老年人群載脂蛋白E基因多態性與腦梗死遺傳易感性的關系

李學軍 郭大英 曾碧映 (益陽醫學高等專科學校，湖南 益陽 413000)

動脈粥樣硬化性腦梗死約占全部腦卒中的70%，是影響生活質量、乃至引起死亡的一大主要原因。現代研究認為人載脂蛋白E(ApoE)基因多態性與脂質代謝、動脈粥樣硬化、腦梗死發生發展有密切關系〔1〕。ApoE參與神經系統的許多病理生理過程，與神經系統變性疾病、腦血管疾病、水腫性損傷等多種臨床常見疾病有關〔2〕。ApoE結構基因具有遺傳多態性特點〔3〕。為了明確ApoE基因多態性與老年動脈粥樣硬化腦梗死之間的關系，本研究采用基因芯片技術測定ApoE基因多態性，探討其與動脈粥樣硬化腦梗死病人腦動脈粥樣硬化之間的關系。

1 對象與方法

1.1 對象 經我院倫理委員會批準通過，于2009年1月至2012年6月選擇我院住院治療的老年腦梗死患者150例作為觀察組。入選標準:年齡≥60歲;均通過頭顱CT或者MRI檢查確診動脈粥樣硬化性腦梗死。同時選取我院門診體檢健康年齡≥60歲的老年人群240例作為對照組。合并家族性高膽固醇血癥、脂肪肝、糖尿病、甲狀腺疾病、慢性肝腎疾病、周圍血管疾病、血液系統疾病、惡性腫瘤及入院前1 w內使用降脂藥物者均不納入本研究。觀察組240例，男132例，女108例，平均年齡(69.4±9.7)歲;對照組240例，其中包括男128例，女112例，平均年齡(68.7±10.1)歲。兩組的性別、年齡構成差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。研究開始前均已取得患者或者家屬的知情同意，并簽署同意書。

1.2 ApoE基因多態性及血脂水平檢測 所有受試者均空腹10 h后清晨抽取靜脈血。自然凝集血5 ml在常溫下2 000 r/min離心5 min，小心吸取血清置于-8O℃超低溫冰箱保存備用。人血液基因組DNA的提取采用堿裂解法，基因組DNA提取系統(DP319-01)試劑由天根生化科技(北京)有限公司生產提供。ApoE基因多態性采用高通量的基因芯片檢測。所有操作均嚴格按照試劑盒說明書進行操作。ApoE基因型檢測試劑盒由珠海賽樂奇生物科技有限公司生產提供。所有受試者的血脂水平〔總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)〕均經Olympus AU400全自動生化分析儀進行檢測。

1.3 統計學方法 應用SPSS17.0統計軟件進行分析，計量數據采用±s的方式表示，組間均數比較用t檢驗;計數資料采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 老年腦梗死患者與健康體檢者血脂水平比較 觀察組患者血清TC、TG水平高于對照組，差異具有統計學意義(TC:t=19.125，P=0.003;TG:t=13.412，P=0.001);HDL-c 水平低于對照組，差異亦有統計學意義(t=8.532，P=0.007)。見表1。

表1 兩組血脂水平比較(±s，mmol/L)

表1 兩組血脂水平比較(±s，mmol/L)

與對照組比較:1)P＜0.05;下表同

組別 n TC TG LDL-c HDL-c觀察組 150 5.21±0.921)1.94±0.321)2.49±0.78 1.27±0.351)對照組240 4.72±0.87 1.45±0.51 2.35±0.65 1.68±0.47

2.2 老年腦梗死患者與健康體檢者之間的ApoE基因多態性比較 在老年腦梗死患者與健康體檢者中皆以ε3/3型頻率最高，ε3/4、ε3/2 次之，ε4/4、ε2/4、ε2/2 型頻率很低，兩組人群ApoE基因型頻率均符合 Hardy-Weinberg平衡;兩組受試者ApoE ε4等位基因頻率存在明顯差異，差異具有統計學意義(χ2=3.972，P=0.030)。見表 2。

表2 兩組ApoE基因型與ApoE等位基因頻率比較〔n(%)〕

3 討論

最新研究表明ApoE是動脈粥樣硬化、腦卒中的危險因素，與心腦血管性疾病發病相關〔4〕。ApoE是一種單鏈多態糖蛋白，包括299個氨基酸殘基，主要在肝臟實質細胞合成，腦組織中的星形細胞也能合成一部分。ApoE是血漿重要的載脂蛋白之一，主要分布在血漿乳 糜微粒(CM)、極低密度脂蛋白(VLDL)和高密度脂蛋白(HDL)中，參與機體血脂代謝過程，起到維持膽固醇平衡的作用〔5，6〕，在動脈硬化的發生、發展過程中起著重要的作用。在不同的人群中，三個不同的ApoE等位基因分布頻率存在一定差異，因而不同人群中ApoE表型分布頻率也有一定程度的不同。ApoE編碼基因位于第19號染色體長臂13區2帶上，全長3.7 kb，包含4個外顯子和3個內含子。ApoE的合成由在同一個基因位點上的三個等位基因控制，通常稱為ε2、ε3和ε4，其中每一個等位基因可表達1個主要異構體，因此總共可以產生包括三種純合子(ε2/2、ε3/3、ε4/4)和三種雜合子(ε2/3、ε2/4、ε3/4)的六種常見表型，其中 ε3/3 是最常見的基因表型。

國內外研究表明ApoE是導致動脈粥樣硬化的一個重要危險因素，一般情況下血漿TC水平變化的8%左右與ApoE基因多態性存在關系〔7～9〕。我國學者研究顯示頸動脈狹窄病人等位基因ε4頻率升高，ε3頻率降低，可能說明在某種程度上ε4是頸動脈狹窄的危險因素，而ε3是其保護因素〔10〕。本研究結果表明，老年腦梗死患者ApoE ε4等位基因頻率明顯高于健康對照組，與國內相關研究報道相符〔11〕。

綜上所述，ApoE基因多態性與老年腦梗死血脂水平升高及其發病有關，ε4等位基因可能是腦梗死的危險因素，值得進一步研究。

1 鄧 可，肖志杰，吳曉球，等.載脂蛋白E基因多態性與不同年齡段腔隙性梗死關系的研究〔J〕.心腦血管病防治，2011;11(1):15-8.

2 何杏梅.血管性癡呆載脂蛋白E基因多態性檢測及其意義〔J〕.吉林醫學，2012;33(12):2495-6.

3 李曉波，李 燕.老年冠心病患者載脂蛋白B基因多態性與血脂的關系〔J〕.中國老年學雜志，2011;31(9):1655-6.

4 丁家榮，諶 衛，郭志勇，.載脂蛋白E基因多態性與終末期腎病〔J〕.中國中西醫結合腎病雜志，2011;12(5):457-9.

5 王 袁，吳琪俊，施 榕.糖尿病腎病與載脂蛋白E基因多態性相關性的Meta分析〔J〕.上海交通大學學報(醫學版)，2011;31(5):625-31.

6 張鴻青，馬 娟，田 青，等.載脂蛋白E基因多態性及超敏C-反應蛋白與冠心病相關性分析〔J〕.云南醫藥，2011;32(3):276-7.

7 馬 娟，陳吉麗.早發冠心病與載脂蛋白B、載脂蛋白E基因多態性的關系〔J〕.當代醫學，2011;17(19):27-9.

8 李衛寧，夏 勇，徐安平.載脂蛋白E基因多態性與氟伐他汀降脂療效的關系〔J〕.檢驗醫學與臨床，2011;8(18):2181-2.

9 劉建偉，葉 玲，劉 靜，等.載脂蛋白E基因多態性與原發性高血壓伴周圍動脈硬化閉塞癥的關系〔J〕.中國老年學雜志，2011;31(19):3679-81.

10 王 雁，張見影.頸動脈狹窄與ApoE基因多態性的相關性研究〔J〕.中國老年學雜志，2008;28(16):1615-7.

11 趙志全，穆俊霞，楊豐斌，等.載脂蛋白E基因多態性與腦梗死病人腦動脈粥樣硬化關系的研究〔J〕.中西醫結合心腦血管病雜志，2011;9(2):175-7.