張西云,胡國元,李生慶,范玉霞,李志寧,王亭亭,黃 榮
(青海省畜牧獸醫科學院獸醫研究所,西寧810006)
2011年10月份以來,祁連縣央隆鄉托勒村三社25戶牧民母羊群發生以小腸出血、膽囊腫大為特征的高致死性疫病,1個月內共發病96只,死亡94只,致死率為97.92%,造成了較大的經濟損失。此起疫病病程為2~4d,經用抗生素治療后2只存活。該羊群6月份曾全群注射三聯苗(快疫、瘁狙、腸毒血癥)。
此次發病均為2歲以上成年母羊,2歲以下母羊和羯羊未見發病;發病區域僅限于冬季草場、高山草場,其他村社未見發病。25戶牧民存欄羊12 000只,發病率為0.8%。病羊曾用慶大霉素、消炎利膽片、油劑青霉素、土霉素、磺胺類藥物治療,效果不明顯。環丙沙星類抗生素有一定療效,但大部分仍然死亡。
發病初期體溫39℃~40.3℃,排黑綠色稀糞,食欲廢絕,喜食雪,精神不振、臥地不起,病程1~2 d,有的可達10d,有腹痛癥狀,發病母羊多數流產。皮下出血,小腸充氣、出血,膽囊腫大(正常的8~10倍),腹腔惡臭,其他臟器無明顯變化。
3.1 臟器觸片 分別取病死羊的心、肝、脾、肺及腎觸片,瑞氏染色、鏡檢,均未見到任何細菌。
3.2 臟器培養 分別取病死羊的心、肝、脾、肺及腎接種于鮮血斜面和厭氣肝湯中,37℃培養24h,結果心、肝、脾、肺及腎均無細菌生長。
3.3 小腸內容物培養 取病死羊的小腸內容物(血水)劃線接種于葡萄糖鮮血瓊脂平皿,37℃厭氣培養48h,挑選可疑菌落,接種于厭氣肝湯37℃培養24 h。結果由小腸內容物分離出2株產氣莢膜梭菌。此菌在鮮血瓊脂平板上形成表面光滑、隆起、半透明的菌落,外圍有透明溶血環,其在厭氣肝湯中4h開始生長、產氣,培養液混濁,48h后菌體沉淀于管底,上部清澈。涂片鏡檢可見革蘭染色陽性、中等大小的大桿菌。
3.4 動物試驗 兩株菌的培養物上清液分別以0.2mL/只的劑量,靜脈注射兩只小鼠,均在2min內死亡,以不同濃度稀釋后靜脈注射小鼠,測定其最小致死量。結果:2株菌的最小致死量分別為500 MLD/mL(小鼠靜脈注射)和200MLD/mL(小鼠靜脈注射)。
3.5 中和試驗 取上清液1mL分別與等量C型和D型魏氏梭菌定型血清混合,放于37℃恒溫箱內中和50min,分別靜脈注射2只小鼠(每只0.4 mL)。結果D型血清中和組小鼠在18min內死亡,C型血清中和組小鼠健活,表明分離菌為C型產氣莢膜梭菌。
根據臨床和實驗室檢驗,證明該地區綿羊所發生的急性死亡為綿羊瘁狙。
5.1 從病死羊腸內容物分離出了C型產氣莢膜梭菌,證明該地區此次發生在綿羊的急性死亡是綿羊瘁狙。
5.2 采取病料后應及時檢驗,因為腸內細菌極易死亡,檢菌時應將腸內容物直接接種鮮血平板,培養48h。挑菌時應挑選3~5個不同形態的菌落,分別測毒,因為引發綿羊瘁狙的產氣莢膜梭菌菌株之間生長特性和產毒特性均有較大差別。
5.3 產氣莢膜梭菌是土壤常在菌,秋季氣溫多變,多雨潮濕,加之轉群奔波可能造成綿羊體質降低而誘發本病。適時免疫接種羊三聯或四聯疫苗,尤其綿羊轉群或進入換季草場之前,加強免疫接種是預防本病發生最為可行的方法。