補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型血脂的影響1）

張紅珍

補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型血脂的影響1）

張紅珍

目的 利用高脂飼料加維生素D3誘發(fā)的動(dòng)脈粥樣硬化（AS）模型，觀察益氣活血代表方劑補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)AS模型血脂的影響，探討其治療作用及可能機(jī)制。方法 大鼠動(dòng)脈粥樣硬化造模成功后，隨機(jī)分為4組。補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療組：造模成功后給予補(bǔ)陽(yáng)還五湯17.5g／（kg·d）灌胃；川芎嗪治療組：造模成功后給予川芎嗪0.2g／（kg·d）灌胃；正常對(duì)照組一直飼喂普通飼料；模型組造模成功后改喂普通飼料。灌胃30d。用藥一月后測(cè)定血脂水平。結(jié)果 高脂飲食加維生素D3可誘導(dǎo)大鼠形成動(dòng)脈粥樣硬化模型，模型組的血脂明顯高于正常組。補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療組的總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL）水平均顯著低于川芎嗪治療組、模型組。結(jié)論 益氣活血的代表方劑補(bǔ)陽(yáng)還五湯具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用，下調(diào)血脂水平可能是其作用機(jī)制之一。

動(dòng)脈粥樣硬化；補(bǔ)陽(yáng)還五湯；血脂；大鼠模型

目前隨著社會(huì)發(fā)展和人民生活水平的提高，以動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）為基礎(chǔ)的心腦血管疾病的發(fā)生率有逐年增高的趨勢(shì)，其致殘致死率居高不下，因此對(duì)AS的防治日益受到重視［1－3］。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療動(dòng)脈粥樣硬化主要從調(diào)血脂、抗氧化、抗血小板活性、抗凝、降纖、抗栓、溶栓、擴(kuò)血管等方面入手，相應(yīng)的治療藥物大多有肝損害、易引起出血等副作用，且價(jià)格昂貴。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為AS有黏、濃、凝、聚的特點(diǎn)，臨床以氣虛血瘀證型最為常見(jiàn)，益氣活血能明顯改善臨床癥狀［4－6］，尤其可以改善高危人群的生活質(zhì)量，延長(zhǎng)生存期，降低致殘率和死亡率，因此活血化瘀一直是研究熱點(diǎn)。

本課題運(yùn)用益氣活血代表方劑補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型干預(yù)，觀察其對(duì)血脂各項(xiàng)指標(biāo)的調(diào)節(jié)作用，以進(jìn)一步探討其抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料 健康雌性SD大鼠34只，（7～8）周齡，體重200g± 20g，清潔級(jí)，山西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心提供。飼養(yǎng)環(huán)境：溫度為（20～23）℃；濕度60%；面積約20m2；通風(fēng)良好，環(huán)境安靜。自由采食和飲水。

全自動(dòng)酶標(biāo)儀（Biorad公司）；Olimpus光學(xué)顯微鏡及顯微鏡成像設(shè)備；醫(yī)用低溫冰箱－40℃（青島海爾公司）；高速低溫離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf公司）。

維生素D3（北京索萊寶科技有限公司，批號(hào)V8070）；膽固醇（TC，成都市科龍化工試劑廠，批號(hào)100502）；膽酸（上海晶純實(shí)業(yè)有限公司，批號(hào)29865）；丙硫氧嘧啶（上海朝暉藥業(yè)有限公司，批號(hào)090901）；甲醛、異丙醇、無(wú)水乙醇、氯仿等常規(guī)試劑，均為國(guó)產(chǎn)分析純。

補(bǔ)陽(yáng)還五湯組方，黃芪30g，當(dāng)歸6g，赤芍4.5g，地龍3g，川芎3g，桃仁3g，紅花3g。購(gòu)于山西中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，水煎后濃縮。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)脈粥樣硬化模型制作 雌性SD大鼠按70萬(wàn)U／kg的總劑量灌胃給予維生素D3，分3d給完，之后每天喂高脂飼料15g（在大鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料的配方中添加1%膽固醇、0.35%膽酸、5%豬油、0.61%丙硫氧嘧啶），喂服26d［7］，整個(gè)造模周期為29d。

1.2.2 分組及給藥 34只雌性SD大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后，隨機(jī)抽取8只作為正常對(duì)照組，繼續(xù)飼喂普通飼料，其余給予維生素D3，3d后飼喂高脂飼料。21d后隨機(jī)抽取2只進(jìn)行血脂測(cè)定及主動(dòng)脈組織標(biāo)本檢測(cè)，證明造模成功，再將其余24只隨機(jī)分為3組。補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療組：造模成功后給以17.5g／（kg·d）灌胃；川芎嗪治療組：造模成功后給予川芎嗪0.2g／（kg·d）灌胃；正常對(duì)照組一直飼喂普通飼料；模型組造模成功后改喂普通飼料。灌胃30d。

1.3 血脂測(cè)定 動(dòng)物造模24d后，用藥前和用藥30d后尾靜脈采取靜脈血2mL，3 000r／min離心20min，取0.5mL血清，用酶法在全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定血清TC、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL－C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL－C）水平。

2 結(jié) 果（見(jiàn)表1）

表1 用藥對(duì)各組動(dòng)物血清脂質(zhì)的影響（±s） mmol／L

表1 用藥對(duì)各組動(dòng)物血清脂質(zhì)的影響（±s） mmol／L

?與補(bǔ)陽(yáng)還五湯組相比，1）P＜0.05

3 討 論

動(dòng)脈粥樣硬化病變具有巨噬細(xì)胞游移、平滑肌細(xì)胞增生；膠原纖維、彈力纖維和蛋白多糖等基質(zhì)形成；以及細(xì)胞內(nèi)外脂質(zhì)積聚的特點(diǎn)。由于在動(dòng)脈內(nèi)膜聚集的脂質(zhì)外觀呈黃色粥樣，故稱為動(dòng)脈粥樣硬化［8］。

AS的形成包括一系列病理過(guò)程，長(zhǎng)期高脂血癥對(duì)動(dòng)脈內(nèi)膜造成功能性損害，使內(nèi)皮細(xì)胞和白細(xì)胞表面特性發(fā)生變化，黏附因子表達(dá)增加；單核細(xì)胞黏附在內(nèi)皮細(xì)胞上的數(shù)量增多，并從內(nèi)皮細(xì)胞間移入內(nèi)膜下成為巨噬細(xì)胞；巨噬細(xì)胞吞噬氧化修飾的低密度脂蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞，形成最早的粥樣硬化病變脂質(zhì)條紋；血漿LDL等持續(xù)增高，脂質(zhì)不斷堆積而使脂質(zhì)條紋進(jìn)展，在細(xì)胞外出現(xiàn)脂質(zhì)核心；巨噬細(xì)胞通過(guò)合成和分泌多種細(xì)胞因子，刺激平滑肌細(xì)胞游移到脂質(zhì)條紋中，促使脂質(zhì)條紋變?yōu)槔w維脂肪病變，最終形成粥樣斑塊。其中，高脂血癥在AS發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮了重要作用，啟動(dòng)并加速了AS的發(fā)展［9］。

祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為AS是全身性疾患，辨證屬本虛標(biāo)實(shí)，氣虛血瘀證是AS的常見(jiàn)證型之一，益氣活血是針對(duì)性的治療法則。

補(bǔ)陽(yáng)還五湯為益氣活血的代表方劑，出自清代名醫(yī)王清任的《醫(yī)林改錯(cuò)》：“此方治半身不遂，口眼歪斜，語(yǔ)言蹇澀，口角流涎，大便干燥，小便頻數(shù)，遺尿不禁。補(bǔ)陽(yáng)還五湯方劑組成：黃芪四兩（生，30g～60g），歸尾二錢（10g），赤芍一錢半（10g），地龍一錢（去土）（10g），川芎一錢（10g），桃仁一錢（10g），紅花一錢（10g），水煎服”。補(bǔ)陽(yáng)還五湯據(jù)現(xiàn)代藥理學(xué)研究具有以下藥理作用：擴(kuò)張血管，尤其是動(dòng)脈血管。改善微循環(huán)，提高組織耐氧的能力。改變血液流變學(xué)的性質(zhì)，降低血脂，抗動(dòng)脈硬化。抑制血液凝固，抗血栓形成及預(yù)防血栓再發(fā)。抗血小板聚集、降低纖維蛋白原［10－14］。

以川芎嗪為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照依據(jù)為，川芎嗪是臨床安全有效的常用藥，研究結(jié)論較明確，使體外培養(yǎng)人血管內(nèi)皮細(xì)胞前列環(huán)素增高，循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞（CEC）數(shù)量減少，對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞損傷起到治療和保護(hù)作用；可抑制血栓素A2的合成，抑制血小板聚集，同時(shí)能降低全血黏度，改善紅細(xì)胞的變形性，還可直接激活纖溶酶原。通過(guò)以上機(jī)制川芎嗪可有效地抗動(dòng)脈粥樣硬化，減輕或消除各種臨床癥狀［15］。

本研究結(jié)果顯示，補(bǔ)陽(yáng)還五湯可以下調(diào)血脂水平，具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用，降低血脂可能是其作用機(jī)制之一，但由于本研究?jī)H為實(shí)驗(yàn)研究，與人類疾病的病理機(jī)制仍有一定的差距，因此，針對(duì)臨床方面的應(yīng)用還有待于進(jìn)一步研究。

［1］ 胡大一.貫徹循證醫(yī)學(xué)的原則，重視動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)防［J］.中華心血管病雜志，2002，9（30）：513－514.

［2］ Taniguchi H，Momiyama Y，Ohmori R，et al.Association of plasma C－reactive protein levels with presence and extent of coronary stenosis in patients with stable coronary artery disease［J］.Atherosclerosis，2005，178：173－177.

［3］ Bode－Boger SM，Tager M，Tager M.Aspirin reduces endothelial cell senescence［J］.Biochemical Biophysical Research Communications，2005，334（4）：1226－1232.

［4］ 姬媛媛，劉俊田，王志東.中藥防治動(dòng)脈粥樣硬化研究現(xiàn)狀述評(píng)［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志2006，12（4）：58－60.

［5］ 王綠婭，王大全，秦彥文，等.余甘子對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化家兔血漿總抗氧化能力及丙二醛和內(nèi)皮素1水平的影響［J］.中國(guó)臨床康復(fù)，2005，9（7）：253－256.

［6］ 王偉，訾勇，王婧吉.益氣活血湯治療不穩(wěn)定型心絞痛的機(jī)制探討［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2009，20（6）：1533－1534.

［7］ 溫進(jìn)坤，韓梅，杜瑋，等.一種快速建立大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型的實(shí)驗(yàn)方法［J］.中國(guó)老年學(xué)雜志.2001，21（1）：50－52.

［8］ Fichtlscherer MC，Junker R.C－reactive protein and the severity of atherosclerosic in myocardial infarction patiens with stabie angina pertoris［J］.Eur Heart J，2000，21：1000.

［9］ 蔡光先，趙玉庸.中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)科學(xué)［M］.北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2005：192－198.

［10］ 張恭.活血化瘀與炎癥中國(guó)中醫(yī)藥最新研創(chuàng)大全［M］.北京：中國(guó)古籍出版社，1996：57－58.

［11］ 常振森.淺談《醫(yī)林改錯(cuò)》活血祛瘀法［J］.廣西中醫(yī)藥，1994，17（6）：277－271.

［12］ 李林林.補(bǔ)陽(yáng)還五湯加減治療冠心病心絞痛患者86例［J］.中國(guó)健康月刊，2011，30（3）：71－72.

［13］ 陳瑤.補(bǔ)陽(yáng)還五湯加減治療腦梗塞68例臨床分析［J］.中國(guó)中醫(yī)藥咨訊，2011，3（6），131.

［14］ 李軍，王朝陽(yáng).補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)急性腦缺血大鼠血管新生影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)中醫(yī)急癥，2011，20（2）：273－274.

［15］ 黃泰康.常用中藥成分與藥理手冊(cè)［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，1999：413－420.

（本文編輯 王雅潔）

Effect of Buyang Huanwu Decoction on Blood Lipid in Atherosclerosis Rats

Zhang Hongzhen／／Shanxi University of Traditional Chinese Medicine（Taiyuan 030024）

Objective To study the effect of Buyang Huanwu decoction（BHD）on blood－lipid in atherosclerosis（AS）rat models.Methods After the AS rat models establishment，the rats were divided into 4groups at random（8rats per group）：BHD therapy group，ligustrazine therapy group，normal control group，and model group.After treatment for 1month，the levels of blood－lipid were detected.Results High fat diet and vitamin D3could induce atherosclerosis in rat.Comparing with normal control group，the level of total cholesterol（TC），triglyceride（TG）and low－density lipoprotein（LDL）in model group was increased.Comparing with ligustrazine therapy group and model group，the levels of TC，TG，and LDL in BHD therapy group were decreased significantly.Conclusion BHD had anti－atherosclerotic effects by down－regulating the levels of blood lipid.

atherosclerosis；Buyang Huanwu decoction；blood lipid；rat

R541.4 R285.5

A

1672－1349（2012）11－1346－02

張紅珍（1968—），女，畢業(yè)于山西醫(yī)科大學(xué)，副教授，碩士研究生，現(xiàn)工作于山西中醫(yī)學(xué)院（郵編：030024）。

；2012－04－10）

1）為山西省衛(wèi)生廳科技攻關(guān)基金項(xiàng)目（No.200958）