氮素對平菇菌絲生長的影響

【摘要】本論文研究是以PDA培養基為研究對象，采用固體培養基培養食用真菌平菇一級菌種。本論文初探了幾種不同氮素如：檸檬酸鐵銨和草酸銨在不同的濃度條件下，對平菇一級菌種生長狀況的不同影響。在溫度28℃、濕度60%的條件下培養，實驗結果顯示：平菇最適宜氮素為0.4%的條件下生長最好。

【關鍵詞】平菇；施氮素；微生物發酵；影響

氮素是一切植物必需的大量營養元素之一，它是生物生長的重要物質基礎，對植株的器官建造、物質代謝、生化過程、果實產量及品質的形成等都有不可替代的作用。而且，氮是構成細胞原生質、核酸、磷脂、激素、維生素、生物堿及酶等的重要組分，因此充足的氮是細胞分裂的必要條件。

1.實驗內容

1.1供試材料

1.1.1供試菌株

試驗選用的品種—平菇-89為白城師范學院生物系微生物學實驗室保藏菌種。

1.1.2培養基

斜面培養基、馬鈴薯綜合培養基、液體菌種培養基、改良馬鈴薯綜合培養基。自然PH 值。分裝于：70個試管，每個試管加入2/5的培養基為最佳。

1.2試驗儀器與藥品

高壓蒸汽滅菌鍋，烘箱，鑷子，刀片，電熱套，電子稱，小燒杯，玻璃棒，量筒，超凈工作臺，酒精燈，精密試紙，牛皮紙，標簽筆，1N NaOH，1N HCl，蔗糖，瓊脂，紗布，95%醫用酒精，蒸餾水等。

1.3主要儀器的使用方法

1.3.1高壓滅菌鍋的使用方法

關閉放氣閥，通電后，待壓力表上升到0.05MPa時，打開放氣閥，放出空氣，待壓力表指針歸零后，再關閉放氣閥。對于培養基待壓力表上升達到0.105MPa（1210C）時開始計時15-30min；對高壓滅菌后不變質的物品，待壓力表上升到0.14MPa（1260C）時開始計時30min；對于一些布制品，也可高壓滅菌。

1.3.2恒溫箱的使用方法

接通電源，按說明書設置所需溫度，將溫度計放置烘箱內中心位置，測定實際溫度與所設溫度是否有偏差，如有按說明書進行校正或自行校正。

1.3.3超凈工作臺的使用方法

在接種的前20min，打開超凈工作臺的風機以及臺上的紫外燈；接種前10min時，關閉紫外燈；接種時打開照明燈；接種完畢后，要清理超凈工作臺，用紫外燈滅菌30min。

1.4試驗方法

1.4.1一級種培養基的制備及滅菌

（1）一級種培養基的制備：

用清水將馬鈴薯的表面洗凈，去皮后用電子稱稱取200g馬鈴薯，將其切成細條。事先用電熱套對裝有水的燒杯加熱，一段時間后，把馬鈴薯條放入已經沸騰的燒杯中，加熱30分鐘，同時要用玻璃棒不停地攪拌。再用濾布將其過濾，把濾液裝入量筒中并定容到1000ml。把液體倒入燒杯中加熱，將事先用電子稱稱好的20g蔗糖和20g瓊脂加入燒杯中并不停地攪拌以避免糊底。待瓊脂完全融化變得澄清時分裝于試管中：每個試管加入2/5的培養基，再將棉塞塞入試管封閉。塞入的棉塞占總棉塞的2/3。

（2）一級種培養基的滅菌：

將培養基放入高壓滅菌鍋內，關閉放氣閥，通電后，待壓力表上升到0.05MPa時，打開放氣閥，放出空氣，待壓力表指針歸零后，再關閉放氣閥。待壓力表上升達到0.105MPa（1210C）時開始計時30min。待滅菌結束將培養基取出，斜面處理：使培養基斜面占試管的3/4。

1.4.2接種

在接種的前20min，打開超凈工作臺的風機以及臺上的紫外燈；接種前10min時，關閉紫外燈；接種時打開照明燈。用酒精棉球擦手，將接種環在酒精燈上灼燒，取一級菌種放入斜面培養基中，再用棉塞封閉試管，以下雷同。接種完畢后，要清理超凈工作臺，用紫外燈滅菌30min。接種后的試管放入培養箱中，將溫度調到280C進行培養。每天觀察一次，挑選出污染試管，無污染的試管待下步試驗使用。

1.4.3不同濃度無機鹽的制備及滅菌

用精密天平分別稱取檸檬酸鐵銨0.025g、0.05g、0.2g、0.4g、0.5g；草酸銨0.025g、0.05g、0.2g、0.4g、0.5g，配制成50 ml的溶液，裝入十個三角瓶中進行滅菌。

1.4.4無菌室接種

將已經滅菌的培養基和無菌無機鹽分裝入30個培養皿中，具體是先把培養基倒入培養皿中，再將不同梯度的無機鹽倒入培養皿中，每一梯度有三個重復樣品，并標記。待冷卻后進行接種。注意同一梯度的培養皿所接菌種的量要相同。接種后放入280C的培養箱中進行觀察。

1.5培養與觀察

放入培養箱后，每天觀察一次，在第二天待菌種復活有長勢后用記號筆標記下生長起點，一周后，再次標記生長終點，并測量間距。

2.結果與分析

實驗結果：

表1 不同梯度氮素對菌絲生長的影響

通過對菌種長勢的觀察及表1的數據顯示：

（1）不同梯度檸檬酸鐵銨對平菇一級種菌絲生長的影響不同，濃度為0.4%的檸檬酸鐵銨的菌種長勢子最好。在0.05%-0.4%范圍內隨著濃度的增加菌種長勢加快，濃度達到0.4%的時候長勢最好，但是隨著濃度的增加（0.4%-1%）平菇一級種菌絲生長呈下降趨勢。

（2）不同梯度的草酸銨對平菇一級種菌絲生長的影響，在0.05%-0.4%范圍內隨著濃度的增加菌種長勢加快，濃度達到0.4%的時候長勢最好，但是隨著濃度的增加（0.4%-1%）平菇一級種菌絲生長呈下降趨勢，生長最好的是濃度為0.4%的草酸銨。

（3）從檸檬酸鐵銨與草酸銨對平菇一級種菌絲生長的影響來看，檸檬酸鐵銨對平菇一級種菌絲生長更顯著，可能與鐵離子的協同作用有關。

3.結論

本實驗研究結果表明，不同梯度檸檬酸鐵銨和草酸銨對菌種生長的影響不同，但是兩組實驗數據結果顯示，檸檬酸鐵銨和草酸銨都是濃度為0.4%的時候使菌絲的長勢最好，說明0.4%的銨鹽對平菇一級種菌絲的生長最為適宜；從兩種鹽比較來看檸檬酸銨對菌絲生長的促進作用要比草酸銨好。

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