GC測(cè)定香桂活血膏中薄荷腦含量

胡端龍，姜麗珍，趙華良，奚靜芳，張國(guó)明

(上海市中藥研究所，上海 201401)

GC測(cè)定香桂活血膏中薄荷腦含量

胡端龍，姜麗珍，趙華良，奚靜芳，張國(guó)明*

(上海市中藥研究所，上海 201401)

目的建立外用中成藥香桂活血膏的含量測(cè)定方法。方法應(yīng)用氣相色譜法，測(cè)定香桂活血膏中薄荷腦的含量。結(jié)果以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果顯示薄荷腦在0.107 8～2.155 0 μg內(nèi)，峰面積與薄荷腦進(jìn)樣量呈良好線性關(guān)系。3批香桂活血膏薄荷腦含量分別為26.0，24.7，25.9 mg/片。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確快速、重現(xiàn)性好，可有效控制香桂活血膏的質(zhì)量。

香桂活血膏；薄荷腦；含量測(cè)定；氣相色譜法

香桂活血膏是由大黃、木香、檀香、丁香、桂皮油、薄荷腦等23味藥材提取制成的橡膠膏劑，具有祛風(fēng)散寒，活血止痛的功效，用于跌打損傷，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)痛等[1]。現(xiàn)行香桂活血膏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑》第四冊(cè)，但無(wú)含量測(cè)定項(xiàng)。本文根據(jù)香桂活血膏的制備工藝，也參考了部分文獻(xiàn)資料[2]，建立了氣相色譜法測(cè)定薄荷腦含量的方法，經(jīng)初步的實(shí)驗(yàn)考核，本品中薄荷腦含量測(cè)定方法穩(wěn)定、可行，適用于香桂活血膏質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

Agilent 6890N氣相色譜儀，F(xiàn)ID檢測(cè)器。薄荷腦對(duì)照品(批號(hào)：0728-200005,中國(guó)食品藥品檢定研究院，供含量測(cè)定)；樣品：香桂活血膏(上海雷允上藥業(yè)有限公司，批號(hào)：100201，100202，100203)；乙醇為分析純，水為高純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Agilent HP-5(30 m×0.32 mm，0.25 μm)；柱溫為100 ℃；進(jìn)樣體積1 μL。理論板數(shù)以薄荷腦峰計(jì)算應(yīng)不低于10 000。

2.2 相關(guān)試樣的配制

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取薄荷腦對(duì)照品適量，加乙醇溶解，制成每1 mL含薄荷腦0.5 mg的溶液作為對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品1片(每片規(guī)格為7 cm×10 cm)，剪成小條，除去蓋襯，置錐形瓶中，精密加入乙醇50 mL，精密稱(chēng)定，超聲45 min，放冷，精密稱(chēng)定，用乙醇補(bǔ)足失重，0.45 μm濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3 陰性對(duì)照品溶液的制備 按工藝處方，制備不含薄荷腦的陰性樣品，然后按2.2.2項(xiàng)下方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.3 專(zhuān)屬性試驗(yàn)

照2.1色譜條件，取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液各1 μL，分別注入氣相色譜儀。結(jié)果顯示，在薄荷腦對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，供試品溶液具有相同保留時(shí)間的色譜峰，且與其他成分的色譜峰分離良好。而陰性液在薄荷腦保留時(shí)間處無(wú)色譜峰，不存在干擾，見(jiàn)圖1～3。

圖1 薄荷腦對(duì)照品溶液GC圖

圖2 香桂活血膏供試品溶液GC圖

圖3 缺薄荷的陰性樣品溶液GC圖

2.4 線性關(guān)系的考察

取薄荷腦制成每1 mL含薄荷腦0.107 8,0.215 5,0.538 8,1.075 5,2.155 0 mg的溶液作為對(duì)照品溶液，分別精密吸取上述溶液1 μL，注入氣相色譜儀，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣質(zhì)量為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性方程為Y=1 320.6X-6.533 4，r=0.999 8，結(jié)果表明薄荷腦在0.107 8～2.155 0μg峰面積與薄荷腦含量線性關(guān)系良好。

2.5 精密度試驗(yàn)

精密吸取濃度為0.538 8 mg·mL-1的薄荷腦對(duì)照品溶液1 μL，按2.1色譜條件，重復(fù)測(cè)定6次，記錄峰面積，其RSD=0.57%(n=6)，結(jié)果表明本試驗(yàn)精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取批號(hào)為100201的樣品，按2.2.2制備供試品溶液，以2.1色譜條件，于0,2,4,6,8 h進(jìn)樣分析，記錄峰面積。結(jié)果RSD=0.62%(n=5)，表明供試品溶液中含有的薄荷腦在8 h內(nèi)含量穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

取批號(hào)為100201的樣品，一式6份，制備方法參考2.2.2，按上述色譜條件測(cè)定含量，含量的RSD=0.68%(n=6)，表明該方法具有較好的重復(fù)性。

2.8 回收率試驗(yàn)

取批號(hào)為100201的樣品適量，一試9份，取半片，精密稱(chēng)定，加入一定量的薄荷腦對(duì)照品，按2.2.2方法制備，按2.1色譜條件注入氣相色譜儀測(cè)定,結(jié)果表明該方法提取較完全，準(zhǔn)確度高，見(jiàn)表1。

2.9樣品含量測(cè)定

取100201、100202、100203 3批樣品，按2.2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，精密吸取對(duì)照品溶液1 μL，供試品溶液1 μL,注入氣相色譜儀測(cè)定。結(jié)果薄荷腦含量分別為26.0，24.7，25.9 mg/片。

表1 薄荷腦加樣回收率試驗(yàn)

3 討論

《中國(guó)藥典》2010年版一部中薄荷腦(單體原料)項(xiàng)下的GC含測(cè)柱溫是120 ℃，若以此條件檢測(cè)香桂活血膏中的薄荷腦成分，其分離度達(dá)不到要求，而柱溫降至100 ℃時(shí)，GC色譜分離度明顯改善，故對(duì)《中國(guó)藥典》方法作了部分改進(jìn)。

本文對(duì)樣品處理中的提取溶媒作過(guò)比較，結(jié)果是使用無(wú)水乙醇提取的方法明顯優(yōu)于乙酸乙酯，乙酸乙酯法所制得供試液GC圖譜的基線明顯不到位；對(duì)提取方法，比較了揮發(fā)油提取器和無(wú)水乙醇直接超聲提取二者效果，結(jié)果是使用揮發(fā)油提取器所得供試品GC圖譜分離效果不如超聲提取。

在確定使用無(wú)水乙醇超聲法基礎(chǔ)上，以GC色譜中薄荷腦峰面積為指標(biāo)，平行篩選乙醇用量(40～60 mL)和超聲時(shí)間(30～60 min)，選出了本文的“50 mL無(wú)水乙醇超聲45 min”的基本前處理方法。

[1] 衛(wèi)生部.衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑[S].第4冊(cè). 1991：127.

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì) 中國(guó)藥典[S].一部.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：395-396.

AssayofMentholinXiangguiHuoxuePlasterbyGC

HU Duan-long，JIANG Li-zhen，ZHAO Hua-liang，XI Jing-fang，ZHANG Guo-ming

(ShanghaiInstituteofChineseMateriaMedica，Shanghai201401)

To establish a GC method determinate ι-menthol content in external-used TCM Xianggui Huoxue Plaster.A good linear relationshi Pwas at a range from 0.107 8 to 2.155 0 μg.The contents of ι-menthol in three batches were 26.0，24.7 and 25.9 mg per plaster respectively.The method was simple，quick and repeatable，could be used for quality control of the plaster.

Xianggui Huoxue Plaster；Menthol；Assay；Gas Chromatography

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張國(guó)明，Tel：(021)37565589-127，E-mail：zhangguoming1271@yahoo.com.cn

2012-03-26)