崔麗麗,于詠蘭,劉 帥,王貝貝,張兆霞,汪 明
(中國農業大學動物醫學院 農業部動物流行病學與人畜共患病重點實驗室 農業部國家動物原蟲實驗室,北京 海淀100193)
龔地弓形蟲(Toxoplasmagondii)是一種呈世界范圍分布的能夠感染多種動物的寄生性原蟲。目前研究表明,孕婦感染弓形蟲后可導致早產、流產、胎兒發育畸形。此外,弓形蟲感染與艾滋?。ˋIDS)有密切的關系[1]。在我國,1978年崔君兆首次在國內進行流行病學研究,采用統一的IHA方法檢測全國81 963人血清平均感染率為5.17%[2]。2005年公布的全國人體重要寄生蟲病現狀調查報告顯示,國人弓形蟲病平均感染率為7.88%[3]。趙樹馨等1984~1986年期間檢測了1 297例早孕婦女血清抗弓形蟲抗體,其感染率為12.5%[4]。與人類關系密切的犬、貓弓形蟲感染率也非常普遍。據統計,1985~2006年期間,我國犬弓形蟲感染率在0.66%~62.3%之間不等,貓弓形蟲感染率在14.06%~78%之間[5]。此外,有調查顯示,對接觸動物、生肉制品等暴露機會較多從業者,其弓形蟲感染率亦較其他人員高得多[6]。隨著寵物品種和數量的急劇增加,人類與動物接觸的日益頻繁,通過動物將寵物源人畜共患病傳播給人類的風險日益加大,給人類健康和正常生活帶來了威脅[7]。因此,無論是就動物本身的健康而言,還是考慮到公眾健康,充分了解犬貓的弓形蟲發病及感染情況都具有重要現實意義。為此,筆者運用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)方法對北京地區2 541只家養犬貓及201只流浪貓的弓形蟲感染情況進行了調查,并對部分陽性病例進行了回訪調查。
1.1 主要試劑 動物弓形蟲IgG抗體酶聯免疫檢測試劑盒,珠海海泰生物制藥有限公司生產,生產批號:20100614;20100803;20110501。
1.2 主要儀器及器材 酶標儀iMark,購自BIORAD公司;Centrifuge5810R臺式高速冷凍離心機,購自德國Eppendorf公司。
1.3 樣本采集及處理 采集家養犬2 100只、家養貓588只、流浪貓201份血樣。每只動物采取1.5 mL~2mL靜脈血,3 000r/min離心5min,分離血清置-20℃保存備檢。
1.4 檢測方法 ELISA檢測方法按照珠海海泰生物制藥有限公司生產說明書進行操作。應用SPSS 11.5統計分析軟件進行統計分析。
2.1 家養犬、貓弓形蟲感染情況 2010年5月至2011年4月份期間,共采集到2 541份家養犬、貓血清樣本(家養犬1 876份,家養貓561份)。采用ELISA檢測方法對其進行了血清弓形蟲IgG抗體的檢測,共檢測出犬貓弓形蟲IgG抗體陽性樣本615份(24.2%),其中犬陽性樣本467份(24.9%),貓陽性樣本119份(21.2%)。用配對資料卡方檢驗分析顯示,家養犬、貓檢測結果差異不顯著(P>0.05)(表1)。

表1 北京市家養犬貓弓形蟲IgG抗體檢測結果
2.1.1 家養犬弓形蟲感染情況調查
2.1.1.1 不同季節家養犬弓形蟲血清抗體陽性率
在1 876份犬血清中,不同季節采集的犬血清弓形蟲抗體陽性率變化較大(表2),其中夏季弓形蟲陽性率最高為30.0%,與陽性率最低的春季20.4%差異顯著(P<0.05)。

表2 家養犬血清弓形蟲IgG抗體檢測結果季節分布
2.1.1.2 不同性別家養犬弓形蟲血清抗體陽性率
對已知性別的1 368只犬的檢測結果進行統計分析(表3),發現雌性犬血清弓形蟲抗體陽性率為25%,雄性犬血清弓形蟲抗體陽性率為24.0%。用配對資料卡方檢驗分析顯示,二者差異不顯著(P>0.05)。

表3 不同性別家養犬弓形蟲血清抗體陽性率
2.1.1.3 不同年齡段家養犬弓形蟲血清抗體陽性率 對已知年齡的1 474只犬的檢測結果進行統計分析(表4),我們的檢測結果發現,隨著犬年齡增長,弓形蟲血清抗體陽性率呈逐漸上升趨勢。9月齡以內犬弓形蟲血清抗體陽性率僅為15.1%,而大于6歲的犬弓形蟲血清抗體陽性率達到了27.2%。用配對資料卡方檢驗分析顯示,兩個年齡段之間,犬弓形蟲血清抗體陽性率差異顯著(P<0.05)。

表4 各個年齡階段家養犬弓形蟲血清抗體陽檢測結果
2.1.2 家養貓弓形蟲感染情況調查
2.1.2.1 不同季節家養貓弓形蟲血清抗體陽性率
對561只貓的血清弓形蟲抗體檢測結果,根據季節進行統計分析顯示(表5),隨著季節變化,貓弓形蟲抗體陽性率也有不同,其中春季陽性率最高為25.8%,秋季陽性率最低為15.3%,用配對資料卡方檢驗分析,結果表明,不同季節家養貓血清弓形蟲抗體陽性率差異顯著(P<0.05)。

表5 家養貓血清弓形蟲IgG抗體檢測結果季節分布
2.1.2.2 不同性別家養貓弓形蟲血清抗體陽性率
對312份已知性別的家養貓血清抗體檢測結果按性別分類統計(表6),結果顯示,雄性家養貓弓形蟲陽性率較雌性家養貓弓形蟲陽性率高,但是用配對資料卡方檢驗分析顯示,二者沒有顯著差異(P>0.05)。

表6 不同性別家養貓弓形蟲血清抗體陽性率
2.1.2.3 不同年齡段家養貓弓形蟲血清抗體陽性率 對398份已知年齡的家養貓血清抗體檢測結果,按年齡分類統計(表7)顯示,隨著年齡增長家養貓弓形蟲血清抗體陽性率有明顯升高。其中大于6歲的家養貓弓形蟲血清抗體陽性率顯著高于3月齡~9月齡(P<0.05)和3歲~6歲之間的家養貓(P<0.05)。

表7 各個年齡階段家養貓弓形蟲血清抗體陽檢測結果
2.2 流浪貓弓形蟲感染情況 收集流浪貓血清201份,經檢測陽性樣本61份,弓形蟲抗體陽性率為30.3%,明顯高于家養貓的弓形蟲抗體陽性率21.2%。用配對資料卡方檢驗分析顯示,二者檢測結果差異顯著(P<0.05)。
2.3 家養犬貓弓形蟲抗體陽性病例回訪調查 對25例弓形蟲抗體陽性家養犬病例和37例弓形蟲抗體陽性家養貓病例進行了回訪調查,結果發現,該62個動物主人弓形蟲檢測結果均為陰性。同時筆者發現,家養犬都有天天外出遛的習慣,而家養貓大都很少外出。大多數動物主人對動物的飲食也都比較注意,考慮到動物的身體健康,堅持選擇喂給狗糧、貓糧,也有少數的主人會喂給動物生魚生肉。其中此次調查回訪的37例弓形蟲抗體陽性家養貓中有4只是主人收養的流浪貓。
從1908年Nicolle及其同事發現弓形蟲至今已有百年的歷史,許多國家都有關于弓形蟲的血清流行病學的調查報道。不同國家和地區的弓形蟲陽性率有很大差異,我國人口標準化感染率為6.02%,國際人口標準化感染率為5.52%[2]?,F已報道的各國人口弓形蟲陽性率最低的為韓國4%,最高的為巴西92%[8]。Dubey等人發現不同年齡、性別和品種的貓對弓形蟲都易感[8]。世界各地也有犬的相關報道,1998年Lin發現犬的弓形蟲陽性率隨著年齡增長而升高[9]。目前研究表明,人類可以通過感染弓形蟲的貓,食生肉或未完全煮熟的肉,或者通過胎盤由母體垂直傳播而感染弓形蟲,還可以通過接觸被弓形蟲陽性貓糞便污染的寵物狗而感染[8]。因此,與人類關系密切的犬貓,在弓形蟲的傳播過程中起著非常重要的作用,充分了解犬貓的弓形蟲發病及感染情況都具有重要的現實意義。
本次試驗發現,弓形蟲感染對于家養犬、家養貓、流浪貓都比較普遍。但不同動物弓形蟲血清抗體陽性率不同,流浪貓陽性率最高為30.3%,其次是家養犬24.9%,家養貓21.2%。通過對62例弓形蟲陽性病例的調查回訪發現,弓形蟲的感染可能與犬、貓的飲食有關,流浪貓接觸感染源的機會較多,而作為寵物的家養犬貓,有些是長期生活在室內,飼喂商品犬、貓糧,不接觸生肉,所以比例較低。另外,家養犬一般都有外出遛的習慣,而家養貓很少外出,這就大大增加了家養犬感染弓形蟲的機會。
本試驗結果顯示,北京家養犬、貓血清弓形蟲陽性率略高于上海市家養犬、貓的陽性率[10],相對于2006年于詠蘭[11]的檢測結果也較高。不同季節弓形蟲陽性率也有差別,家養犬夏季陽性率最高30.0%,家養貓春季陽性率最高25.8%。不同性別家養犬貓弓形蟲血清陽性率沒有顯著差異,這與于詠蘭[11]報道的結果一致。
Dubey[12]和 Omata[13]等認為犬貓不僅可以通過后天感染弓形蟲而產生相應抗體,幼齡的犬、貓也可以從母體獲得較低滴度的母源抗體。事實上,我們的檢測結果也發現,9月齡以下家養犬、貓也存在一定的弓形蟲感染。同時,我們也發現隨著年齡增長,家養犬、貓弓形蟲陽性率均有明顯增高。6歲以上家養犬、貓弓形蟲陽性率分別達到了27.2%和26.9%。這些結果提示隨著年齡的增長,犬貓感染弓形蟲的機會增多。
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