西藏林芝某雞場雞新城疫抗體水平檢測

徐業(yè)芬，商 鵬，王宏輝，田飛鵬，李 鵬，強(qiáng)巴央宗

（西藏農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，西藏 林芝860000）

雞新城疫（newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（newcastle disease virus，NDV）引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，雞群一旦傳入該病常呈毀滅性流行，在短期內(nèi)可使未免疫雞全部感染發(fā)病而死亡，該病一年四季均可發(fā)生，危害極大，其主要特征是呼吸困難，嚴(yán)重腹瀉，全身呈敗血癥變化，黏膜和漿膜出血，病程稍長的伴有神經(jīng)癥狀［1－2］。接種疫苗是有效預(yù)防本病的有力措施，由于受多種因素影響，疫苗免疫有時(shí)不能取得理想的保護(hù)水平。為監(jiān)測西藏林芝縣百巴鎮(zhèn)章巴養(yǎng)雞場新城疫抗體水平，2011年4月～8月對(duì)該養(yǎng)雞場的新城疫抗體進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)測，以有效評(píng)估雞群的免疫狀態(tài)，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 血樣采集 在西藏林芝縣百巴鎮(zhèn)章巴養(yǎng)雞場經(jīng)免疫接種的雞群中隨機(jī)抽樣，翅下靜脈采血，每只2mL，先后共采集血樣121份，置于冰盒中2h內(nèi)帶回實(shí)驗(yàn)室。

1.2 血樣處理 采集血樣待血清析出后，2 000r／min離心10min，取上層血清編號(hào)，保存于干凈的離心管中，置于4℃下保存，2d內(nèi)完成檢測。

1.3 儀器與試劑 96孔微量板、微量加樣槍、微型震蕩器、離心機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱；生理鹽水、3.8%枸櫞酸鈉抗凝劑、1%雞紅細(xì)胞懸液為本實(shí)驗(yàn)室自制。雞新城疫標(biāo)準(zhǔn)抗原、陽性血清，購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 配制1%紅細(xì)胞懸浮液 隨機(jī)選取1只成年雞，從頸靜脈采血20mL并與枸櫞酸鈉抗凝劑充分混勻后取10mL血液和90mL生理鹽水共同加入一個(gè)大離心管中進(jìn)行3 000r／min離心5min，棄上清液，以上操作重復(fù)3至4次。操作完畢之后，以微量加樣槍吸取5μL的紅細(xì)胞加入495μL生理鹽水中，充分混勻，即制成1%紅細(xì)胞懸浮液。

1.4.2 抗體效價(jià)的測定方法 血凝抑制試驗(yàn)（HI）：微量反應(yīng)板的每一孔內(nèi)加入生理鹽水25μL，取4倍稀釋的待檢血清25μL，從第1孔開始，依次作倍比稀釋至最后1孔，最后一孔棄除混合液25 μL。將雞新城疫標(biāo)準(zhǔn)抗原（4U）25μL加入以上每孔中；同時(shí)，設(shè)抗原、陽性血清和稀釋液3個(gè)對(duì)照，放微量振蕩器上搖勻，混勻后置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)30 min后，每孔加入1%雞紅細(xì)胞25μL。再放微量振蕩器上搖勻，置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約30min觀察。

1.4.3 結(jié)果判斷 免疫后的HI效價(jià)≥5log2為陽性，判定為免疫合格；HI效價(jià)＜5log2為陰性，判定為不合格。免疫合格率在70%以上則可判定為免疫合格場。

2 結(jié)果與討論

2.1 雞新城疫抗體水平檢測結(jié)果 在所檢測的121份血樣中，測得其效價(jià)范圍為3～8 1og2，詳細(xì)情況見表1。由表1可以看出該雞場新城疫抗體效價(jià)≥6log2和≥7log2的分別達(dá)到24.79%和50.41%，抗體效價(jià)≥5log2為98.35%，說明該雞場免疫合格。

表1 養(yǎng)雞場2011年4～8月新城疫抗體水平血凝抑制試驗(yàn)檢測結(jié)果

2.2 雞場新城疫防制建議

2.2.1 免疫預(yù)防 接種疫苗可以提高禽群的特異免疫力，減少NDV強(qiáng)毒的傳播，降低ND造成的損失。在林芝地區(qū)一般以6～10日齡首次接種為宜，可以用Ⅰ系苗滴鼻或點(diǎn)眼。在ND流行地區(qū)，可以提前1～3d接種，并將劑量加大0.5～1倍。當(dāng)用ND弱毒疫苗免疫后15d或用油佐劑滅活疫苗注射后21d左右，應(yīng)檢測免疫效果，確定下一次免疫時(shí)間。若有如下情況之一者應(yīng)及時(shí)加強(qiáng)免疫，當(dāng)10%～20% 的雞HI抗體水平低于1∶15；有呼吸啰音和排綠色糞便，采用抗生素治療無效，又有ND可疑病變雞。加強(qiáng)免疫的方法是：用2～3倍量的Ⅳ系疫苗或Ⅰ系疫苗飲水或肌肉注射，同時(shí)肌肉注射ND油佐劑滅活疫苗［3］。

2.2.2 加強(qiáng)日常管理 防制ND是一項(xiàng)十分艱巨和復(fù)雜的任務(wù)，要采取加強(qiáng)日常的科學(xué)管理，防止NDV強(qiáng)毒進(jìn)入。如防止一切帶毒動(dòng)物（特別是鳥類、鼠類和昆蟲）和污染物進(jìn)入禽群；進(jìn)出的人員和車輛及用具消毒處理；飼料和飲水來源安全；不從疫區(qū)引進(jìn)種蛋和苗雞，新購進(jìn)的雞隔離觀察2周以上證明健康者，方可合群；科學(xué)的飼養(yǎng)管理制度，如全進(jìn)全出等；禽場的選址、生產(chǎn)的規(guī)模等均有利于防止病原體進(jìn)入［4］。

若發(fā)現(xiàn)病雞要及時(shí)隔離，對(duì)病死雞進(jìn)行焚燒或深埋，全場立即消毒、清理糞便。此外，雞舍在進(jìn)雞前應(yīng)進(jìn)行徹底消毒，而且進(jìn)雞后也要定期消毒，并注意如氫氧化鈉等消毒藥選用要科學(xué)，濃度恰當(dāng)，藥量充足，作用時(shí)間充分，方能達(dá)到徹底消毒的目的。應(yīng)引起注意的是在用弱毒疫苗免疫前后10d內(nèi)禁止作飲水消毒［3］。

3 結(jié)語

本次試驗(yàn)的結(jié)果表明，該雞場為免疫合格雞場，免疫合格率高于70%，說明在專業(yè)技術(shù)人員指導(dǎo)下該雞場嚴(yán)格按照科學(xué)的免疫程序做好了雞群的免疫，可以有效防止新城疫病毒的入侵。

［1］蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2001.

［2］鄭明球.家畜傳染病學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)［M］.3版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2001.

［3］徐業(yè)芬，牛家強(qiáng)，曾群輝.雞非典型新城疫的防制［J］.中國獸醫(yī)雜志，2007，43（2）：67.

［4］徐宜為.最新禽病與防制［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社，1993.