SHH在胃癌組織中的表達及臨床意義

劉森林 譚衛澤 龍劍斌

(邵陽市中心醫院 湖南邵陽 422000)

胃癌是我國常見的惡性腫瘤,發病率和死亡率較高,胃癌的發生發展與遺傳、腫瘤抑制基因失活、癌基因激活等多種基因因素有關[1],而最近國外有研究發現SHH可通過激活癌基因引發多種惡性腫瘤[2]。SHH的表達與胃癌的浸潤程度、TNM分期以及淋巴結轉移情況等的相關性仍在研究階段,本文以2011年1月至2011年12月期間本院收治的68例胃癌患者為研究對象,對SHH的表達與臨床病理特征的關系進行了探討和分析,現闡述如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2011年1月至2011年12月期間本院收治的胃癌患者68例,均經手術取病理活組織確診為胃癌,所有患者在手術前均未接受過放、化療,其中男35例,女33例;年齡在35～74歲之間,平均年齡為(54.32±12.56)歲;腫瘤病灶直徑≤5cm者41例,＞5cm者27例;腫瘤位置為:胃底15例,胃體13例,胃竇40例;分化程度:高分化12例,中分化18例,低分化16例,未分化22例;根據國際抗癌聯盟(UICC)制定的胃癌TNM分期標準,Ⅰ期10例,Ⅱ期18例,Ⅲ期23例,Ⅳ期17例;胃癌活組織經手術切除后用10%甲醛固定,再經梯度酒精脫水,經石蠟包埋后切成5μm的薄片貼在玻片上,用烤箱烘烤,溫度調節為60℃,時間為2d,最后用SP法進行免疫組織化學染色。

1.2 檢測方法

1.2.1 儀器及試劑的選擇 檢測試劑選用SP-9001二步法免疫組化試劑、濃縮型DAB試劑盒、Citrate檸檬酸鹽緩沖液0.01mL、磷酸鹽緩沖液0.01mL;實驗抗體選用兔抗人SHH單克隆抗體,工作濃度為1∶50;儀器選用日本OLYMPUS公司提供的研究級顯微鏡;生物組織全自動脫水機由上海西域機電系統有限公司提供;石蠟包埋機和切片機均由德國LEICA公司提供。

1.2.2 免疫組織化學染色 免疫組織檢測系統為SP法,選用熱修復抗原修復方法,抗原修復液為1mmol/LEDTA,所有染色操作均嚴格按照使用說明書進行,最后進行DAB顯色。

1.2.3 設計對照組 陽性對照選用已知SHH陽性的結腸癌組織,陰性對照用PBS代替一抗。

1.2.4 結果判斷 SHH主要在細胞漿內表達,注意觀察細胞的胞漿,如出現棕褐色顆粒則為SHH陽性細胞;在400倍顯微鏡鏡下隨機觀察5個區域及至少500個上皮細胞,根據陽性細胞的比例對每張切片進行分級:0分為陰性,評分≥1分即為陽性;陽性率≤30%記為1分,陽性率30%～70%記為2分;陽性率≥70%即為3分。

1.3 統計學方法

應用SPSS 11.5軟件對數據進行分析,組間比較采用χ2檢驗,相關性采用Spearman秩相關分析,P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 SHH表達與TNM分期的關系

68例胃癌組織標本中SHH陽性表達45例,陽性表達率為66.18%,TNM分期:Ⅰ期的SHH陽性表達率為10.00%、Ⅱ期為44.44%、Ⅲ期中為82.61%、Ⅳ期為94.12%,差異具有統計學意義,P＜0.05，見表1。

表1 SHH在胃癌組織中的表達及臨床意義

2.2 SHH表達與腫瘤分化程度的關系

SHH表達在高分化胃癌組織中的陽性率為33.33%,中分化胃癌中的陽性率為44.44%,低分化的陽性率為56.25%,未分化的陽性率為68.75%,P＜0.05,差異具有統計學意義,見表1。

2.3 SHH表達與淋巴結轉移及浸潤深度的關系

有淋巴結轉移的患者的SHH陽性率為82.86%,無淋巴結轉移的患者的SHH陽性率為48.48%,差異具有統計學意義,P<0.05。浸潤深度為T3+T4的陽性率為79.31%,浸潤深度為T1+T2的陽性率為48.72%,P＜0.05,差異具有統計學意義，見表1。

3 討論

人類的SHH基因位于7號染色體長臂的遠端,可編碼生成SHH前體蛋白,SHH前體蛋白可經自我水解和加工形成氨基末端分泌肽,此氨基末端信號肽具有分泌蛋白的功能,可與多種細胞進行相互作用,近年來發現SHH可通過激活癌基因而與多種惡性腫瘤的發生發展密切相關。在正常的胃組織中,SHH蛋白由胃壁細胞產生并分泌,而在胃癌患者的癌組織中,SHH的表達可能與胃癌的分期、分化、淋巴轉移、浸潤等相關[3]。SHH蛋白可參與SHH信號通路的轉導,并可以調控腫瘤的浸潤轉移及細胞分化,從而影響腫瘤的分期;SHH蛋白在干細胞的分裂、分化、死亡等過程中起著重要作用,并且根據SHH表達的差異,影響正常胃黏膜上皮細胞的分化,使其停止在不同的分期,因此,SHH表達的差異可能是引發胃黏膜上皮發生癌變的重要原因[4]。本文研究中,SHH的表達陽性率隨胃癌TNM分期而增強,與分化程度呈負相關,并淋巴結轉移及浸潤較深者呈密切相關,說明SHH的表達可提示胃癌的預后,陽性率越高,預后越差。

綜上所述,SHH蛋白在大多數胃癌組織中表達升高,其表達與胃癌的浸潤程度、TNM分期以及淋巴結轉移情況密切有關,可將其作為胃癌的診斷、療效判斷的重要指標。

[1] 陳小魚,吳釗,王子衛.SHH在胃癌組織中的表達及臨床意義[J].重慶醫科大學學報,2010，35(3):372～374.

[2] Alakus H,Grass G,Hennecken J K,et al.Clinic pathological significance of MMP-2 and its specific inhibitor TIMP-2 in gastric cancer[J].Histol Histopathol,2008,23(8):917～923.

[3] 王軍,賈育紅,張志勇.Shh和Ptch在胃癌中的表達及其臨床意義[J].免疫學雜志,2011,27(6):544～546.

[4] 馮亞光,魏正強.Shh、Gli1、Foxm1蛋白在胃癌中的表達及臨床意義[J].廣東醫學,2011,32(19):2536～2538.