乙酰甲胺磷及代謝物在銀耳及培養料中消解殘留規律*

秦福龍 ，蔡春平，王 琪，王 華，藍錦昌

(1.福建農林大學食品科學學院，福建 福州 350002；2.福建出入境檢驗檢疫局，福建 福州 350001)

自2007年1月1日起，我國全面禁止使用甲胺磷等5種高毒有機磷農藥，乙酰甲胺磷作為高毒農藥的替代品種，在農業種植過程中廣泛使用。乙酰甲胺磷是一種高效、低毒、內吸、廣譜的有機磷類殺蟲劑，具有胃毒和觸殺作用，有-定的熏蒸作用，是緩效型殺蟲劑。但使用乙酰甲胺磷會產生甲胺磷殘留的風險。這是因為國家行業標準允許乙酰甲胺磷原藥中含有一定量的雜質甲胺磷；乙酰甲胺磷在貯存過程中也會產生甲胺磷[2-3]；國內外許多相關研究也表明：乙酰甲胺磷在蔬菜、水果、谷物等栽培過程會代謝產生甲胺磷[4-7]。

1 材料與方法

1.1 田間試驗材料

1.1.1 供試農藥：40%乙酰甲胺磷乳油 （浙江嘉化集團股份有限公司）；

1.1.2 施藥器械：工農-16型背負式噴霧器；

1.1.3 試驗時間及地點：2011年4月~5月，福建古田縣鳳埔鄉極樂村益泰隆食品公司食用菌基地；

1.2 田間試驗設計

我國現階段沒有相關標準規范銀耳栽培用藥。本試驗的施藥劑量及施藥方式參考農戶實際栽培用藥情況并結合農藥的使用說明以及GB 4285-1989《農藥安全使用標準》規定的乙酰甲胺磷在青菜和白菜上的安全使用標準。

1.2.1 農藥在銀耳子實體上的消解規律

處理一：當銀耳子實體直徑達到2 cm~4 cm時，按推薦劑量低濃度125 mL/667 m21000倍液直接對子實體均勻噴霧。共設3個小區，每個小區20個菌袋。分別于施藥后2h以及 1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、19 d采集銀耳樣，采用隨機多點取樣法。每次250 g。儲存于-20℃冰箱中，待測。

處理二：菌袋擴穴后，按推薦劑量高濃度125 mL/667m2 500倍液直接對菌袋均勻噴霧。共設三個小區，每個小區20個菌袋。當銀耳子實體直徑達到2 cm~4 cm時開始采集銀耳樣，開始采樣為第1天，分別于1 d、3d、5 d、7 d、10 d、14 d、19 d，采用隨機多點取樣法采樣，每次250g。儲存于-20℃冰箱中，待測。

1.2.2 農藥在培養料中的消解規律

滅菌后的培養料10袋，將培養料倒出、平鋪約十厘米厚，按推薦劑量高濃度125 mL/667m2500倍液均勻噴霧，然后混合均勻。分別于施藥后2 h以及1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d，19 d，28 d采集培養料樣，每次500g。儲存于-20℃冰箱中，待測。

1.2.3 培養料經高溫殺菌對農藥殘留的影響

將銀耳培養料平鋪約10 cm厚，按推薦劑量高濃度125 mL/667m2500倍液均勻噴霧，然后混合均勻，裝袋殺菌。殺菌條件：100℃，15 h~18 h時。殺菌后直接取樣，儲存于-20℃冰箱中，待測。

1.3 檢測方法

1.3.1 儀器設備：Agilent 6890N氣相色譜儀，配有FPD檢測器；HY-2調速多用振蕩器，國華電器有限公司；HGC-36A氮氣吹干儀，天津天津市恒奧科技發展有限公司；Milli-Q System超純水制備器，美國-Milipor公司；飛鴿高速離心機，上海安亭科學儀器廠。

1.3.2 樣品制備：按GB／T 5009.103-2003操作；

1.3.3 檢測方法：參照GB／T 5009.103-2003；

本試驗所有檢測均在福建出入境檢驗檢疫局技術中心完成。

2 結果與分析

2.1 乙酰甲胺磷及其代謝物甲胺磷在銀耳子實體中的消解規律

2.1.1 對銀耳子實體直接施藥，乙酰甲胺磷及甲胺磷在銀耳子實體中的消解規律

乙酰甲胺磷在銀耳子實體上的原始附著量為100.43 mg·kg-1，一級反應動力學方程式為Ct=58.43e-0.15 t，半衰期為4.5 d，r=0.9308；甲胺磷在銀耳子實體上的原始附著量為 9.34 mg·kg-1g，一級反應動力學方程式為 Ct=6.43e-0.33 t，r=0.9430， 半衰期為 2.1 d。GB 4285-1989《農藥安全使用標準》規定，乙酰甲胺磷在蔬菜上的安全間隔期為7天，試驗結果表明，施藥7天后乙酰甲胺磷的殘留量為17.65 mg·kg-1，采收時乙酰甲胺磷的殘留量為2.26 mg·kg-1，都遠遠超過我國規定的乙酰甲胺磷在蔬菜上的MRL值 （0.2 mg·kg-1）；銀耳采收時甲胺磷的殘留量0.25 mg·kg-1，我國規定甲胺磷在蔬菜中不得檢出；因此，在出菇期間對銀耳子實體直接施藥，乙酰甲胺磷和甲胺磷殘留的風險大。乙酰甲胺磷及其代謝物甲胺磷在銀耳子實體中的消解曲線見圖1。

圖1 乙酰甲胺磷、甲胺磷在銀耳子實體中的消解曲線

2.1.2 菌袋擴穴后施藥，乙酰甲胺磷及甲胺磷在銀耳子實體中消解規律，

試驗結果表明：開始采樣時銀耳子實體中乙酰甲胺磷的原始附著量為8.05 mg·kg-1，一級反應動力學方程式為Ct=6.54e-0.12 t，r=0.9664，半衰期為5.6 d；甲胺磷的原始附著量為0.42 mg·kg-1，一級反應動力學方程式為Ct=-0.42e-0.08 t，r=0.9913，半衰期為8.9 d，與子實體直接施藥相比，乙酰甲胺磷與甲胺磷的原始附著量降低，降解半衰期增長。所以，在銀耳子實體中，乙酰甲胺磷和甲胺磷降解半衰期與其濃度成反比。銀耳采收時，乙酰甲胺磷的殘留量為0.74 mg·kg-1，超過我國規定的乙酰甲胺磷在蔬菜上的MRL值 （0.2 mg·kg-1）； 甲胺磷的殘留量為0.1 mg·kg-1，我國規范甲胺磷在蔬菜中不得檢出。因此，菌袋擴穴后，直接對菌袋施藥，乙酰甲胺磷和甲胺磷在銀耳子實體中有殘留的風險。乙酰甲胺磷及其代謝物甲胺磷在銀耳子實體中的消解曲線見圖2。

圖2 乙酰甲胺磷、甲胺磷在銀耳子實體中的消解曲線

2.2 乙酰甲胺磷及其代謝物甲胺磷在銀耳培養料中的消解規律

乙酰甲胺磷在培養料中的原始附著量為107.13mg·kg-1，一級反應動力學方程式為Ct=101.66e-1.07 t，半衰期為T1／2=0.7 d，r=0.9935；施藥后2 h甲胺磷的含量為6.94 mg·kg-1，甲胺磷的一級反應動力學方程式為Ct=6.96e-1.10t，半衰期為0.6 d，r=0.9980。施藥28 d后乙酰甲胺磷的殘留量為1.99 mg·kg-1，甲胺磷的殘留量為0.13 mg·kg-1。菌袋擴穴后施藥，農藥會附著在銀耳培養料上。菌袋擴穴25 d左右，銀耳采收。在銀耳采收時，附著在銀耳培養料中的乙酰甲胺磷與甲胺磷不能完全降解，會造成銀耳中乙酰甲胺磷和甲胺磷殘留。乙酰甲胺磷和甲胺磷在培養料中的消解曲線見圖3.

圖3 乙酰甲胺磷、甲胺磷在銀耳培養料中的消解曲線

2.3 培養料經高溫殺菌對農藥殘留的影響

對40%乙酰甲胺磷乳油進行檢測，乙酰甲胺磷的含量為34%，甲胺磷的含量為2.6%；對農戶裝袋前的銀耳培養料進行檢測，乙酰甲胺磷、甲胺磷均未被檢出；培養料高濃度施藥、裝袋、高溫殺菌后，隨機抽取5袋進行檢測，結果如表1所示。乙酰甲胺磷未被檢出，這是因為乙酰甲胺磷性質不穩定，在高溫下極易分解。由于乙酰甲胺磷原藥中含有甲胺磷，同時乙酰甲胺磷高溫分解也會產生甲胺磷，甲胺磷均有檢出。此時檢出的甲胺磷濃度相對較低，對銀耳中甲胺磷的最終殘留的貢獻可以忽略。

3 討論

3.1 乙酰甲胺磷在銀耳中消解規律的特殊性

在乙酰甲胺磷的原始附著量基本相同的情況下 （100 mg·kg-1左右），賀敏等[4]報道，乙酰甲胺磷在青油菜上降解半衰期分別為1.84 d，；尹君等[8]報道，乙酰甲胺磷在雞毛菜上降解半衰期分別為1.95 d；洪文英等[9]報道，乙酰甲胺磷在白菜中降解半衰期為2.06 d；本試驗中乙酰甲胺磷在銀耳中的降解半衰期為4.5 d。乙酰甲胺磷在銀耳中的降解速率明顯低于其在蔬菜中的降解速率。銀耳對生長環境條件要求比較苛刻，銀耳生長所需的溫度、濕度、光照、酸堿度與蔬菜相比有很大的差異，這些環境條件都有可能影響乙酰甲胺磷的降解速率。Nannipieri等[10]報道，微生物能利用和降解農藥。銀耳種植時，所有制種及栽培過程都要要求無菌操作，所以微生物對銀耳中乙酰甲胺磷的降解和利用率較低。Zabik等[11]報道，光解是農藥降解的重要途徑之一。在銀耳子實體階段，只需照射一定量的散射光，而蔬菜則是強烈的陽光直射，所以乙酰甲胺磷在蔬菜中的光降解速率可能較銀耳中快。

3.2 乙酰甲胺磷在銀耳中的安全性評價

農藥乙酰甲胺磷存在的問題主要是有效成分含量不足和雜質甲胺磷超標。有效成分含量過低，達不到預定殺蟲、殺菌等效果，農戶因而會加大施藥量，造成甲胺磷最終殘留的風險增大。雜質甲胺磷含量超標，會產生藥害，污染環境。

表1 殺菌后培養料中農藥殘留量

乙酰甲胺磷在銀耳培養料及銀耳子實體中會代謝產生甲胺磷；銀耳中乙酰甲胺磷和甲胺磷的殘留不是源于殺菌前的培養料；無論是菌袋擴穴后直接對菌袋施用乙酰甲胺磷，還是出菇期間直接對銀耳子實體施用乙酰甲胺磷，銀耳中都存在乙酰甲胺磷和甲胺磷殘留超標的風險，且后一種施藥方式乙酰甲胺磷和甲胺磷殘殘留的風險更大。

本試驗參照國標中蔬菜的施藥劑量及安全間隔期，并結合農戶實際施藥情況用藥，試驗結果表明參照蔬菜的相關標準施藥，產生農藥殘留的風險較大。食用菌雖然是蔬菜的一類，但其種植方式、生長環境與蔬菜差別很大，我國現階段沒有相關標準規范食用菌栽培用藥。施藥的種類、劑量、方式，不同的種植戶之間差異很大。所以建立相關農藥在食用菌中的使用規范迫在眉睫。

[1]胡秀清，宋金偙，謝艷麗，等．食用菌農藥殘留研究 [J]．中國食用菌，2009，28(1)：55-57，64．

[2]盧維海，陳夏嬌，陳鐵春，等．30%乙酰甲胺磷乳油熱貯穩定性研究[J]．農藥科學與管理，2011，32(1)：27-30．

[3]李國兵，童 華，王良芥，等．30%乙酰甲胺磷乳油穩定性的研究[J]．湖北化工，1998， (增刊)：85-87．

[4]賀 敏，余平中，陳 莉，等．40%乙酰甲胺磷乳油在青油菜和土壤中的消解動態研究[J]．中國農學通報，2007，23(29)：431-434．

[5]吳 珉，胡秀卿，趙 華，等．作物和土壤中乙酰甲胺磷及其代謝物甲胺磷消解研究[J]．農藥學學報，2009，11(1)：114-120．

[6]George F.Antonious，John C．Snyder．Residues and half-lives of acephate,methamidophos,and pirimiphos-methyl in leaves and fruit of greenhouse-grown tomatoes[J]．Envi.Cont.Toxiy，1994，52(1)：141-148．

[7]J．Sanz-Asensio，A．P，Martinez-Prado．Behavior of Acephate and Metabolite Methamid ophos i n Apple Sample[J]．Chroma，1990，49(3 ／4)：l53-159．

[8]尹君，金國勛，蔡貞，等．30%乙酰甲胺磷 (乳油)在雞毛菜上的消解動態試驗研究[J]．上海農業科技，2004(4)：83-84．

[9]洪文英，吳燕君，王道澤，等．乙酰甲胺磷及其高毒代謝物甲胺磷在白菜中的殘留動態 [J]．農業環境科學學報，2011， (35)：860-866．

[10]NANNIPIERI P，BOLLAG J M．Use of Enzyme to Detoxify Pesticide Contaminated Soils and Waters[J]．J Environ Quality，1991，20：510-517．

[11]Zabik,M.J.et al,Annual revieco of Entomology，1976，21：69．