用免疫組化的方法研究E-cadherinN-cadherin在胃癌中的表達

莊 英

黑龍江省黑河市第一人民醫院病理科，黑龍江黑河 223859

胃癌是常見的惡性腫瘤之一。 在臨床上胃癌治療失敗的主要原因是腫瘤轉移，這也是腫瘤研究的重點。 研究發現，在某些上皮癌中有N-cadherin 的反常表達，且在增強癌細胞的侵襲和轉移方面較E-cadherin 低表達或不表達更為明顯和直接，這之中可能存在E-cadherin 向N-cadherin 的轉化，并認為這是EMT 的一個重要機制[1]。 本文對96 例胃癌組織標本進行免疫組織化學方法的蛋白檢測，探討E-cadherin 與N-cadherin 在胃癌中的表達情況。

1 . 資料與方法

1.1 一般資料

收集本院2004年6月～2010年5月間術前均未接受化療及放療胃癌患者的切除標本96 例。 其中男59 例，女37 例；年齡24～78 歲，平均年齡56.2 歲。 腫瘤組織學類型按WHO 分型標準，包括高分化腺癌15 例，中分化腺癌29 例，低分化腺癌52 例。 將上述標本安癌細胞浸潤程度分為超過漿膜層68 例，未超過漿膜層28 例。發生局部淋巴轉移72 例，無局部淋巴轉移24 例。另選取癌旁組織80 例為對照組。 所有標本術前均未行放療和化療。 標本用10%中性甲醛固定，常規石蠟包埋，厚連續切片以備免疫組化應用。

1.2 方法

采用Elivision 二步法免疫組化染色。 染色步驟嚴格按照說明書操作，DAB 顯色，蘇木素復染，脫水透明封片。陽性對照采用已知陽性對照片PBS 代替一抗作空白對照。

1.3 結果判定

E-cadherin、N-cadherin 以細胞質內出現棕黃色顆粒為陽性表達，N-cadherin 按照陽性細胞占視野中總細胞的百分比劃分陽性與陰性，＜20%為陰性，≥20%為陽性。 E-cadherin 陽性判定標準為陽性細胞數＜90%為陰性，≥90%為陽性。

1.4 統計學方法

采用SPSS 11.0 軟件進行統計學分析。采用χ2檢驗，P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 E-cadherin、N-cadherin 表達情況

胃癌組織中E-cadherin 的陽性表達率為37.5%(36／96)，低于癌旁組織100%(80／80)，兩者比較差異有顯著性(P < 0.05)；Ncadherin 陽性率為44.8%(43／96)， 高于癌旁組織l1.3%(9／80)，兩者比較差異有顯著性(P < 0.05)。

2.2 胃癌組織中N-cadherinE-cadhefin 的表達與臨床病理因素的關系

根據癌組織分化程度、浸潤程度、淋巴結轉移情況對96 例胃癌組織進行分組比較N-cadherin 與E-cadhefin 的表達情況，結果見表1。

表1 胃癌組織中N-cadherinE-cadhefin 的表達與臨床病理因素的關系（例）

3 討論

E-cadherin 和N-cadherin 是與腫瘤轉移關系最密切的兩種類型。E-cadherin 屬于介導同型細胞相互粘附性的跨膜糖蛋白，除具有調節胚胎組織的發育、組織形成、參與細胞與細胞間信息傳遞交流等作用外，對促進細胞的粘附聚集、維持上皮形態結構的完整性、維持細胞極性和參與分化調節也至關重要[2]。 大量的臨床病理研究證實，低分化腫瘤中的E-cadherin 表達完全喪失或下調。E-cadherin基因定位于16 號染色體，N-cadherin 基因定位于18 號染色體。 但二者在腫瘤轉移中的作用卻相反，有學者提出了“鈣粘蛋白轉換”(cadherin switch)的概念，并認為這是EMT 的一個重要機制[3]。本組研究顯示，隨著腫瘤分化程度的增高，N-cadherin 的陽性表達降低，而E-cadherin 的表達增高，兩者呈負相關。 同時，我們認為E-cadherin的表達下降和N-cadherin 表達增加與胃癌的惡化、轉移有關同時在胃癌中可能也存在著E-cadherin 向N-cadherin 轉化現象。

胃癌EMT 與侵襲轉移是多因素共同作用的復雜病理過程.E-cadherin 蛋白的低表達與N-cadherin 的反常表達發揮重要作用，有待于更深入的研究。

[1] 劉愛東,劉士生,許志萍，等.E-cadherin 在胃癌中的表達及意義[J].廣東醫學，2007，28（11）.

[2] 吳晶晶,王貴吉,張明智.N-cadherin 和MMP-3 在胃癌中的表達及意義[J].中國現代醫生，2010,48(23).

[3] Lascombe I，Clairotte A，Fauconnet S，et a1.N-cadherin as anovel prognosUc marker of progression in superficial urothelial tumors [J].Clin Cancer Res，2006，12(9)：2780-2787.