槭樹葉片類黃酮糖基轉移酶基因RT—PCR擴增體系優化

摘 要：以槭樹“秋天火焰”變色期秋季葉片為試材，采用改良CTAB法提取葉片總RNA，利用GenBank中相關物種的UFGT基因序列設計特異引物，進行RT-PCR擴增并對RT-PCR反應體系中的引物、退火溫度和循環次數進行優化，建立了槭樹葉片UFGT基因的RT-PCR擴增反應體系。

關鍵詞：槭樹；UFGT；RT-PCR

中圖分類號：Q781文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2013）03-0001-04

彩葉樹種的葉色表達是遺傳因素和外部環境（光照、溫度、水分和礦物質營養）共同作用的結果，二者通過改變樹種葉片中各種色素的種類、含量以及分布形成了多彩的葉片。彩葉樹種葉片呈現彩色的直接原因就是葉片中的色素種類和比例發生了變化。類黃酮糖基轉移酶（UDP glucose-flavonoid-3-o-glycosyltranferase，UFGT） 是花青苷合成途徑的最后一個酶，它使不穩定的花青素轉變成穩定的花青苷[1]，并且該酶催化多種花青苷，甚至可以催化黃酮醇的糖苷化。Boss等以黑色果皮的Shiraz葡萄品種的幾種不同組織為試材，檢測花青苷生物合成的幾個相關基因的表達情況，發現只有UFGT基因在果皮上特異表達，而其它的基因在各組織中均有表達；UFGT基因在有色葡萄中表達，而在白葡萄皮中不表達，說明UFGT基因是葡萄皮著色的關鍵基因[2，3]。

槭樹是重要的秋季色葉樹種，在世界各地園林景觀中廣泛應用。目前對其研究主要集中在栽培[4]、酶活性[5]、光合日變化[6，7]等方面，關于槭樹葉色表達相關基因克隆方面的研究則較少。本研究以槭樹秋季葉片為試材，對擴增UFGT基因的RT-PCR反應體系進行優化，從而建立起高效特異的槭樹葉片UFGT基因擴增PCR體系。……