非小細胞肺癌患者血清血管生成素－2水平及其臨床意義

徐春華，于力克，張 宇

(南京市胸科醫院呼吸科，江蘇南京210029)

腫瘤的生長、侵襲和轉移依賴于腫瘤性的血管生成［1］。血管生成素 －2(angiopoietin-2，Ang-2)是作用強大的促血管生長因子，可促進內皮細胞分裂與增殖。越來越多的資料顯示，血清Ang-2水平升高與多種類型腫瘤的發生、發展和預后有關［2－6］。為探討 Ang-2在非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)發生、發展過程中的作用，作者選擇102例NSCLC患者的血清標本，對其Ang-2水平進行檢測，以期探討Ang-2在NSCLC相關研究中的應用價值。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 收集2007年1月至2009年1月在我院住院的患者，所有患者均未接受過放化療，且臨床資料齊全。102例NSCLC均經臨床及病理組織學確診，男性52例，女性50例;年齡35～78歲;腺癌60例，鱗癌42例;高分化癌14例，中分化癌40例，低分化癌48例;根據2009年國際抗癌聯盟(UICC)修訂的肺癌TNM分期標準，Ⅰ期13例，Ⅱ期30例，Ⅲ期29例，Ⅳ期30例;無淋巴結轉移者40例，有淋巴結轉移者62例。其中手術患者52例，年齡38～74歲;復發患者42例，年齡38～71歲。良性肺部疾病組為同期住院患者60例，男性40例，女性20例，年齡33～74歲。健康對照組90例，均為門診健康體檢者，男性50例，女性40例，年齡28～69歲。所有NSCLC患者均至少隨訪1 a。

1.2 檢測方法 清晨空腹抽靜脈血5 mL，室溫下靜置 30 min，3 000 r·min－1離心15 min，分離血清，－70℃保存待測。Ang-2測定采用酶聯免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法，按照人 Ang檢測試劑盒(美國R＆D公司)說明書進行操作。檢測儀器為美國Biocell HT2型酶標儀。

1.3 統計學處理 應用SSPS 13.0進行分析，計量資料以±s表示，比較采用t檢驗或單因素方差分析，檢驗水準 α =0.05。

2 結果

2.1 各組血清Ang-2水平比較 NSCLC組患者血清Ang-2水平高于良性肺部疾病組和健康對照組(P均＜0.01);良性肺部疾病組與健康對照組比較差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 不同組別患者血清Ang-2水平比較μg·L－1

2.2 NSCLC患者血清Ang-2水平與臨床病理特征的關系 Ⅲ～Ⅳ期患者血清Ang-2水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者;有淋巴結轉移患者高于無淋巴結轉移患者;手術前高于手術后;復發后高于復發前;存活期1 a以內患者低于存活期1 a及以上患者，各組比較差異均有統計學意義(P均＜0.01)。見表2。

3 討論

Ang是1985年由哈佛醫學院Fett等首次從人結腸癌HT-29細胞培養上清中分離純化得到的一種血管生成因子［7］。目前發現Ang家族共有4個亞型，包括 Ang-1、Ang-2、Ang-3和 Ang-4。Ang-2基因位于8p21上，相對分子質量約75×103，全長496個氨基酸，含3個結構域(疏水性分泌信號肽、N端螺旋卷曲結構域、C端纖維蛋白原樣結構域)，包括9個外顯子和8個內含子，其中3個內含子插入螺旋區，1個內含子位于鉸鏈區，4個內含子分布于纖維蛋白樣區。腫瘤的形成與轉移依賴于新血管的生成，而不同來源的腫瘤組織及腫瘤細胞系中均有Ang mRNA的表達，在腫瘤發生的不同階段刺激新血管的生成，且腫瘤患者血液中Ang水平的高低與腫瘤的惡性程度密切相關。Etoh等［8］的研究發現Ang-2可以通過誘導內皮細胞蛋白酶的產生促進腫瘤血管的形成及腫瘤生長、轉移。

表2 NSCLC患者血清Ang-2水平與臨床病理特征的關系μg·L－1

本研究應用ELISA法檢測Ang-2在NSCLC患者血清中的水平，發現Ang-2在NSCLC患者血清中表達水平明顯高于良性肺部疾病組或健康對照組(P均＜0.01)，提示Ang-2與NSCLC的發生有關。還發現男性NSCLC患者血清Ang-2水平高于女性患者，＜60歲患者高于≥60歲患者，但差異均無統計學意義(P均＞0.05);對于不同病理類型和病理分級NSCLC患者血清Ang-2水平檢測發現，肺鱗癌較肺腺癌高，低分化癌較高 －中分化癌高，但差異亦均無統計學意義(P均＞0.05)。這表明血清Ang-2水平高低與患者性別、年齡、病理類型及病理分級無關。Ⅲ～Ⅳ期患者血清Ang-2水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者，有淋巴結轉移患者血清Ang-2水平明顯高于無淋巴結轉移者。提示血清Ang-2水平與淋巴結轉移和TNM分期關系密切，與文獻［9］報道一致。由上可推測，Ang-2的高水平對評價NSCLC的發生、發展有一定的價值。術前患者血清Ang-2水平高于術后患者，差異有統計學意義(P＜0.01)，說明手術可有效清除和降低患者體內活性腫瘤細胞，監測Ang-2水平有助于判斷手術效果和指導治療。本文對42例復發患者檢測發現，復發后患者血清Ang-2水平升高(P＜0.01)，說明血清Ang-2水平具有較好的監測復發的作用;經過隨訪，我們進一步發現存活期1 a及以上的患者血清Ang-2水平較存活期1 a以內患者低，與有關研究［10］基本一致。說明血清Ang-2水平對于判定預后也有一定參考作用。

總之，血清Ang-2水平與腫瘤活動度密切相關，可反映疾病的嚴重程度，用于判定手術效果、監測復發和評估預后等，可給臨床工作者提供多方面參考。

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［10］Etoh T，Shibuta K，Barnard GF，et al.Angiogenin expression in human colorectal cancer:the role of focal macrophage infiltration［J］.Clin Cancer Res，2000，6(9):3545 －3551.