黃宇聲 劉冠萍 李茂 覃良
粗壯女貞(Ligustrum robustum(Roxb.)Blum.)在四川、云南、貴州均有大面積種植,具有悠久的歷史,用于頭痛、齒痛、目赤、熱病煩渴等,并具有抗菌、提高免疫功能、降血壓、降血脂等作用,成人服用量是一次2~4 g,3次/d。本實(shí)驗(yàn)主要研究粗壯女貞對(duì)小鼠常壓耐缺氧能力的影響,為粗壯女貞資源的進(jìn)一步開發(fā)利用提供依據(jù)。
1.1 動(dòng)物 健康KM小鼠,體重18~22 g,雌雄兼用,廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(許可證號(hào):SCXK桂2009-0002)。
1.2 藥品與試劑 粗壯女貞,采購自四川筠連縣青山綠水茶葉專業(yè)合作社,其水提物由研究者自行提取,性狀為棕黃色液體(每毫升相當(dāng)于藥材2.0 g),臨用時(shí)以蒸餾水配成所需濃度。其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。
2.1 常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)[1-3]將40只小鼠隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組、粗壯女貞低劑量組(1.0 g/kg)、粗壯女貞中劑量組(2.0 g/kg)、粗壯女貞高劑量組(4.0 g/kg),每組10只。除正常對(duì)照組外,各組每天給予粗壯女貞1次,給藥體積20 ml/kg,正常對(duì)照組給予等體積的蒸餾水,連續(xù)30 d。每周稱體重一次,根據(jù)體重調(diào)整給藥量。末次給藥1 h后,將各組小鼠分別放入盛有15 g鈉石灰的250 ml密閉廣口瓶?jī)?nèi),每瓶1只,以凡士林封瓶口,蓋嚴(yán),立即計(jì)時(shí),以呼吸停止為指標(biāo),觀察小鼠因缺氧而死亡的時(shí)間。
2.2 小鼠整體耗氧量的測(cè)定[4]將40只小鼠隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組、粗壯女貞低劑量組(1.0 g/kg)、粗壯女貞中劑量組(2.0 g/kg)、粗壯女貞高劑量組(4.0 g/kg),每組10只。除正常對(duì)照組外,各組每天給予粗壯女貞1次,給藥體積20 ml/kg,正常對(duì)照組給予等體積的蒸餾水,連續(xù)30 d。每周稱體重一次,根據(jù)體重調(diào)整給藥量。末次給藥1 h后,測(cè)定小鼠5 min內(nèi)的累積耗氧量。將小鼠放入密閉容器內(nèi),蓋好瓶蓋,通入空氣,此時(shí)水減壓計(jì)的壓力即為常壓狀態(tài)下的壓強(qiáng)。立即停止通氣,開始記錄時(shí)間,當(dāng)小鼠呼出的CO2被鈉石灰吸收時(shí),裝置內(nèi)的氣體容積減少,水減壓計(jì)壓力降低,及時(shí)從滴定管加水至裝置中,使水減壓計(jì)恢復(fù)至常壓狀態(tài)下壓強(qiáng)。由滴定管放入裝置中的水容積,即代表5 min內(nèi)該小鼠吸取O2的容積。
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,各項(xiàng)數(shù)據(jù)均以(±s)表示。
3.1 粗壯女貞對(duì)小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間的影響 與正常對(duì)照組比較,粗壯女貞中、高劑量能明顯提高小鼠的常壓耐缺氧時(shí)間(P<0.05或P<0.01),低劑量組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05),見表1。
表1 粗壯女貞對(duì)小鼠常壓耐缺氧時(shí)間的影響(±s)

表1 粗壯女貞對(duì)小鼠常壓耐缺氧時(shí)間的影響(±s)
注:與正常對(duì)照組比較,*P<0.05,**P <0.01
組別 劑量(g/kg)存活時(shí)間(min)22.33±3.49粗壯女貞低劑量組 1.0 23.81±3.13粗壯女貞中劑量組 2.0 25.72±2.51*粗壯女貞高劑量組 4.0 27.06±2.76正常對(duì)照-**
3.2 粗壯女貞對(duì)小鼠整體耗氧量的影響 與正常對(duì)照組比較,粗壯女貞高劑量能明顯降低小鼠的耗氧量(P<0.05),中、低劑量組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表2。
表2 粗壯女貞對(duì)小鼠整體耗氧量的影響(,n=10)

表2 粗壯女貞對(duì)小鼠整體耗氧量的影響(,n=10)
組別 劑量(g/kg)5 min累積耗氧量(ml/只)5.11±0.58粗壯女貞低劑量組 1.0 5.03±0.40粗壯女貞中劑量組 2.0 4.82±0.75粗壯女貞高劑量組 4.0 4.56±0.42正常對(duì)照-*
小鼠在密閉容器中受缺氧因素?fù)p害,主要反映在心和腦缺氧,為非特異性缺氧[5]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,高、中劑量粗壯女貞能顯著延長(zhǎng)小鼠的常壓耐缺氧時(shí)間,高劑量粗壯女貞能明顯降低小鼠的整體耗氧量,表明粗壯女貞對(duì)缺氧具有改善作用,其可能具有降低機(jī)體的耗氧量提高組織利用氧的能力,減少因缺氧造成的氧供應(yīng)能力不足導(dǎo)致的動(dòng)物死亡。
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