腫瘤病人金黃色葡萄球菌感染的耐藥性分析

陳建國，黃宏君，吳白平

（湖南省腫瘤醫院檢驗科，長沙410013）

金黃色葡萄球菌是臨床最常見的致病菌，可引起社區和醫院感染。近年來，由于抗菌藥物的廣泛使用，其耐藥性不斷增強，為了及時了解金黃色葡萄球菌的耐藥情況，為醫院感染的預防和臨床合理用藥提供科學依據。

1 材料和方法

1．1 菌株來源 2009年9月至2010年12月從本院痰，傷口分泌物，咽拭子，引流液，氣管分泌物，鼻腔分泌物等標本。分離的金黃色葡萄球菌151株。

1．2 主要試劑和儀器 法國生物梅里埃公司ATB細菌鑒定儀和長沙天地人公司細菌鑒定系統。藥敏紙片均購于英國Oxoid公司，M－H培養基購自于鄭州貝達公司。金黃色葡萄球菌ATCC25923購自長沙天地人公司。

1．3 藥敏試驗 采用法國生物梅里埃公司ATB微球菌藥敏板和K－B紙片擴散法進行藥敏檢測，藥敏判斷標準參照美國臨床實驗室標準化委員會制定的標準（CLSI－M100－S19）［1］。以 ATCC25923為質控標準菌株。

1．4 MRSA測定方法 頭孢西丁紙片法和苯唑西林紙片法。按照美國臨床實驗室標準化委員會制定的標準（CLSI）進行操作［1］。將金黃色葡萄球菌臨床分離株和質控菌制成0．5麥氏濁度，分別涂抹于MH平板，貼30μg頭孢西丁紙片和1μg苯唑西林紙片，35℃培養24h，金黃色葡萄球菌苯唑西林抑菌圈直徑≤10mm，頭孢西丁抑菌圈直徑≤21mm，判定為MRSA菌株；苯唑西林抑菌圈直徑≥13 mm，頭孢西丁抑菌圈直徑≥23mm，判定為甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（MSSA）。

1．5 統計學處理 采用SPSS13．0軟件進行統計分析。計數資料間比較采用χ2檢驗或Fisher確切概率法，P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

2．1 金黃色葡萄球菌的檢出與分布情況

臨床分離的151株金黃色葡萄球菌中有69株MRSA，占45．7%。甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（MSSA）有82株 MRSA，占54．3%。ICU 病房分離出45株金黃色葡萄球菌，MRSA有32株，占全部MRSA的46．4%。胸內科病房分離出42株金黃色葡萄球菌，MRSA有23株，占全部MRSA的33．3%。金黃色葡萄球菌在臨床各科室的標本分布依次為痰液66株（占43．8%），傷口分泌物59株（占39．1%），引流液13株（占8．61%），其它13株（占8．61%）。

表1 151株金黃色葡萄球菌對14種抗生素的耐藥率（%）

2．2 MRSA組和 MSSA組金黃色葡萄球菌的耐藥率的比較

69株MRSA對萬古霉素，替考拉寧，利奈唑胺100%敏感，對米諾環素，利福平有較低的耐藥率，分別為26．1%和31．9%，對其它抗生素耐藥率都大于60%。82株MSSA對青霉素G100%耐藥，但對其它抗生素保持了較高的敏感性，對萬古霉素，替考拉寧，利奈唑胺100%敏感。MRSA組對絕大數抗生素的耐藥率明顯較MSSA組高。

2．3 兩種MRSA檢測方法結果

151株金黃色葡萄球菌，69株對頭孢西丁耐藥，判定為MRSA菌株，檢出率為45．7%；68株對苯唑西林耐藥，判定為MRSA菌株，檢出率45．0%。經卡方檢驗無統計學意義（χ2＝0．32，P＜0．05）具體情況見表2。

表2 兩種MRSA檢測方法結果

3 討論

近年來，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌是引起醫院感染的主要病原菌，且對臨床常用的大多數抗生素有很高的耐藥率，因而引起的院內感染，成為臨床普遍關注的問題［2］。

從腫瘤病人感染部位分離出151株金黃色葡萄球菌中，MRSA檢出69株，占45．7%，高于劉學勇等［3］報道34．5%，低于孫琪等［4］報道的63．5%，表明不同地區和醫院MRSA檢出率有明顯性差異。從病房分布來看，ICU病房分離出45株金黃色葡萄球菌，MRSA有32株，占46．4%。胸內科病房分離出42株金黃色葡萄球菌，MRSA有23株，占33．3%。說明本院耐甲氧西林金黃色葡萄球菌主要來自于ICU和胸內科。本院感染標本分布以痰和傷口分泌物為主，分別占標本總數的43．8%和39．1%，表明本院金黃色葡萄球菌引起腫瘤病人感染以呼吸道感染和傷口感染為主。

由表1分析可知：MRSA對萬古霉素，替考拉寧，利奈唑胺100%敏感，對青霉素，苯唑西林耐藥率均為100%，對克林霉素，紅霉素，慶大霉素，左氧氟沙星，復方新諾明，四環素耐藥率均大于60%，后者這些抗菌藥物均不適合MRSA感染的臨床經驗性用藥。MRSA對米諾環素，呋喃妥因，利福平有較低的耐藥率，可能與本院對米諾環素，利福平使用較少有關。盡管利福平對MRSA體外有較高的抗菌活性，但利福平易產生耐藥性，不宜單獨使用。米諾環素具有較低的耐藥率，可根據藥敏結果有針對性地使用。MSSA除青霉素，紅霉素，慶大霉素具有較高的耐藥率外，對左氧氟沙星，克林霉素，米諾環素，苯唑西林，復方新諾明等10種抗生素敏感性較高，敏感率均大于80%。MRSA和MSSA對萬古霉素，替考拉寧，利奈唑胺100%敏感。MRSA對大多數抗生素耐藥率均高于MSSA的耐藥率，差異有統計學意義（P＜0．05）。因此，臨床治療金黃色葡萄球菌感染時，應根據細菌鑒定和藥敏結果區分是否為MRSA。對于MSSA感染不宜選用利奈唑胺，萬古霉素，替考拉寧作為一線抗菌藥物，臨床在進行經驗性用藥時，應根據病情選擇性應用。但對MRSA的感染，應首先糖肽類抗生素或利奈唑胺。盡管糖肽類抗生素仍然是治療MRSA嚴重感染的首先藥物，但近年來，國外已陸續報道了萬古霉素中介金葡菌（VISA）和萬古霉素耐藥金黃色葡萄菌（VRSA）菌株［5］。因此，臨床應謹慎和避免預防性使用萬古霉素，以延緩其耐藥性產生。利奈唑胺是噁唑烷酮類抗菌藥物，主要與細菌50S核糖體亞基結合，抑制70S初始復合物形成，干擾細菌蛋白質合成，能有效治療MRSA引起的感染，具有強大的抗菌作用，與糖肽類抗生素作用相似［6］。

本研究表明，MRSA不僅對β－內酰胺類抗生素具有較高的耐藥性，而且還對喹諾酮類，大環內酯類和氨基糖苷類等多種抗菌藥物耐藥。MRSA對β－內酰胺類抗生素的主要耐藥機制是由于染色體上mecA基因編碼產生的一種特殊青霉素結合蛋白PBP2a所致。目前研究表明，mecA基因位于葡萄球菌 盒 式 染 色 體 上 （Staphylococcal cassette chromosome mec SCCmec），SCCmec是一種新型的可移動元件，該元件還攜帶除mec基因外許多抗菌藥物耐藥基因，如大環內酯類，喹諾酮類，氨基糖苷類耐藥基因，從而引起多重耐藥性［6］。SCCmec基因型與MRSA流行背景有關，不同地區，不同醫院SCC－mec基因型可能不同，本院MRSA遺傳背景如何有等于我們進一步研究。

CLSI推薦頭孢西丁紙片法檢測MRSA，頭孢西丁主要地誘導mecA基因表達，能檢出低水平，異質性MRSA。該方法簡便，敏感性和特異性較高，能作為臨床鑒定MRSA可靠方法。本實驗對151株金黃色葡萄菌同時使用苯唑西林和頭孢西丁紙片法進行檢測，以頭孢西丁作為金標準，苯唑西林檢出68株，頭孢西丁檢出69株，二者基本相符（χ2＝0．32，P＞0．05），表明苯唑西林紙片法可作為 MRSA的篩選試驗。

［1］Clinical and Laboratory Standard Institute．Performance Standards for antimicrobial susceptibility testing［S］．Nineteenth information supplement，M－100－19，CLSI，2009．

［2］Kim S，Song JS，Lee HJ，etal．Asurvey of community－associated methicillin－resistant Staphylccoccal aureus in korea［J］．Antimi－crob Chemother，2007，60：1108．

［3］劉學勇．110株金黃色葡萄球菌對15種抗生素的敏感性分析［J］．河南科技大學學報（醫學版），2006，28（1）：55．

［4］孫 琪，劉 軍，齊桂云，等．耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的檢測及耐藥性分析［J］．哈爾濱醫科大學報，2009，43（5）：469．

［5］Perichon B，Courvalin P．VanA－type vancomycin－resistant Staphylococcal aureus［J］．Antimicrob Agents Chemother，2009，53：4580．

［6］朱德妹，張嬰元，周 樂，等．利奈唑胺體外抗菌作用研究［J］．中國感染與化療雜志，2008，8（2）：81．

［7］杜 娜，王 輝，牛俊奇，等．我國五家教學醫院耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的SCCmec分型及毒素基因的檢測［J］．中華檢驗醫學雜志，2007，30（5）：499．