經顱多普勒監測硒化透明質酸對腦血管痙攣的作用

房向陽，王占峰，趙興利

（吉林大學中日聯誼醫院 神 經外二科，吉林 長 春130033）

腦血管痙攣（CVS）是影響腦動脈瘤患者手術預后的最主要因素，其病理過程中中脂質過氧化是腦血管痙攣發生、發展的主要機制，谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）在抗脂質過氧化反應中至關重要。我們以前在體外試驗中，已證實谷胱甘肽過氧化物酶的人工模擬物－硒化透明質酸（Se HA）可以抑制脂質過氧化反應［1］，但是作用時間短，活體無法持續給藥。本研究中，我們進一步采用Se HA緩釋劑［2］以增加其留置在腦血管痙攣模型大鼠枕大池的作用時間，并應用經顱多普勒超聲監測基底動脈血流速度的方法［3］，觀察Se HA在動物活體中對大鼠腦血管痙攣的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗材料 Wistar大鼠：雌性，200－250 g，購自吉林大學基礎醫學院動物室；多普勒超聲儀vivid7，GE公司，硒化透明質酸（Se HA），吉大生命科學院提供；委托應化所以PLGA作為載體對Se－HA進行包裹成微球緩釋劑，調整至2周內穩定釋放濃度：5.9 mg／m L。

1.2 動物實驗 40只Wistar大鼠被隨機分為單純注血組、空白對照組、注血給藥組、延遲給藥組（各10只）。1%戊巴比妥鈉0.6 m L腹腔注射麻醉，從大鼠股動脈取自體血，大鼠俯臥頭低位，剪毛消毒切開頸后皮膚，分離顯露寰枕筋膜，注射大鼠自體動脈血0.2 m L入枕大池，作用于基底動脈，建立蛛網膜下腔出血模型，注血給藥組注血同時給Se HA緩釋劑0.1 m L，延遲給藥組在注血1天后再次麻醉注入Se HA。縫合切口，分籠飼養。各組2天、7天超聲檢查。

1.3 超聲檢查 注血操作前，注血（藥）后2、7天，分別經顱多普勒超聲（TCD）檢測基底動脈的最大血流速度VmBA來判定腦血管痙攣的程度。采用大鼠俯臥頭低位，在寰枕筋膜處進行超聲檢查。

1.4 統計分析 采用析因設計的方差分析。

2 結果

經顱多普勒超聲檢測結果：未注血的空白對照組、單純注血組、注血加藥組和延遲給藥組大鼠的基底動脈最大血流速度（VmBA），在注血后第0、2、7天的檢測值，見表1。

表1 經顱多普勒超聲檢測Wistar大鼠基底動脈的最大血流速度（VmBA，單位cm／s）

統計分析顯示：單純注血組與未處理的空白對照組比較，注血后第2和7天，基底動脈最大血流速度顯著增高，差異有顯著性意義（P＜0.05）。結果表明：注血后，Wistar大鼠基底動脈處出現腦血管痙攣征象。

注血加給藥組與單純注血組比較，注血后第2和7天，基底動脈最大血流速度顯著降低，差異有顯著性意義（P＜0.05）。結果表明：注血加給藥組在注血后第2－7天大鼠腦血管痙攣程度均顯著減低。

延遲給藥組與單純注血組比較，注血后第2天基底動脈最大血流速度無顯著差異（P＞0.05）；注血后第7天基底動脈最大血流速度有顯著差異（P＜0.05）。結果表明：延遲給藥組在注血后第7天大鼠腦血管痙攣程度顯著減低。

3 討論

腦血管痙攣是蛛網膜下腔出血（SAH）后必然發生并且致死致殘率高的并發癥。防治腦動脈瘤術后腦血管痙攣是術后治療關鍵。腦蛛網膜下腔出血后，氧合血紅蛋白直接作用于肌纖維或間接使動脈壁局部釋放血管活性物質，產生自由基或脂質過氧化物（Lipid eroxide，LPO）使平滑肌長期收縮，產生脂質過氧化反應，并以其特有的鏈鎖反應方式循環反應，導致LPO不斷積累，LPO不僅能引起或加重腦動脈痙攣，也能造成腦動脈血管內皮細胞和平滑肌細胞功能與結構的損傷。谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）在抗脂質過氧化反應中至關重要［4］。天然GPX有易被酶水解、不穩定等缺點，限制了它的應用。吉林大學劉蘭英已經合成了一種新發明的GPX模擬物 —硒化透明質酸（Se HA），它具有良好的水溶性、易制備、高活性、穩定不易水解。我們合作的體外實驗已經證明其抗氧化作用［1］。本實驗中，我們應用超聲檢測進一步在動物活體上研究Se HA對抗SAH后腦血管痙攣的作用。

經顱多普勒超聲（TCD）對于腦血管痙攣的診斷作用已經得到認可［3］。本試驗應用TCD檢測腦血管痙攣動物模型發現：單純注血組在建立模型的第二天即出現明顯血管痙攣表現，且至第7天無明顯緩解；出血同時給藥組在建立模型的第2天和第7天的超聲檢查均未顯示血管痙攣；延遲給藥組對于已經發生的血管痙攣初期治療效果不佳，第7天的檢查有明確好轉。這些超聲監測的結果表明：GPX的人工模擬物的活體內生物活性與體外試驗相一致。對于這些結果，我們考慮其原因可能是脂質過氧化反應是血管痙攣的啟動機制［5］，而持續痙攣的因素是多方面的［6］，故血管痙攣發生后給藥不能完全消除已經發生的血管痙攣，但是逐漸減輕并且抑制了痙攣的繼續發生。

總之，本試驗證實：Se HA能夠在動物體內有效預防蛛網膜下腔出血的所致的腦血管痙攣。由于臨床上大多數病例是已經發生出血甚至血管痙攣［7］，本試驗延遲給藥組的超聲監測結果說明延遲給入Se HA緩釋劑具有實際的臨床治療意義。

［1］陳 佳，張博珣，安 洋，等.以透明質酸為骨架的新型谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）模擬酶的制備及性質研究［J］.高等學校化學學報，2006，27（11）：2110.

［2］馬曉東，章文斌，周定標，等.BCNU—PLGA緩釋可降解微球的制備與特征［J］.中華神經醫學雜志，2006，7（5）：692.

［3］馮殿福，溫艷茹.經顱多普勒對蛛網膜下腔出血腦血管痙攣狀況的評價作用［J］.中國臨床康復，2003，7（19）：2753.

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［6］Rabinstein AA，Wijdicks EF.Cerebral Vasospasm in Subarachnoid Hemorrhage Curr Treat Options Neurol［J］.2005，7（2）：99.

［7］Fujiwara K，Mikawa S，Ebina T.Continuous intrathecal administration of nicardipine using a portable infusion pump system for management of vasospasm after subarachnoid hemorrhage［J］.No Shinkei Geka，2001，29（1）：23.