某保健酒對老齡小鼠抗氧化作用的實驗研究

向芳 張國豪 張信江

“壽星寶”保健酒是由淫羊霍、丹參、黃精等中藥和貴州茅臺酒經現代工藝研制而成的一種藥酒。具有益氣活血、補腎防衰的功效。藥酒是中藥的一種劑型，包含有“酒的作用和藥物功效”的雙重作用。近年來中醫中藥在抗氧化方面做了大量研究，取得了較好的成果，其在抗衰老方面的作用也得到了全世界的公認。本實驗從衰老生化指標的角度來探討“壽星寶”保健酒對老齡小鼠的抗氧化作用，為進一步開發利用提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 一般材料 SPF級12月齡的昆明種小鼠，，雌雄兼用，體重45～55 g，由第三軍醫大學實驗動物中心提供。

1.2 受試藥物 藥酒系以淫羊霍、丹參、黃精、葛根、紅花5種優質中藥材為主要原料，以貴州茅臺酒廠生產的酒度為53%醬香型的茅臺酒作為基酒，經浸泡、過濾、提取制成。經毒理學安全性評價后，作為本實驗的受試藥物。

1.3 主要試劑與儀器 超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)試劑盒、丙二醛(MDA)試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。SHHW21.420A電熱恒溫水箱、Multiskan Spectrum全波長酶標儀、FC104電子分析天平、Soniprep150超聲波分解器、Thermo Heraeus Multifuge X1R冷凍離心機，實驗儀器均由學院中心實驗室提供。

1.4 實驗方法

1.4.1 實驗步驟 80只昆明種老齡小鼠隨機分成4組:即老齡對照組，保健酒低劑量組，保健酒中劑量組及保健酒高劑量組，每組20只。保健酒樣品按人體(60kg)推薦劑量為每人每天 60 ml，設計為 5、10、20 ml/(kg·d)三個劑量組，其中 10 ml/(kg·d)相當于人體推薦用量。老齡對照組給予等量生理鹽水。各組均采用灌胃法，2次/d，連續3個月。給藥期間各組每周重新稱重1次，按體重的變化重新計算藥酒的劑量。實驗結束后眼眶取血并分離血清，按試劑盒測定方法測血清中SOD、GSH-Px活力和MDA含量。

1.4.2 統計學方法 采用SPSS 17.0統計軟件處理，實驗數據以表示，各組間比較用單因素方差分析進行檢驗。

2 結果

保健酒對老齡小鼠血清SOD活力、GSH-Px活力、MDA含量的影響見表1。表1顯示:與老齡對照組相比，保健酒低、中、高劑量組SOD、GSH-Px活力均明顯升高及MDA含量明顯降低，差異具有顯著統計學意義(P＜0.01)，其中中、高劑量組SOD、GSH-Px活力均明顯高于低劑量組，MDA含量明顯低于低劑量組，差異有顯著統計學意義(P＜0.01)，而高劑量組SOD、GSH-Px活力亦高于中劑量組，MDA含量低于中劑量組，但差異無統計學意義(P＞0.05)。結果提示:“壽星寶”保健酒低、中、高劑量組均能明顯提高小鼠血清SOD活力、GSHPx活力及降低MDA含量。其中高劑量組和中劑量組功效明顯強于低劑量組，而高劑量組和中劑量組功效相當。

3 討論

自由基學說是具有代表性的衰老學說之一。該理論認為:機體內時刻產生著自由基，但同時又存在有效的自由基清除系統，正常情況下機體內自由基的產生和清除是處在一種動態平衡狀態的。隨著年齡的增長，機體內抗氧化防御系統機能減退，造成自由基堆積而產生氧化應激損傷，最終導致機體的衰老［1］。SOD作為機體清除自由基的主要酶類，是抗衰老研究中公認的參考指標之一。由于各種原因引起SOD活性降低，會使自由基過度的攻擊正常細胞，破壞各種生物膜，使細胞發生衰老、功能喪失。GSH-Px是機體內廣泛存在的一種重要的催化過氧化氫分解的酶。它特異性催化還原型谷胱甘肽(GSH)對過氧化氫的還原反應，能清除有害的過氧化物代謝產物，起到保護細胞結構和功能完整的作用。MDA是體內多價不飽和脂肪酸組分受活性氧作用后過氧化反應的產物，由其含量可推斷體內自由基生成的多少及自由基對機體的損傷程度。

表1 “壽星寶”保健酒對老齡小鼠血清SOD活力、GSH-Px活力、MDA含量的影響(，n=20)

表1 “壽星寶”保健酒對老齡小鼠血清SOD活力、GSH-Px活力、MDA含量的影響(，n=20)

注:與老齡對照組比較，★P＜0.01;與保健酒低劑量組比較，▲P＜0.01

組別 劑量［ml/(kg·d)］SOD活力(U/ml) GSH-Px活力(U/ml) MDA含量(nmol/ml)125.56±10.77 1126.42±75.47 69.60±10.39保健酒低劑量組 5 139.74±15.02★ 1261.80±121.95★ 57.86±11.69★保健酒中劑量組 10 160.71±14.30★▲ 1478.16±142.25★▲ 38.03±8.93★▲保健酒高劑量組 20 167.16±12.77★▲ 1546.09±129.22★▲ 32.63±6.74老齡對照組-★▲

“壽星寶”保健酒主要是選取淫羊霍、丹參、黃精、葛根、紅花幾種中藥材，加入貴州茅臺酒制成。現代藥理學研究表明:淫羊霍中所含的黃酮及苷類具有清除自由基的能力，其抗氧化活性較強［2］。丹參中的丹參酮可減少自由基的產生，提高抗氧化酶活性［3］。黃精中的黃精多糖可顯著提高抗氧化酶活性，增強機體的抗氧化能力［4］。葛根所含的葛根黃酮可提高抗氧化酶活性，增強其對自由基的清除能力，抑制脂質過氧化，降低體內MDA的生成，從而起到保護機體組織的作用［5］。紅花中有效成分紅花黃色素有抗氧化活性，具有較強的清除羥自由基和超氧陰離子自由基的能力，尤其對羥自由基的清除效果很好，清除率達98.31%［6］。貴州茅臺酒具有獨特的釀造工藝，除含有豐富的氨基酸和維生素外，還含有SOD及各種人體必需的微量元素，具有清除自由基、抗氧化、保護細胞的作用［7］。將上述各種具有協同作用的中藥與酒溶于一體制成藥酒，不僅配制方便、藥性穩定、安全有效，而且酒精是一種良好的半極性有機溶劑，中藥的各種有效成分都易溶于其中，藥借酒力、酒助藥勢而充分發揮其效力，提高療效。

本實驗采用自然衰老動物模型，能夠很好的反應衰老的病理生理狀態。從本實驗結果來看，“壽星寶”保健酒能顯著提高老齡小鼠血清中的SOD、GSH-PX活力，同時亦明顯降低MDA的含量，提示“壽星寶”保健酒具有提高抗氧化酶的活性，增強機體抗氧化和清除自由基的能力，從而起到預防和延緩衰老的作用。

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［6］馮濤，閻婷婷，閻國榮，等.紅花提取物清除自由基能力的初步研究.天津農學院學報，2010，17(1):6-9.

［7］吳君，程明亮，張國豪，等.茅臺酒與肝病關系的流行病學調查及病理組織學研究.世界華人消化雜志，2001，9(12):1374-1378.