菟絲子粗提物抗疲勞作用研究

尹愛武，田 潤，王 盼

（1.湖南科技學院，湖南永州 425100；2.湖南中醫藥高等專科學校，湖南株洲 412012）

菟絲子粗提物抗疲勞作用研究

尹愛武1，田 潤2，王 盼1

（1.湖南科技學院，湖南永州 425100；2.湖南中醫藥高等專科學校，湖南株洲 412012）

目的：研究菟絲子的抗疲勞作用。方法：將昆明種小白鼠隨機分為4組，分別為空白對照組、菟絲子低、中、高劑量組，分別灌胃給予蒸餾水、5、10、15g生藥/kg·bw的菟絲子水提物，連續給藥30d，測定小鼠負重游泳時間。采血、分離血清，測定乳酸脫氫酶（LDH）、血乳酸（BLA）含量，并取小鼠肝臟與后腿部肌肉，測定肝糖元（LG）、肌糖元（MG）的含量。結果：菟絲子低、中、高劑量組與空白組比較，能顯著延長小鼠負重游泳時間，降低血乳酸水平，增加乳酸脫氫酶的活力及增加肝糖元、肌糖元的含量（p＜0.01）。結論：菟絲子具有顯著的抗疲勞作用。

菟絲子，抗疲勞，乳酸，肝糖元，肌糖元

人體容易產生疲勞是機體處于亞健康狀態的表現。由于人們生活方式與節奏的改變，研究開發提神抗疲勞產品已成為國內外食品營養行業關注的熱點。疲勞的發生和消除與能量物質代謝、血清酶學變化、自由基等多種機制有關[1-3]。現代研究發現多種植物成分有抗疲勞作用，如雙孢菇水提物[4]、人參蛋白[5]和鹿茸水提物[6]等。菟絲子中含有黃酮、多糖、生物堿及氨基酸等多類生物活性物質[7-11]。研究表明，菟絲子具有壯陽[12]、抗生殖損害[13]、增加冠脈流量與減少心肌耗氧量[14]、抗衰老[15]等作用。目前未見關于菟絲子抗疲勞作用的研究報道。本文對菟絲子抗小鼠運動性疲勞作用進行研究與探討，為菟絲子用于抗疲勞產品的開發應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與設備

菟絲子 湖南廉橋藥材大市場；昆明種小白鼠160只，健康，雌雄各半，體重（22±2）g，湖南省動物實驗中心；乳酸脫氫酶試劑盒、血乳酸試劑盒、肝糖元試劑盒、肌糖元試劑盒 南京建成生物工程研究所。

N-1000S-WA旋轉蒸發儀 日本EYELA；塑料游泳箱（40cm×60cm×40cm）自制，水深30cm。

1.2 實驗方法

1.2.1 菟絲子提取物的制備 稱取一定量菟絲子，用8倍量潔凈自來水浸泡30m in，在100℃下加熱回流提取60m in，過濾，濾渣加7倍量潔凈自來水加熱回流提取60m in，過濾，合并濾液，減壓濃縮，制成濃度為1g生藥/m L藥液。

1.2.2 小鼠負重游泳實驗[16]

1.2.2.1 動物分組和給樣 健康昆明種小白鼠，適應性飼養1周后，隨機分為空白對照組、菟絲子高、中、低劑量組共4組，每組20只，雌雄各半。各組小鼠每天灌胃1次，連續灌胃30d，空白對照組給予蒸餾水，菟絲子高、中、低劑量組給藥量分別為5、10、15g生藥/kg·bw。

1.2.2.2 負重游泳時間測定 灌胃30d后，于末次灌胃30m in后在尾根部負荷小白鼠體重6%的鉛皮，置于游泳箱中游泳，水深30cm，水溫（30±1）℃，記錄小白鼠自游泳開始至沉入水中8s不能浮起的時間，為小白鼠的負重游泳時間（s）。

1.2.3 生化指標的測定[17]動物分組和給樣同“1.2.2.1”項。末次灌胃前小白鼠隔夜禁食不禁水12h，末次灌胃前小白鼠眼眶采血，離心，制備血清備用。灌胃30m in后，將小白鼠置于水溫度為（30±1）℃的游泳箱中不負重游泳90m in，休息60m in后眼眶采血，離心，制備血清備用。取小白鼠肝臟和后腿部肌肉，用冰生理鹽水洗去血漬，濾紙吸干備用。按照試劑盒說明測定乳酸脫氫酶（LDH）、血乳酸（BLA）、肝糖元（LG）、肌糖元指標（MG）。

1.2.4 統計分析 數值用X±SD表示，用SPSS 12.0統計分析，測定值采用單因素方差分析，并進行多重比較。

2 結果與分析

2.1 菟絲子對小白鼠體重的影響

負重游泳實驗中各組小白鼠隔天測體重一次，結果見表1。結果顯示各組小白鼠體重沒有顯著差異（p＞0.05）。表明體重不會影響各組間生化指標的比較。

表1 菟絲子對小白鼠體重的影響（X±SD，n=20）Table 1 Effectof Semen Cuscutae on bodyweigh（t±SD，n=20）

表1 菟絲子對小白鼠體重的影響（X±SD，n=20）Table 1 Effectof Semen Cuscutae on bodyweigh（t±SD，n=20）

2.2 菟絲子對小白鼠耐力的影響

疲勞最直接的表現就是運動能力的下降。小白鼠負重游泳時間與小白鼠的運動能力呈正相關。表2表明菟絲子低、中、高劑量組能極顯著地延長小白鼠負重游泳時間（p＜0.01）；菟絲子中、高劑量與低劑量組之間比較，中、高劑量組小白鼠負重游泳時間極顯著延長（p＜0.01），結果說明菟絲子能顯著提高小白鼠運動耐力，且有劑量反應關系，增大給藥劑量小白鼠運動耐力增強。

表2 菟絲子對小白鼠負重游泳時間的影響（X±SD，n=20）Table 2 Effectof Semen Cuscutae on loading swimming time of mice（±SD，n=20）

表2 菟絲子對小白鼠負重游泳時間的影響（X±SD，n=20）Table 2 Effectof Semen Cuscutae on loading swimming time of mice（±SD，n=20）

注：*表示與空白組相比較p＜0.01；△表示與低劑量組比較p＜0.01。

2.3 菟絲子對小白鼠血乳酸的影響

機體長時間劇烈運動后，肌肉組織供氧不足，糖酵解產生的丙酮酸還原為乳酸。乳酸濃度增加使肌肉組織內pH下降，導致機體疲勞。乳酸脫氫酶催化分解乳酸，減少乳酸在肌肉組織的堆積。由表3可知，與空白對照組比較，菟絲子低、中、高劑量組小白鼠運動后血乳酸含量極顯著降低（p＜0.01），乳酸脫氫酶活力顯著增強（p＜0.01）。結果表明菟絲子可以減少機體運動后，血乳酸水平，從而達到抗疲勞的效果。

表3 菟絲子對小白鼠血乳酸及乳酸脫氫酶的影響（±SD，n=20）Table 3 Effectof Semen Cuscutae on blood BLA and LDH of mice（±SD，n=20）

表3 菟絲子對小白鼠血乳酸及乳酸脫氫酶的影響（±SD，n=20）Table 3 Effectof Semen Cuscutae on blood BLA and LDH of mice（±SD，n=20）

注：*表示與空白組相比較p＜0.01；表4同。

組別 血乳酸（mmol/L） 乳酸脫氫酶（U/L）游泳前 游泳30min后 游泳30min后空白 5.5±0.7 9.5±0.9 4529.6±583.0低劑量 5.6±0.6 7.2±0.5* 5904.8±604.7*中劑量 5.5±0.9 6.3±0.8* 6036.4±658.2*高劑量 5.8±1.0 6.2±1.1* 6173.4±675.9*

2.4 菟絲子對小白鼠運動后肌糖元與肝糖元的影響

肌糖元是機體運動最直接的能量來源，隨著肌糖元的不斷消耗，機體動用肝糖原以維持血糖水平穩定。因此，機體運動后肌糖元和肝糖元的水平能反映其抗疲勞能力。從表4可知，菟絲子低、中、高劑量組肌糖元、肝糖元的水平極顯著高于空白組（p＜0.01）。表明菟絲子有顯著的抗疲勞效果。

表4菟絲子對小白鼠運動后肌糖元與肝糖元的影響（X±SD，n=20）Table 4 Effectof Semen Cuscutae onmuscleglycogen and liver glycogen ofmiceafterswimming（±SD，n=20）

表4菟絲子對小白鼠運動后肌糖元與肝糖元的影響（X±SD，n=20）Table 4 Effectof Semen Cuscutae onmuscleglycogen and liver glycogen ofmiceafterswimming（±SD，n=20）

組別 肌糖原（mg/g） 肌糖元（mg/g）空白 0.75±0.16 5.2±0.54低劑量 0.96±0.20* 6.95±0.98*中劑量 0.97±0.21* 6.77±1.01*高劑量 0.97±0.18* 6.84±1.20*

3 結論

本研究用菟絲子水粗提物對小白鼠灌胃給藥，從能量物質代謝、血清酶學變化探討菟絲子的抗小白鼠疲勞作用。發現菟絲子水粗提物有顯著的抗小白鼠疲勞作用，給藥組小白鼠負重游泳時間顯著延長，血乳酸水平降低，乳酸脫氫酶的活力增強，肝糖元、肌糖元的儲備量增加。后期將對菟絲子水粗提物進行分離，進一步研究菟絲子中哪類物質產生抗疲勞作用，并進一步研究其抗疲勞機制。

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Study on anti-fatigue effect of Semen Cuscutae crude extracts

YIN Ai-wu1，TIAN Run2，WANG Pan1
（1.Hunan University of Science and Engineering，Yongzhou 425100，China；2.Hunan Traditional Chinese Medical College，Zhuzhou 412012，China）

Ob jective：To study the anti-fatigue effec tof Semen Cuscutae.Methods：Kunm ing m ice were random ly d ivided into 4 g roups.Blank control group was given d istilled water by intragastric adm inistration.Semen Cuscutae low-dose，m idd le-dose and high-dose g roup were given the extract 5，10，15g·（kg·bw）-1by intragastric adm inistration，respectively.Loaded swimm ing time was tested after successive adm inistration 30d，the b lood was collected and serum was separated，the content of lactate dehyd rogenase and lactic acid were determ ined.Then the content of liver g lycogen，musc le g lycogen were determ ined by m ice liver and the posterior leg musc les.Results：There was significant d ifference between Semen Cuscutae g roup and b lank control g roup（p＜0.01）.The result showed as follows：Semen Cuscutae could significantly p rolong sw imm ing time，reduce lactic acid level，inc rease lac tate dehyd rogenase vitality，increase liver g lycogen and musc le g lycogen content.Conc lusion：Semen Cuscuta had a remarkab le anti-fatigue effect.

Semen Cuscutae；anti-fatigue；lactic acid；liver g lycogen；musc le g lycogen

TS201.2

A

1002-0306（2012）14-0164-03

2011－12－05

尹愛武（1981-），男，博士，主要從事中藥新藥的研究與開發。

湖南省重點學科建設項目資助（2011-76）；湖南省高?？萍紕撔聢F隊支持計劃資助（2012-318）。