樹莓組培苗的培養

王 禹

（黑龍江省農科院園藝分院，哈爾濱150069）

樹莓為薔薇科懸鉤子屬植物，灌木型果樹，果實為聚合漿果，色澤宜人，風味獨特，既可鮮食，也可加工成果醬、果汁、果凍及多種食品添加劑［1］。樹莓推廣種植與產業化開發前景廣闊，但傳統繁殖方法繁殖質量差，難以滿足當前我國大量優質苗木的需求，嚴重制約著樹莓產業的快速發展。植物組織培養是一種可以保持物種特性并能夠快速繁殖的一種生物技術手段。試驗通過植物組織培養方法篩選出適宜樹莓腋芽生長的培養基，為樹莓高效繁殖提供試驗依據。

1 實驗材料及方法

1.1 實驗材料

試驗樹莓品種為哈瑞太茲，將采集的樹莓當年生枝條去除葉片及葉柄部分，將枝條剪成帶1～2個腋芽的莖段，在流水狀態下沖洗10min。消毒程序：75%的酒精30s→0.1%HgCl2中消毒7～8min→無菌水沖洗2～3次。

1.2 試驗方法

本試驗采用的基本培養基為 MS，生長培養基試驗：6－BA 設3種濃度分別為0.5、1、1.5mg／L；IAA設3種濃度分別為0.1、0.2、0.3mg／L；蔗糖濃度分別為20、25、30g／L。

所有培養基都經高壓蒸汽滅菌20min（120～125℃，1.0～1.2大氣壓下），頭孢曲松鈉經過濾滅菌。

1.3 觀察統計方法

每一處理20瓶，每瓶2個外植體。接種25天后觀察調查萌芽情況，所得實驗數據用SPSS13.0軟件進行統計分析。

2 結果與分析

2.1 適宜生長的培養基

表1 生長培養L9（33）正交研究組合試驗結果

表1中以1mg／L 6－BA＋0.2mg／L IAA＋30g／L蔗糖處理組合的萌芽率最高，為86.7%。對表1中個處理組合的萌芽率進一步做方差分析。結果見表2。

表2 生長培養L9（33）正交研究組合方差分析結果

表2方差結果分析表明：哈瑞太茲處理總效應達到5%的顯著水平；6－BA濃度、IAA濃度、蔗糖濃度均達到了5%顯著水平。均方SIAA＞S蔗糖＞S6－BA，即對萌芽率的影響以IAA為主要因子；蔗糖次之；6－BA最小。對6－BA濃度、IAA濃度、蔗糖濃度因素進行多重比較，篩選適合的水平。結果見表3。

表3 3個因素3水平Duncan＇s檢驗

由表3中可以看出A因素A1水平平均值最大，為65%；與 A0.5、A1.5水平差異顯著。因此，最優組合選 A1水平，即6－BA濃度為1mg／L。B因素 B0.2水平平均值最大，為59.4%；與 B0.3水平差異顯著；與 B0.1水平差異不顯著，B0.1水平平均值為58.3%。因此，最優組合可選 B0.1水平或 B0.2水平，即IAA 濃度為0.1或0.2mg／L。C因素C30水平平均值最大，為66.1%，與C20、C25水平差異顯著。因此，最優組合選C30水平，即蔗糖濃度為30g／L。根據以上分析比較，篩選出的最優生長培養基1mg／L 6－BA＋0.1mg／L IAA＋30g／L蔗糖或1mg／L 6－BA＋0.2mg／L IAA＋30g／L蔗糖（此培養基與表1中的最優組合相同），兩個培養基進行培養比較。最后，篩選出的哈瑞太茲最佳生長培養基為 MS＋1mg／L 6－BA＋0.2mg／L IAA＋30g／L蔗糖。

3 結果與討論

哈瑞太茲最優生長培養基為 MS＋1mg／L 6－BA＋0.2mg／L IAA＋30g／L蔗糖。一般來說，當生長素／細胞分裂素比值高時，有利于長根，低時有利于長芽，中間比值利于愈傷組織的誘導和分化。在具體試驗中，二者只有按合適濃度和比例使用時，才能使生長向同一方向協調發展［9］。本試驗也證明了生長激素在植物生長期間，起了非常重要的作用，激素組合濃度太高不利于萌芽的發生，蔗糖濃度低也不利于萌芽的發生。

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