蘭州百合鱗片培養快速繁殖技術研究簡報

李 潔 (長江大學園藝園林學院，湖北 荊州 434025)

譚風云 (湖北城隆市政園林設計有限公司，湖北 荊州 434000)

潘佑找，劉曉玲，彭 斌，胡夢婷 (長江大學園藝園林學院，湖北 荊州 434025)

蘭州百合鱗片培養快速繁殖技術研究簡報

李 潔 (長江大學園藝園林學院，湖北 荊州 434025)

譚風云 (湖北城隆市政園林設計有限公司，湖北 荊州 434000)

潘佑找，劉曉玲，彭 斌，胡夢婷 (長江大學園藝園林學院，湖北 荊州 434025)

以蘭州百合(Liliumdavidiivar.unicolor)鱗片為外植體進行快速繁殖技術研究。結果表明，蘭州百合鱗片不同部位均可誘導出芽，其強弱依次為外層、中層、內層；芽誘導最佳培養基是MS + 6-BA 0.2mg/L+ NAA 0.5mg/L，NAA較2,4-D更有利于芽的增殖；NAA誘導生根的效果要好于IAA，生根誘導最佳培養基為1/2MS + NAA 0.5mg/L，而且生根培養對后期的移栽也有影響。

蘭州百合(Liliumdavidiivar.unicolor)；鱗片；外植體；組織培養；快速繁殖

蘭州百合(Liliumdavidiivar.unicolor)是百合科百合屬川百合的變種，是多年生草本植物，有著悠久的栽培歷史。蘭州百合營養豐富，品質極佳，以“名菜良藥”著稱，是百合中的佼佼者。百合的常規繁殖方法主要采用常規分球、分珠芽鱗片扦插、鱗片包埋等，但存在繁殖系數低、易感染病毒、栽培面積難以擴大以及多代繁殖后退化等缺陷。由于組織培養具有繁殖速度快、占用空間小、便于種質保存與交換等優勢，在百合繁殖中占有主導地位。百合屬植物鱗片作為外植體具有容易獲得、分化能力強、對培養基要求不嚴等優點，是目前百合組織培養中普遍采用的外植體[1]。另外，百合葉片[2]、莖段[3]、根[4]、珠芽[5]作為外植體的也有相關研究。本研究以蘭州百合鱗片為材料，擬建立較完整的快速繁殖體系，達到降低生產成本目的。

1 材料與方法

1.1 材料

蘭州百合于2011年9月采自恩施藥用植物研究所，保存于花盆中。

1.2 方法

(1)材料處理 將蘭州百合鱗片刷凈泥土，流水沖洗10min，75%乙醇消毒35s，10%次氯酸鈉溶液消毒10min，無菌水沖洗6次。將蘭州百合鱗片分為外層、中層、內層，切成0.5cm×0.5cm的小方塊用于接種。

(2)誘導培養 以MS培養基為基本培養基，培養基中6-BA為1.0mg/L，NAA設置0.2、0.5mg/L 2個濃度。培養溫度為25℃，光照強度為1000～1500lx，每天光照12h。

(3)繼代培養 接種后一個月，進行繼代培養，繼代培養基為MS + 6-BA 0.2mg/L + NAA(0.05、0.20、0.50mg/L)或2,4-D(0.05、0.2、0.5mg/L)。

(4)生根培養與移栽 將經過繼代培養的無根苗接種到生根培養基，生根培養基為1/2MS + IAA(0.2、0.5 mg/L)或NAA(0.2、0.5 mg/L)。試管苗的根長到1～2cm時進行移栽，移栽前進行煉苗。

2 結果與分析

2.1 NAA及鱗片部位對蘭州百合芽誘導的影響

接種第11d后蘭州鱗片百合開始膨大，20d左右切口處出現黃綠色愈傷組織，少數有氣生根出現，30d時形成綠色小芽。在6-BA相同的情況下，NAA 0.5mg/L比0.2mg/L更有利于芽的誘導，且鱗片不同部位分化強弱順序為外>中>內(表1)。

表1 NAA及鱗片部位對蘭州百合芽誘導的影響

2.2 NAA和2,4-D對繼代培養的影響

從表2可看出，在6-BA相同的情況下，芽增殖率隨NAA和2,4-D濃度的升高而升高，但NAA較2,4-D更有利于芽的增殖，且增殖芽的質量也好。

表2 NAA和2,4-D對蘭州百合繼代培養的影響

2.3 IAA和NAA對生根培養的影響

由表3可見，所有處理的生根率都是100%，IAA處理的平均生根數較NAA處理的多，綜合根數和根的粗細來看，NAA 0.5mg/L對生根更有利。

表3 IAA和NAA生根培養的影響

3 討 論

百合的鱗片外植體的切取部位除了外、中、內層，其上、中、下部位對組織培養結果也有影響[4,6-7]。這在本研究的蘭州百合中也得到了證實。試管苗葉面無角質、蠟質、表皮毛很少或者無，氣孔開關能力弱，極易失水，煉苗是非常必要的措施。通過光照和濕度的變化促進莖葉保護組織的發生和氣孔功能的恢復[8-9]，以促使其適應環境。移栽成活率隨著煉苗的天數而有所提高，但并非煉苗時間越久越好，本研究州鱗片百合百合煉苗3d，加上移栽后給予合適的條件，移栽成活率達100%。

[1]蔣細旺，司懷軍．百合的組織培養技術綜述[J]．湖北農業科學，2004，(1)：78-82．

[2]潘佑找，柯尊濤，趙宇瑛．不同外植體對蘭州百合組織培養的影響[J]．安徽農學通報，2007，13(19)：242-245．

[3]孟 楊，潘佑找，賈珊珊，等．湖北百合組織培養技術研究[J]．安徽農業科學，2006，34(17)：4247-4248．

[4]楊成德，種 康，敬蘭花．百合鱗片不同部位的小鱗莖分化與激素調節研究[J]．蘭州大學學報(自然科學版)，1998，24(3)：95-99．

[5]趙祥云，程 廉，刑尤美，等．百合珠芽組培及脫毒研究[J]．園藝學報，1993，20(3)：284-288．

[6]潘佑找，林 強，陳香麗，等．鱗片不同放置方式對卷丹快速繁殖的影響[J]．湖北農業科學，2009，48(10)：2499-2501．

[7]Pan Y Z.Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of WildLiliumlancifolium[J].Medicinal Plant,2011,5:51-55.

[8]Jeong J H.Invitropropagation of bulb scale section of several Korean native lilies [J].Acta Hortic,1996,41:269-276.

[9]Pan Y Z,Zhao Y Y,Liu X L,et al.Different Explants ofLiliumlancifoliumhave Different Potential to Differentiate and Regenerate in Tissue Culture [J].Agricultural Science & Technology,2011,12:1437-1440.

10.3969/j.issn.1673-1409(S).2012.08.010

Q813.1+2；Q949.71+8.23

A

1673-1409(2012)08-S030-02

2012-07-10

李 潔(1991-)，女，北京人，現從事園藝植物繁殖研究。

潘佑找，E-mail:panyouzhao@163.com。