貴州不同產地南板藍根中腺苷的含量研究

楊 丹 張麗艷 羅 君 楊玉琴 李 健

1.貴陽中醫學院實驗中心，貴州 貴陽 550002;2.貴陽中醫學院第一附屬醫院，貴州 貴陽 550002

南板藍根為爵床科Acanthaceae馬藍屬植物馬藍Baphicacan thus cusia(Nees)Bremek.的干燥根莖及根［1]。收載于2010版《中國藥典》，南板藍根主產于兩廣地區、貴州及云南等地［2]。南板藍根為黔產道地藥材，其性寒、味苦，歸心、胃經，具有清熱解毒、涼血的功效，用于溫病發斑、丹毒、流感、流腦等疾病。目前《中國藥典》僅采用性狀和理化鑒別對南板藍根進行質量控制。南板藍根中的核苷類成分通過參與并干擾細菌和病毒的基因表達過程，從而起到一定的抗病毒作用［3]。因此，對南板藍根中腺苷 (A-denosine)的含量進行研究就顯得尤為重要。目前，尚未見采用HPLC法對其進行含量測定的報道。故本文對貴州不同產地的南板藍根，進行了腺苷的含量測定，并進行了質量評價與對比研究。進一步闡明南板藍根的最佳產區與道地性，將有利于南板藍根藥材的標準化種植與質量控制。

1 儀器與試藥

島津LC-20AT高效液相色譜儀 (日本)，超聲波清洗器為天津恒奧科技公司，型號：HS10260D。甲醇為色譜純(天津市科密歐化化學試劑有限公司)，水為純凈水，其他試劑均為分析純。腺苷對照品 (批號：879-200001)，購于中國藥品生物制品檢定所。

南板藍根藥材均自采集，經貴陽中醫學院魏升華副教授鑒定為爵床科植物馬藍Baphicacant huscusia(Nees)Bremek的干燥根莖及根。

2 方法與結果

2.1 色譜條件［4]色譜柱為Agilent ZORBAX EclipseXDBC18(250mm×4.6mm，5μm);流動相甲醇-水 (8：92);流速1mL·min-1;柱溫30℃;檢測波長260nm;進樣體積10μL。色譜圖見圖1。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取腺苷對照品適量，置25mL量瓶中，用10%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每1mL含0.2892mg的溶液，精密吸取1.0mL置50mL量瓶中，用10%甲醇定容至刻度，即得每1mL含腺苷0.005784mg的溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取南板藍根粉末 (過80目篩)0.5g，精密稱定，置25mL容量瓶中，精密加入30%甲醇20mL，超聲提取30分鐘，取出，放冷，用30%甲醇定容至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液15mL，置蒸發皿中，揮去溶劑，用30%甲醇定容至2 mL容量瓶中，濾過，即得。

2.4 供試品溶液提取方法的考察

2.4.1 提取溶劑的選擇 取同一批次南板藍根粉末0.5g，精密稱定，置25mL容量瓶中，精密加入30%甲醇、60%甲醇、甲醇、30%乙醇、60%乙醇、無水乙醇25mL，稱定重量，超聲提取10分鐘，取出，放冷，用溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液15mL，置蒸發皿中，揮去溶劑，用30%甲醇定容至2 mL容量瓶中，濾過，即得。結果見表1。

表1 不同溶劑對南板藍根中腺苷提取效率的影響 (n=2)

2.4.2 提取方式及時間的考察 分別精密稱取相同批次的南板藍根藥材粉末0.5 g，分別精密加入30%甲醇25mL，稱定重量，分別超聲提取10，20，30 min，或于水浴上熱回流1，2，3 h，提取結束后，加30%甲醇補足重量，濾過，精密量取續濾液15mL，置蒸發皿中，揮去溶劑，用30%甲醇定容至2 mL容量瓶中，濾過，即得。腺苷的提取量隨超聲提取時間增加而增多，但回流提取3 h卻明顯低于回流2 h，超聲提取腺苷的效率明顯高于回流提取法。見表2。

表2 加熱回流和超聲提取對板藍根中腺苷提取效率的影響

2.5 含量測定 取黔產不同產地、不同采收期、取7月份藥材不同初加工方法及不同藥用部位的南板藍根藥材粉末，按2.3項下方法制備供試品溶液，進行色譜分析，記錄腺苷的峰面積，計算含量，結果見表2，表3。

表3 南板藍根不同產地腺苷的測定結果 (n=3)

3 討論

3.1 本研究測定了9批黔產不同產地南板藍根藥材中腺苷的含量。由表2可知，4號和5號臺江產的南板藍根藥材中腺苷的含量最高，其余產地的南板藍根的含量均較低，說明腺苷的含量的高低與地域有一定的關系。關嶺產地的2個批次的藥材腺苷的含量，1號海拔高于2號，說明南板藍根的質量除地域因素以外，還與其他因素 (海拔、濕度等)密切相關。

3.2 提取溶劑及方法的選擇 通過查閱文獻［5]，對不同比例的溶劑以及提取方法進行了考察，結果發現水溶性的腺苷在30%甲醇提取的條件下含量最高。而且超聲提取含量高于回流，故選擇超聲，即節約了時間也簡化了提取工藝。方法學考察另見文。

3.3 南板藍根屬于常用中藥，用量較大，其中4號臺江產的南板藍根在9批當中含量最高，現在南板藍根主要為栽培品，由于野生品不多。因此，我們應對其栽培情況做進一步的研究與調查，確定其種源與栽培條件，建立其種植基地，確保質量的穩定可控。

3.4 在全省各地南板藍根種質資源調查過程中，發現各地的農民只把南板藍根當作染料進行栽種，不知道南板藍根是藥材。因此，為了加強其推廣應用，應增加各地農民對南板藍根的藥用認識，幫助農民增收致富。

［1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［S].一部，北京：化學工業出版社，2010.

［2]苗明三，李振國.現代實用中藥質量控制技術［M].北京：人民衛生出版社，2000：882.

［3]竇希波，于曉蕾，王穎.RP—HPLC法測定板藍根中腺苷的含量［J].齊魯藥事，2004，23(7)：28.

［4]譚麗萍，譚小勇.HPLC測定海麻雀中腺苷的含量［J].中國實驗方劑學雜志，2011，17(5)：107-109.