老年鼻咽癌組織增殖細胞核抗原、血管內皮細胞表達與PET/CT顯像FDG攝取的相關性

郭立兵 石衛民 宋維舒 范義湘 胡偉漢 金 廳

(廣東省第二人民醫院腫瘤一科，廣東 廣州 510317)

近十年來脫氧葡萄糖(FDG)正電子發射體層顯像CT(PET/CT)已經廣泛地應用于惡性腫瘤的診斷，分期，療效評估等，臨床研究發現18氟FDG(18F-FDG)/PET顯像對鼻咽癌的診斷也具有重要的價值，腫瘤組織較正常組織18F-FDG的攝取顯著增加〔1〕，但其機制并不清楚。可能其與腫瘤組織快速增殖有關〔2，3〕，也可能與腫瘤細胞微環境乏氧有關〔4，5〕。因此，本文探討老年鼻咽癌組織增殖細胞核抗原(PCNA)、血管內皮細胞生長因子(VEGF)過度表達與18F-FDG PET顯像攝取的相關性。

1 資料與方法

1.1 資料 選擇2008年6月至2010年8月我院和中山大學腫瘤防治中心收治的38例老年鼻咽癌患者。病例納入標準:年齡≥60歲、首程治療、無遠處轉移的早期鼻咽癌患者;卡氏功能狀況評分(KPS)＞70分;自然生存期＞2年;能進行語言及文字溝通。其中男34例，女6例，年齡60～78(平均65.7±5.2)歲;按鼻咽癌UICC 2002分期，Ⅰ期9例，Ⅱ期31例;T分期:T1 17例;T2 23例;全部采用6 MV加速器先行面頸聯合野照射，后縮野改耳前野照射，鼻咽部總劑量為68～72 Gy，頸部組織預防量為46～50 Gy，陽性淋巴結推量18～20 Gy;患者均于放療前行PET/CT檢查。

1.2 方法

1.2.1 PET檢查 采用德國西門子公司產Biograph PET/CT掃描儀。檢查前禁食6 h以上，按150 μCi/kg靜脈給予FDG，給藥1 h后開始采集。采用三維采集模式與全身PET采集程序，取5～6個床位，每個床位發射采集與透射掃描時間比較為7∶3。以迭代法重建圖像，層厚5 mm，測量腫瘤的最大標準攝取值(SUVmax)，用感興趣區(ROI)工具測量同一層面的平均攝取值(WUVmean)。

1.2.2 PCNA，VEGF表達檢測 采用免疫組化方法。腫瘤標本經過4%甲醛固定，石蠟包埋，應用標準鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶親和(SP)免疫組化法染色。SP染色試劑盒為福州邁新生物試劑公司產品。染色陽性細胞率:由有經驗的病理醫生分別在顯微鏡上隨機選擇3個低倍視野(100倍)，計數每張切片上至少100個細胞中VEGF、PCNA染色陽性的細胞數，計算其陽性細胞的百分率;計數3次，取其平均值為染色陽性細胞率。分為5級記錄:1級0～20%，2級21% ～40%，3級41% ～60%，4級61% ～80%，5級81% ～100%。

1.3 統計學方法 應用SPSS14.0統計軟件進行分析，數據資料以±s表示，計量資料比較采用t檢驗，陽性率比較采用χ2檢驗，不同指標之間的關系比較采用Pearson相關分析。

2 結果

2.1 PET檢查結果 40例患者的鼻咽癌原發灶在PET檢查中均顯影，見圖1。原發灶的 SUVmax與 SUVmean分別為9.45±1.87和6.04±1.09。T1期腫瘤原發灶的 SUVmax為8.95±1.91，T2期原發灶的 SUVmax為11.55±1.70，T1期原發灶SUVmax低于T2期(t=4.46，P＜0.001);非角化分化型腫瘤原發灶SUVmax為 9.64±1.72，非角化未分化型腫瘤原發灶SUVmax為9.74±1.82，非角化未分化型腫瘤原發灶SUVmax為10.44±2.16，兩者比較無顯著差異(t=1.230，P ＞0.05)。

2.2 腫瘤細胞PCNA及VEGF表達 40例鼻咽癌患者腫瘤組織的PCNA染色均為陽性，陽性細胞率為36.18%，其中1級8例，2級19例，3級6例，4級2例，5級1例。鼻咽癌組織PCNA染色陽性細胞呈散在分布，無明顯區域性。PCNA陽性信號為棕黃色，定位于細胞核，見圖2。40例鼻咽癌患者腫瘤組織VEGF染色均為陽性，陽性細胞率為60.8%，其中1級4例，2級6例，3級10例，4級16例，5級4例。VEGF陽性表達部位在細胞質，胞膜也有輕度染色，在壞死組織周圍和癌巢邊緣的表達明顯增強，并且在癌細胞向間質浸潤最明顯處表達最強。見圖2。

2.3 腫瘤原發灶的FDG攝取與PCNA、VEGF表達的關系鼻咽癌組織FDG攝取(SUV max)與PCNA表達陽性率無相關(r=0.135，P=0.407)，與 VEGF 表達陽性率相關(r=0.460，P=0.03)。見圖3，圖4。

圖1 鼻咽癌PET顯像

圖2 鼻咽癌的PCNA、VEGF表達

圖3 鼻咽癌組織FDG表達(SP法，×100)

圖4 鼻咽癌組織FDG攝取(SUVmax)與PCNA、VEGF表達陽性率的相關性

3 討論

臨床研究表明，18F-FDG-PET顯像對鼻咽癌的診斷、鑒別診斷、分期均具有重要的價值，本研究發現，老年早期鼻咽癌患者癌組織的SUV值較高，高于其他部頸部惡性腫瘤〔6～9〕，說明其高代謝和生長增殖旺盛，腫瘤原發灶的FDG攝取與T分期相關，與腫瘤分化程度無明顯相關，與報道相似。

LEGF在腫瘤血管生成中處于核心地位，在多種實體瘤表達異常升高。缺氧誘導VEGF合成，促進新生血管的形成，增加血管的通透性，進而促進了腫瘤的浸潤發展和轉移〔10〕。本研究顯示，40例老年鼻咽癌患者的腫瘤組織VEGF染色均為陽性，且染色陽性細胞率集中于2～3級，與文獻報道一致〔11〕。有研究發現，小細胞肺癌和乳腺癌組織FDG-PET顯像的SUV值與腫瘤組織的微血管密度相關，與VEGF的表達相關，而與腫瘤分化、細胞增殖情況等與無關〔4，5〕。本研究顯示，鼻咽癌組織FDG攝取(SUVmax)與VEGF表達的陽性率相關。

PCNA是DNA聚合酶δ的輔助蛋白，與細胞周期的增殖周期密切相關，其表達情況反映了細胞的增殖狀態。PCNA在鼻咽癌組織中常過表達，并且與腫瘤的臨床分期、頸淋巴結轉移呈負相關〔12〕。本研究中40例老年鼻咽癌組織標本全部都有PCNA表達，陽性細胞率為36.18%，與以往報道相似〔13〕。理論上腫瘤細胞的增殖會影響腫瘤18F-FDG的攝取，但既往的研究中二者的關系則存在爭議。在一些研究中，18F-FDG與腫瘤組織增殖相關〔2，3〕，而另外一些研究中發現 FDG攝取與增殖無關〔14〕。本研究顯示，老年鼻咽癌組織18F-FDG攝取與腫瘤細胞的PCNA蛋白表達無相關。

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