Toll樣受體2和4在老年慢性左心力衰竭中的表達(dá)

郭燕，李俠，楊海晨

(江蘇淮安市第二人民醫(yī)院老年科，223002)

·臨床研究·

Toll樣受體2和4在老年慢性左心力衰竭中的表達(dá)

郭燕，李俠，楊海晨

(江蘇淮安市第二人民醫(yī)院老年科，223002)

目的 探討Toll樣受體2(TLR2)和T0ll樣受體4(TLR4)在老年慢性左心力衰竭患者外周血單核細(xì)胞表面的表達(dá)。方法 根據(jù)NYHA心功能分級和左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)將健康對照者和慢性左心力衰竭患者分成對照組、心功能I級、Ⅱ級、Ⅲ級和Ⅳ級組。采用流式細(xì)胞儀檢測外周血單核細(xì)胞表面TLR2和TLR4的表達(dá)。結(jié)果 左心力衰竭患者不同心功能組中TLR2和TLR4的表達(dá)均顯著高于對照組(均P＜0.05)，且隨著心功能分級的升高而明顯上升。LVEF隨著心功能分級的升高而逐漸下降，且與對照組比較，均P＜0.05。結(jié)論 TLR2和TLR4可能作為一種危險(xiǎn)因素參與老年慢性左心力衰竭的發(fā)生發(fā)展。

心力衰竭，充血性;Toll樣受體2;Toll樣受體4;危險(xiǎn)因素;老年人

臨床上通常根據(jù)腦鈉肽(BNP)水平判定心力衰竭嚴(yán)重程度。但在無心力衰竭的60歲以上人群中發(fā)現(xiàn)腦鈉肽水平也升高［1-2］。因此在老年患者中僅根據(jù)腦鈉肽水平來判斷左心力衰竭嚴(yán)重程度有一定的局限性。為此我們通過臨床研究，探討Toll樣受體在老年慢性左心力衰竭患者外周血中的表達(dá)，為老年慢性左心力衰竭提供可能新的診斷手段。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008年1月至2009年1月在本院老年病科的慢性左心力衰竭患者共87例，年齡60～86歲，平均(69.6±7.6)歲，其中男46例，女4l例。所有患者均符合老年左心力衰竭的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］，入選患者經(jīng)病史及臨床實(shí)驗(yàn)室檢查排除右心室功能受損、腫瘤、感染、血液系統(tǒng)疾病、免疫系統(tǒng)疾病、近期手術(shù)、外傷、腎功能不全、肝臟疾病和發(fā)熱等，且均未服用非甾體抗炎藥和類固醇激素。根據(jù)美國紐約心臟病學(xué)會(huì)(NYHA)的心功能分級方案和超聲心動(dòng)圖測定左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)，將所有入選病例按心功能分成4組:I級組［LVEF(42.9± 2.2)%］21例;Ⅱ級組［LVEF(34.2±3.2)%］27例;Ⅲ級組［LVEF(29.0±1.1)%］21例;IV級組［LVEF(25.1±2.1)%］18例。對照組［LVEF (63.8±5.1)%］30例，為同期健康體檢者，其中男12例，女18例，年齡60～87歲，平均(67.1±5.7)歲。各組間年齡和性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 方法 TLR2和TLR4檢測:入選者均清晨空腹采集肘靜脈血20 ml。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測外周血單核細(xì)胞表面TLR2和TLR4的表達(dá)，以平均熒光強(qiáng)度(MFI)表示TLR2和TLR4的表達(dá)水平。流式細(xì)胞儀為美國貝克曼庫爾特公司的EPICS8 ALTRA TM Flow Cytometer with Hypersort TM。主要試劑為FITC一標(biāo)記的小鼠抗人CDl4抗體、PE-標(biāo)記的小鼠抗人TLR一4抗體以及FITC-標(biāo)記的小鼠抗人TLR-2抗體，并設(shè)置IgG2 a同型對照。研究所用抗體均購自AbD seroteeh公司。LVEF的檢測:87例老年慢性左心力衰竭患者采用日本彩色多普勒超聲診斷儀測定LVEF。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行分析，計(jì)量資料以±s表示，采用方差分析、q檢驗(yàn)。采用直線相關(guān)和回歸分析判斷TLR2、ILR4與左心功能指標(biāo)變量間相關(guān)性和依存性。

2 結(jié)果

2.1 TLR2和TLR4在心力衰竭組的表達(dá) 左心力衰竭患者不同心功能組中TLR2和TLR4的表達(dá)顯著高于對照組，且隨著左心力衰竭程度的加重，TLR2和TLR4表達(dá)水平明顯上升。在各組的兩兩比較中發(fā)現(xiàn)，除了心功能I級組與Ⅱ級組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其他各組的均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 不同左心功能組間TLR2和TLR4比較(±s)

表1 不同左心功能組間TLR2和TLR4比較(±s)

注:與對照組比較，aP＜0.05

組別 例數(shù) TLR2 TLR4 LVEF(%) 30 2.75±0.82 1.45±0.36 60.8±2.9 I級組 21 4.24±2.39a2.58±1.84a40.7±3.7aII級組 27 4.16±0.93a2.61±0.53a30.8±2.6aIII級組 21 6.36±0.69a5.03±0.71a28.6±1.9aIV級組 18 7.99±1.10a6.34±1.40a26.6±2.2對照組a

2.2 TLR2和TLR4與左心力衰竭嚴(yán)重程度的相關(guān)性 TLR2與LVEF呈負(fù)相關(guān)(r=－0.67，P＜0.01)，TLR4與LVEF亦呈負(fù)相關(guān)(r=－7.14，P＜0.01)，且TLR2和TLR4隨著LVEF的增加而下降(bTLR2，=－2.37，bTLR4=－3.52，P＜0.05)，即隨著LVEF值下降，外周血單核細(xì)胞表面TLR2和TLR4表達(dá)增多。

3 討論

Toll受體是免疫細(xì)胞表面識(shí)別病原相關(guān)分子模式的一個(gè)模式識(shí)別受體家族，最新研究顯示其在動(dòng)脈硬化免疫反應(yīng)和慢性炎癥的相互作用方面起著重要的橋梁作用［4-5］。目前研究已證實(shí)，TLR2和TLR4可導(dǎo)致心肌缺血和心肌細(xì)胞凋亡，在心功能失調(diào)中起關(guān)鍵作用。研究提示，TLR2和TLR4在體內(nèi)高度表達(dá)可引起左室功能減退和心力衰竭［6］。

急性冠脈綜合征(ACS)、穩(wěn)定型心絞痛(SAP)和頸動(dòng)脈硬化患者的循環(huán)單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和粥樣硬化斑塊中TLR2和TLR4的表達(dá)明顯升高。因此TLR2和TLR4與內(nèi)皮損傷、動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展以及動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定性有關(guān)［7-8］。實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，TLR信號通路的激活可通過有害炎性反應(yīng)促使白細(xì)胞聚集、細(xì)胞因子異常表達(dá)、心肌缺血、再灌注損傷、活化促凋亡信號反應(yīng)通路、心肌梗死后心肌細(xì)胞再灌注損傷、活化促凋亡信號反應(yīng)通路、心肌梗死后心肌細(xì)胞凋亡、心肌梗死面積擴(kuò)大、心臟幾何構(gòu)型異常和心臟功能障礙［9］。

本研究結(jié)果表明，老年慢性左心力衰竭不同心功能組兩兩比較，除了心功能I級與Ⅱ級組外，其他各組間的差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。老年慢性左心力衰竭患者TLR2和TLR4的表達(dá)水平隨著左心力衰竭程度的加重而顯著升高。本研究提示在老年慢性左心力衰竭中TLR2和TLR4之間可能存在著一致性關(guān)系，它們與LVEF呈負(fù)相關(guān)并和左心功能之間存在著依存性。由此推斷，TLR2和TLR4可能作為一種危險(xiǎn)因素參與老年慢性左心力衰竭的發(fā)生發(fā)展。TLR2和TLR4表達(dá)上調(diào)提示老年慢性左心力衰竭惡化、NYHA級別升高和LVEF下降，因此可能成為老年慢性左心力衰竭新的危險(xiǎn)因素和評估老年慢性左心力衰竭危險(xiǎn)分層的新指標(biāo)。

［1］ Jessup M，Abraham WT，CaseyDE，et al.2009 focused update:AC—CF/AHA guidelines for the diagnosis and management of heart failure in adults［J］.Circulation，2009，119(14):1977-2016.

［2］ Vaes B，De Ruijter W，Gussekloo J，et al.The accuracy of plasma natriuretic peptide levels for diagnosisofcardiac dysfunction and chronic heart failure in community-dwelling elderly:a systematic review［J］.Age Ageing，2009，38 (6):655-662.

［3］ Ahmed A.DEFEAT Heart Failure:A guide to management of geriatric heart failure by generalist physicians［J］.Minerva Med，2009，100(1):39-50.

［4］ Edfeldt K，Swedenborg J，Hansson GK，et al.Expression of toll-like receptors in human atherosclerotic lesions:a possible pathway for plaque activation.Circulation，2002，105 (10):1158-1161.

［5］ Medzhitov R，Preston-hulburt P，Ja-neay CA.A human homologue of the J Drosophila Toll protein signals activation of adaptive immunity［J］.Nature，1997，388(6640): 394-397.

［6］ Wei C.Toll-like receptor signaling:a critical modulator of cell survival and ischemic injury in the heart［J］.Am J Physiol Heart Cire Physiol，2009，296(1):H1-H12.

［7］ Monaco C，Gregan SM，Navin TJ，et al.Toll-like receptor—2 mediates inflammation and matrix degradation in human atherosclerosis［J］.Circulation，2009，120(24): 2462-2469.

［8］ Fukushima R，Soejima H，F(xiàn)ukunaga T，et al.Expression levels of Toll-like receptor genes in coronary atherosclerotic lesions of patients with acute coronary syndrome or stable angina pectoris［J］.Circ J，2009，73(8):1479-1484.

［9］ Arslan F，Smeets MB，ONeill LA，et al.Myocardial ischemia/reperfusion injury ismediated by leukocytic toll-like receptor_2 and reduced by systemic administration of a novel anti-toll-like receptor-2 antibody［J］.Circulation，2010，121(1):80-90.

R541.61

A

10.3969/J.issn.1672-6790.2012.04.031

2012-03-05)

郭燕，副主任醫(yī)師，E-mail:guoyan2001344@163.com