基底細胞樣型乳腺癌病理形態特征、免疫表型與分子病理檢測的相關性

[摘要] 目的 觀察基底細胞樣乳腺癌（basal-like breast carcinoma，BLBC）的病理形態特征，探討基底細胞樣乳腺癌的免疫表型特點并與之分子檢測的相關性。 方法 對177例BLBC進行形態學觀察及免疫組化EGFR、CK5/6檢測，再從中挑選10例進行熒光原位雜交（FISH）檢測。 結果 BLBC是一組組織形態上呈巢片狀排列、無腺管形成、大多為推進性邊緣、地圖樣壞死、核分裂象活躍的、組織學幾乎均為Ⅲ級、免疫表型ER、PR及C-erbB-2陰性、EGFR和/或CK5/6陽性的乳腺癌；有EGFR基因擴增的患者其淋巴結轉移率更高（P ＜ 0.05）。 結論 BLBC是近年來比較熱點的一種新的乳腺癌亞型，具有獨特的組織形態特點、免疫組化特征及分子生物學特點，已越來越得到人們的重視和深度認識。

[關鍵詞] 乳腺癌；基底細胞樣；免疫表型；分子病理

[中圖分類號] R737.9 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2012）36-0112-03

乳腺癌是一種高度異質性的腫瘤，其發病率有逐年上升的趨勢，而且無論組織形態、免疫表型、分子生物學特征還是治療上都有非常大的差異，因此了解這些差異可以對患者實施更有針對性的治療。當今國際病理學專家提倡根據cDNA組織芯片基因表型將乳腺癌分為五種亞型：腔A型（Luminal A）、腔B型（Lumina B）、正常乳腺樣型（normal breast-like）、HER-2過表達型（HER-2 overexpressing）、基底細胞樣型（basal-like），它們具有獨立的生物學行為和臨床預后[1，2]。BLBC是具有不良臨床預后的一種乳腺癌的獨立亞型，我們應用免疫組化方法篩選出177例BLBC，探討其病理形態特征、免疫表型與分子病理檢測，為乳腺癌的臨床診斷與治療提供線索。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集本院2010年7月～2012年6月病理診斷為浸潤性乳腺癌手術標本1101例。乳腺BLBC的診斷標準為：ER、PR、HER2陰性，EGFR和/或CK5/6陽性。根據此標準，我們在1 101例乳腺浸潤性癌中篩選出BLBC 177例。組織經10%福爾馬林固定，常規石蠟包埋、切片，HE染色。

1.2 觀察指標

組織學分級、腫瘤的結構特征及細胞特征、生長方式、核分裂像及淋巴結轉移情況。

1.3 免疫組化及結果判定

采用SP法，一抗為鼠抗人單克隆抗體，包括CK5/6、EGFR，抗體及SP試劑盒均購自福建邁新生物科技有限公司，具體操作步驟按照說明書。CK5/6、EGFR呈胞膜和（或）漿染色，按陽性細胞百分數分為4級：-，+，2+，3+。

1.4 FISH方法及結果判定

采用熒光原位雜交法，EGFR基因檢測試劑盒購自廣州安必平醫藥科技有限公司，具體操作步驟按照說明書。桔紅色為EGFR，綠色為CEP7，兩種比值均大于2∶1，提示EGFR基因有擴增。

1.5 統計學處理

采用SPSS17.0軟件進行統計學分析， P < 0.05表示差異有統計學意義，P < 0.01表示差異有高度統計學意義。

2 結果

2.1臨床資料

1 101例浸潤性乳腺癌均為女性，其中篩選出BLBC 177例（16.1%），年齡24～88歲，平均49.3歲，其中76例（42.9%）有淋巴結轉移。

2.2 病理形態特征

BLBC呈實性巢片狀排列，無腺管形成，大多為推進性邊緣，地圖樣壞死，周圍有較少纖維結締組織分隔，多數腫瘤周圍有大量淋巴細胞浸潤；腫瘤細胞通常呈合體狀，境界不清，胞漿不豐富，核圓形或卵圓形，核染色質粗，核仁易見，核分裂象活躍、組織學幾乎均為Ⅲ級。

2.3 EGFR、CK5/6的表達分析

177例BLBC中，EGFR陽性表達135例，見圖1；CK5/6陽性表達136例；EGFR、CK5/6的陽性表達率分別為76.3%（135/177）、76.8%（136/177）。

2.4 EGFR擴增情況與淋巴結轉移的相關性分析

177例BLBC中76例有區域淋巴結的轉移，區域淋巴結轉移率為42.9%；177例BLBC中挑選10例行熒光原位雜交檢測EGFR擴增情況，發現4例（40%）有EGFR基因擴增，見圖2；有EGFR基因擴增的患者其淋巴結轉移率更高（P ＜ 0.05），見表1。

2.5 EGFR表達與其擴增情況的相關性分析

從177例BLBC中挑選10例進行EGFR的FISH檢測，其中9例（90%）有EGFR蛋白過表達，4例（40%）有EGFR基因擴增，4例EGFR基因擴增的均存在EGFR蛋白的過表達，1例無EGFR蛋白過表達的無EGFR基因的擴增。EGFR基因擴增情況與EGFR蛋白表達情況無相關性（P ＞ 0.05），見表1。

3 討論

近年來根據基因表型將乳腺癌分為五種亞型：腔A型（Luminal A）、腔B型（Lumina B）、正常乳腺樣型（normal breast-like）、HER-2過表達型（HER-2 overexpressing）、基底細胞樣型（basal-like）[3]。基底細胞樣型乳腺癌是浸潤性乳腺癌的一種亞型，大約15%的浸潤性導管癌是BLBC，而大多數BLBC是浸潤性導管癌，少數為典型或不典型髓樣癌、化生性癌、腺樣囊性癌、鱗狀細胞癌或黏液表皮樣癌。本研究從1 101例浸潤性導管癌中篩選出177例BLBC，BLBC所占的比例為16%，與上述比例相近。而乳腺癌中大約有15%～20%是BLBC，BLBC患者的平均年齡似乎比其他類型乳腺癌患者要更年輕。

一項大樣本研究發現絕經期前的婦女有著較高的基底細胞樣乳腺癌（BLBC）發病率[4]。與BLBC相關的危險因素包括月經初潮年齡小、未哺乳或哺乳少、使用藥物抑制乳汁分泌、高體重指數等。BRCA1突變、MYBL2基因G/G都增加了BLBC的患病風險[5]。一些研究發現BLBC腫塊的直徑比其他類型乳腺癌更大，而有的研究表明兩者并沒有不同。另外，與其他類型乳腺癌相比，腋窩淋巴結轉移率的高低也存在著較大的爭議；BLBC腫塊大小與腋窩淋巴結轉移無明顯的相關性[6]。本研究發現有EGFR基因擴增的患者其淋巴結轉移率更高，由于樣本量小，需增加樣本量進一步研究。

BLBC中ER、PR、HER-2的mRNA表達水平低，而增殖基因表達水平高，且具有基底細胞的基因表型，例如EGFR與BLBC預后不良有關[7]。乳腺癌干細胞表達多種BLBC基因，相應地，BLBC也表達多種乳腺癌干細胞基因。然而，這并不能說明BLBC的起源。BLBC可能起源于一個不表達ER的干細胞或祖細胞，BRCA1乳腺癌起源于一個ER陰性的腺腔上皮祖細胞，ER陰性祖細胞向ER陽性祖細胞的轉變需要BRCA1的參與，這與基底細胞樣乳腺癌（BLBC）BRCA1功能的缺失相一致[8]。

EGFR基因突變在乳腺癌中比較少見，而一些乳腺癌患者可以發現EGFR基因擴增。此研究中我們發現10例基底細胞乳腺癌中有4例存在EGFR基因擴增，擴增率并不低。此外，EGFR基因在BLBC存在高表達，本研究數據顯示EGFR的陽性表達率為76.3%，表達率高。BLBC屬于三陰乳腺癌的一種，三陰乳腺癌大約占所有乳腺癌的10%～17%。有淋巴結或遠處轉移的患者比無轉移的患者EGFR表達的水平更高[9]。本研究發現有EGFR基因擴增的患者其淋巴結轉移率更高，以上與本研究結果相一致。有研究培養乳腺癌上皮細胞，發現部分抑制BRCA1的功能就能誘導EGFR的表達及增加表達EGFR的腫瘤干細胞樣細胞的水平，這表明EGFR受體為乳腺癌早期轉移提供了有利的條件。

BLBC比其他類型的乳腺癌的預后更差，其無轉移生存率及總生存率都較低。BLBC容易發生轉移，3年內轉移率很高，腦和肺最容易受累。然而，不是所有的患者的預后都差。目前為止，判斷一個患者為基底細胞樣乳腺癌的標準只有依靠免疫組化檢測，這種判定方法還不夠理想[10，11]。

基底細胞樣乳腺癌是一種特殊類型的乳腺癌，與其他類型乳腺癌相比有著不同的流行病學、組織學及分子病理學特征，預后差，即使使用化療藥物，甚至化療藥物對BLBC無明顯療效。目前，沒有常規診斷這種類型乳腺癌的方法，BLBC患者的治療方法與其他類型乳腺癌患者相似。對BLBC的分子病理分型對其預后及治療都有一定的指導意義。EGFR與BLBC關系密切，為以后研究針對BLBC的靶向藥物提供了依據。

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（收稿日期：2012-11-07）