織中的表達 在膀胱癌組織標本之中，Ki-67的陽性表達例數為38例，陽性表達率為43.2%，CK7陽性表達例數為48例，陽性表達率為54.5%。

2.2 Ki-67與CK7與腫瘤分期分級 淺表型膀胱癌組織中Ki-67陽性率顯著低于浸潤型（P＜0.05），CK7陽性率顯著高于浸潤型（P＜0.05）。Ki-67在腫瘤組織中的表達隨病理分級的增高而增加，CK7表達隨分級的增加而降低。見表1。

表1 Ki-67與CK7與腫瘤分期分級[n(%)]

2.3 Ki-67、CK7表達與腫瘤復發 65例淺表性膀胱癌經尿道膀胱腫瘤電切術后（TURBT）隨訪2年內無復發者為50例，復發者15例，復發率為23.1%。復發組Ki-67表達顯著高于未復發組（P＜0.05）；復發組與未復發組患者CK7表達陽性率無明顯差別（P＞0.05）。見表 2。

表2 Ki-67、CK7表達與腫瘤復發[n(%)]

3 討論

膀胱癌為泌尿系統常見腫瘤，且術后容易復發。因此探尋膀胱癌預后相關因素及復發指標成為研究熱點。Ki-67是目前較為肯定的核增殖標志基因。Ki-67在除G0期以外的細胞周期各時相均有表達，M期達最大表達峰[4]。另研究表明，CK7基因與細胞增殖有關，在調控上皮分化和成熟中具有重要作用[5]。CK7基因的缺失可導致表皮、乳腺、淚腺和前列腺發育障礙。免疫組化法檢測CK7的表達，發現CK7在正常上皮組織基底細胞及上皮來源腫瘤細胞中均有不同程度的表達[6]。

因此本研究采用免疫組化法SP膀胱癌中Ki-67、CK7的表達進行檢測、評價其表達水平與患者臨床特征及預后的關系。結果顯示：臨床分期以及病理分級之間，Ki-67與CK7的陽性表達率的差異有統計學意義；Ki-67在浸潤型膀胱癌組織與G3級癌組織中的陽性表達率較在其他組織中的陽性表達率要高。本組88例膀胱癌患者中，Ki-67與CK7的陽性表達率分別為43.2%（38/88）與54.5%（48/88）；淺表型膀胱癌組織中Ki-67陽性率顯著低于浸潤型，CK7陽性率顯著高于浸潤型。Ki-67在腫瘤組織中的表達隨分級的增高而增加，CK7表達隨分級的增加而降低。淺表性膀胱癌2年內復發患者中Ki-67陽性率顯著高于非復發組患者。Ki-67與CK7表達與膀胱癌的臨床及病理分期存在一定的相關性，Ki-67表達陽性可能是復發的術后復發的危險因素。因此，對于Ki-67表達陽性可能是術膀胱癌復發的重要指標，此類患者術后應加強隨訪觀察，強化術后膀胱灌注化療，降低術后腫瘤復發風險。

[1] Acikalin D,Oner U,Can C,et al.Predictive value of maspin and Ki-67 expression in transurethral resectionspecimens in patients with T1 bladder cancer[J].Tumori,2012,98(3):344-50.

[2] Bertz S,Otto W,Denzinger S,et al.Combination of CK20 and Ki-67 Immunostaining Analysis Predicts Recurrence,Progression,and Cancer-Specific Survival in pT1 Urothelial Bladder Cancer[J].Eur Urol,2012,6(8):466-472.

[3] Roninson IB.Tumor senescence as a determinant of drug response in vivo [J].Drug Resist Updat,2002,5(5):204-208.

[4] Michaelis M,Kleinschmidt MC,Barth S,et al.Anticancerefects of artesun ate in a panel of chemoresisrant neuroblastoma cell lines[J].Biochem Pharmacol,2010,79(2):130-136.

[5] Pichu S,Krishnamoorthy S,Shishkov A,et al.Knockdown of Ki-67 by dicer-substrate small interfering RNA sensitizes bladdercancer cells to curcumin-induced tumor inhibition[J].PLOS ONE,2012,7(11):e48567.

[6] 林芳,錢之玉,丁健,等.二輕青蒿素對乳腺癌MCF-7細胞的體外抑制作用[J].中國新藥雜志,2002,11(12):934-936.

10.3969/j.issn.1009-4393.2013.36.014

四川 646000 瀘州醫學院附屬中醫醫院 （羅松濤 王應洪李緒鯤 柯井衛 唐義權）

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