4種病毒性豬病流行病學(xué)調(diào)查與分析

倪 嬌，隋軍鋒，焦連國，侯高偉，劉天倫，呂帥陽，趙亞榮

(1.北京大北農(nóng)動物醫(yī)學(xué)研究中心，北京 100097;2.威海市動物衛(wèi)生監(jiān)督所，山東威海 264200)

近年來，養(yǎng)豬業(yè)迅速發(fā)展，不少豬場規(guī)模進(jìn)一步擴(kuò)大，一些新建豬場應(yīng)運(yùn)而生。然而，這些豬場面臨的疾病威脅也更加嚴(yán)峻，豬傳染病種類逐漸增多。雖然新病不斷出現(xiàn)［1］，豬瘟(CSF)、豬圓環(huán)病毒病(PCVD)、豬藍(lán)耳病(PRRS)、豬偽狂犬病(PR)等病毒性疾病依然是影響?zhàn)B豬業(yè)的主要疾病。為了更好地了解目前我國豬場部分常見病毒性疾病流行特點，本文對我國不同地區(qū)規(guī)模化豬場在2010年6月－2011年9月期間4種病毒性疾病進(jìn)行了監(jiān)測。

1 材料與方法

1.1 待檢病料和血清 2010年6月－2011年9月期間來自全國20個省市的病料和血清樣品共計13824份，其中病料樣品來自發(fā)病豬場，用于檢測偽狂犬野毒的血清樣品來自免疫gE基因缺失疫苗的豬場，檢測份數(shù)共計6699頭份;用于檢測抗體的血清來自不同背景的豬場，檢測份數(shù)共計7125份。

1.2 檢測方法 采用PCR/RT－PCR方法進(jìn)行豬瘟(CSF)、豬圓環(huán)病毒病(PCVD)、豬藍(lán)耳病(PRRS)、豬偽狂犬病(PR)4種疾病的病料樣品抗原檢測，采用ELISA法檢測豬偽狂犬病(PR)的血清樣品PRV－gPI抗體;4種疾病的抗體水平檢測均采用ELISA法。

1.3 檢測試劑 4種疾病抗原檢測所用PCR/RTPCR提取試劑盒購自全式金公司，擴(kuò)增 CSFV、PCV2、PRRSV、HP － PRRSV、PRV 的引物分別來自E2編碼區(qū)、ORF2編碼區(qū)、ORF7編碼區(qū)、Nsp2編碼區(qū)和gE編碼區(qū);豬偽狂犬病gPI抗體檢測采用的ELISA鑒別診斷試劑盒購自美國IDEXX公司;豬瘟抗體和豬偽狂犬gB抗體檢測采用的ELISA診斷試劑盒購自美國IDEXX公司;豬藍(lán)耳病和豬圓環(huán)病毒病抗體檢測采用的ELISA診斷試劑盒均購自武漢科前動物生物制品有限責(zé)任公司。

2 結(jié)果

2.1 4種疾病的抗原和抗體監(jiān)測情況 2010年6月－2011年9月期間共檢測來自全國20個省市的病料和血清樣品。各種疾病具體的檢測份數(shù)和檢測場數(shù)，以及相應(yīng)的陽性情況參見表1。抗原檢測中，樣品陽性率和豬場陽性率最高的均是PCVD，最低的均是PR;抗體水平檢測中，抗體水平最高的是PR，最低的是PCVD。

表1 2010年6月－2011年9月期間4種疾病抗原和抗體監(jiān)測統(tǒng)計表

2.2 不同省市的抗原檢測情況比對 對20個省市中樣品較多的16個省市4種疾病抗原檢測陽性率進(jìn)行比對，具體比對結(jié)果參見圖1。

圖1 國內(nèi)16個省市4種疾病抗原檢測陽性率比對情況(河南、江蘇的PR未測，江西的PCVD未測)

由圖1可以看出:各省的PCVD抗原陽性率均很高，最高的河南(4/4)和江蘇(5/5)均達(dá)到100%，浙江和河北抗原陽性率均很高，分別達(dá)到88.89%(8/9)和82.86%(58/70)，較低的天津和內(nèi)蒙古也達(dá)到了25%(1/4)和30.23%(13/43);PR的抗原陽性率均很低，最高的是陜西，為40.45%(36/89)，安徽和內(nèi)蒙古陽性率僅為0%(0/27)和0.59%(1/170);CSF和PRRS在各省之間差異均很大，CSF最低陽性率是安徽和河南，均為0%(0/13，0/91)，較高的是天津和陜西，分別為 78.95%(15/19)和65.00%(26/40);PRRS最低陽性率是江西，為0%(0/13)，較低的黑龍江僅為15.08%(19/126)，較高的是河南 100%(4/4)、江蘇(15/15)和陜西73.47%(36/49)。

2.3 PR的抗原檢測和gPI抗體檢測比對情況 采用PCR方法對138個送檢豬場送檢的病料樣品進(jìn)行抗原檢測，樣品陽性率達(dá)到6.57%，用ELISA方法對147個送檢豬場送檢的血清樣品進(jìn)行g(shù)PI抗體檢測，樣品陽性率達(dá)到10.58%。具體比對情況參見表2。

表2 PR的抗原和PRV－gPI抗體檢測比對情況表

2.4 引起 PRRS的毒株鑒別診斷 目前，引起PRRS的毒株有經(jīng)典毒株P(guān)RRSV，同時也有引起高致病性藍(lán)耳病的變異毒株HP－PRRSV。本文采用不同的引物、RT－PCR方法進(jìn)行毒株鑒別檢測，當(dāng)用擴(kuò)增PRRSV的引物擴(kuò)增為陽性，而用擴(kuò)增HP－PRRSV的引物擴(kuò)增為陰性時，判為PRRSV;兩者同時為陽性時，判為HP－PRRSV。結(jié)果顯示:PRRSV的陽性率為38.43%，HP－PRRSV 的陽性率為35.83%，具體數(shù)據(jù)參見表3。

表3 引起PRRS的毒株鑒別情況表

3 分析與討論

養(yǎng)豬業(yè)的壓力來源于管理、飼養(yǎng)、疫病等各個方面，疫病是最主要的危害，并且從近幾年農(nóng)業(yè)部發(fā)布的全國生豬疫情通報分析，在多重感染的疾病中，80%是病毒病［2］。由此可見，病毒性疾病已經(jīng)占據(jù)首要位置，值得關(guān)注。很多專家均認(rèn)為在眾多病毒性疾病中，豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病和豬圓環(huán)病毒病等仍是影響?zhàn)B豬業(yè)的主要疫病［3－4］。在2010年6月－2011年9月期間對全國20個省市的病料和血清監(jiān)測結(jié)果表明:4大疾病的流行范圍非常廣泛，普遍存在，PCVD位居首位，其次是PRRS、CSF和PR;PCVD的抗原陽性率和豬場陽性率最高，整體抗體水平最低，PR的抗原陽性率和豬場陽性率最低，整體抗體水平最高，其中抗原陽性率的檢測與2010年上半年的檢測結(jié)果基本一致［5］。雖然抗原抗體檢測不是一一對應(yīng)的關(guān)系，并且大多數(shù)抗原檢測沒有進(jìn)行疫苗毒和野毒的鑒別檢驗，但是根據(jù)送檢樣品的豬場免疫背景綜合分析，基本能夠從整體上反映出疫苗免疫的重要性。豬偽狂犬病抗原檢測是鑒別檢測，只要是陽性即為野毒感染，本文結(jié)果為抗原陽性率低、抗體陽性率高，有力地證實了豬偽狂犬疫苗發(fā)揮了一定的保護(hù)作用。

從各省市的病原檢測陽性率比對分析結(jié)果來看，不同疫病在不同地區(qū)的流行情況有所不同，各省的PCVD抗原陽性率均很高，PR的抗原陽性率均很低，CSF和PRRS的流行在各省市之間差異均很大。這個比對結(jié)果說明可能與各地區(qū)的防疫措施、免疫技術(shù)、使用疫苗的質(zhì)量和免疫程序等各種因素有一定關(guān)系。

目前，由于豬偽狂犬疫苗基本都是基因缺失苗，所以針對PR的病原檢測主要采用PCR和gPI抗體檢測兩種方法，本文的結(jié)果證明了兩種方法檢測的結(jié)果基本一致。

豬藍(lán)耳病依舊是侵害我國養(yǎng)豬業(yè)的病毒病之一，并且毒株呈多樣化趨勢。楊漢春教授指出HP－PRRSV廣泛流行和傳播，是引發(fā)豬繁殖與呼吸綜合征疫情的優(yōu)勢流行毒株，其致病性與毒力沒有降低，只是基因組發(fā)生了一些微小的變異;還指出同一個豬場使用兩種(不同毒株)以上的活疫苗、免疫次數(shù)過頻會加劇豬繁殖與呼吸綜合征病毒的變異、疫苗毒株間以及疫苗毒株與野毒株間的重組機(jī)會，從而導(dǎo)致新毒株的產(chǎn)生，將會使我國的豬繁殖與呼吸綜合征越來越復(fù)雜［3］。本文的檢測結(jié)果也證實了這一現(xiàn)象，PRRSV和HP－PRRSV的陽性率很相近。

綜上所述，在對送檢豬場免疫背景清晰的前提下，對檢測的數(shù)據(jù)進(jìn)行綜合分析，近年來我國的PCVD感染率有所上升。養(yǎng)豬戶需更新養(yǎng)殖理念，及時采用有效的檢測方法以便及時了解豬場發(fā)病情況，做到早發(fā)現(xiàn)早預(yù)防，從而達(dá)到更好的效益。

［1］ 崔尚金.2005年我國豬病流行現(xiàn)狀及特點［J］.豬業(yè)科學(xué)，2006，(1):34 －35.

［2］ 孫友德，王玉東，張學(xué)忍.當(dāng)前主要豬病的流行趨勢及流行原因分析［J］.山東畜牧獸醫(yī)，2010，(10):33－35.

［3］ 楊漢春.2010年豬病流行情況與2011年流行趨勢及防控對策［J］.豬業(yè)科學(xué)，2011，(1):47 －48.

［4］ 萬遂如.2009年我國主要豬病流行概況與防控對策［J］.養(yǎng)豬，2009，(6):49 －54.

［5］ 呂超超，焦連國，張金雙，等.2010年上半年11省市規(guī)模豬場疫病檢測與剖析［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2011，38(2):165 －167.