CIK細(xì)胞治療慢性乙型肝炎的臨床療效觀察

陳宛麗 楊瑩 張威 鄒樂樂 劉冰 王舒 金晉宇 關(guān)紅梅

CIK細(xì)胞治療慢性乙型肝炎的臨床療效觀察

陳宛麗 楊瑩 張威 鄒樂樂 劉冰 王舒 金晉宇 關(guān)紅梅

目的探討CIK細(xì)胞對(duì)慢性乙型肝炎的治療作用。方法分離患者自體外周血單個(gè)核細(xì)胞，用細(xì)胞因子誘導(dǎo)激活，并大量擴(kuò)增，制備成細(xì)胞因子活化的殺傷細(xì)胞，應(yīng)用該細(xì)胞治療慢性乙型肝炎CIK組12例和對(duì)照干擾素組21例，所有病例均按標(biāo)準(zhǔn)診斷為慢性乙型肝炎。結(jié)果CIK細(xì)胞可促進(jìn)慢性乙型肝炎患者HBeAg陰轉(zhuǎn)和HBV-DNA復(fù)常，療效高于干擾素治療組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論CIK細(xì)胞對(duì)治療慢性乙肝有臨床前景。

細(xì)胞因子激活的殺傷細(xì)胞;干擾素;慢性乙型肝炎

慢性乙型肝炎病毒(hepatitisB virus，HBV)感染中，DCs表達(dá)共刺激分子、MHCⅡ類分子、DCs刺激T淋巴細(xì)胞增生和細(xì)胞因子分泌的能力減低，因此，HBV感染的慢性化與DCs功能缺陷有關(guān)，進(jìn)一步造成CTL功能不足。細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷(cytokineinduced killer，CIK)細(xì)胞具有非MHC限制性，高增生活性，高細(xì)胞毒力以及來(lái)源豐富，回輸后副反應(yīng)少等優(yōu)點(diǎn)，在對(duì)腫瘤的治療中已取得了明顯的療效［1］，可終止HBV的慢性持續(xù)性感染狀態(tài)。本研究旨在觀察CIK細(xì)胞和干擾素a2b對(duì)慢性乙型肝炎的治療作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 我科2010年1月至2012年6月住院患者，共12例，其中男6例，女6例;平均(23.77±3.15)歲。按照《病毒性肝炎防治方案》［2］，診斷為慢性CHB，病程5～21m，入選前6月內(nèi)未接受免疫調(diào)節(jié)或抗病毒治療，并排除其他肝炎病毒的混合感染或重疊感染，HBsAg，HBeAg均為陽(yáng)性，HBVDNA定量檢測(cè)水平在106copies/mL以上，肝臟影像學(xué)證實(shí)為慢性炎癥，少部分病例同時(shí)被肝穿刺活檢證實(shí)ALT全部異常，在正常值上限1.5～5.0倍之間;另選同期干擾素治療的21例作為對(duì)照(入選條件同CIK治療組);其中男10例，女11例;平均(24.45±3.44)歲。兩組患者的臨床資料均具有可比性(P＞0.05)。

1.2 方法 分組及治療IFNa2b組:IFNa2b，每次500mU，隔日肌肉注射，6月;CIK細(xì)胞治療組:患者共抽取外周血5次，每周回輸2次，每次10億個(gè)，共10次，療程2.5月。

1.3 CIK細(xì)胞的制備

1.3.1 CIK細(xì)胞制備方法 取患者自體外周血50ml，分離單個(gè)核細(xì)胞，置含γ-干擾素、IL-2、抗CD3單抗的完全1640培養(yǎng)液中培養(yǎng)、擴(kuò)增，第7天取樣顯微鏡下計(jì)數(shù)，測(cè)定增殖速率。第10～13天細(xì)菌霉菌培養(yǎng)陰性收獲細(xì)胞，洗滌后制備成細(xì)胞懸液用于治療。

1.3.2 治療方法 采用CIK靜脈回輸。回輸前先用生理鹽水沖管，每次回輸細(xì)胞中加IL-220萬(wàn)U，30min內(nèi)輸完，同時(shí)全程輸注白介素-2每天40～60萬(wàn)IU。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，組間計(jì)量資料用t檢驗(yàn)，用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差±s)表示，率的比較用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 療程結(jié)束6個(gè)月時(shí)，CIK治療組和干擾素治療組各項(xiàng)指標(biāo)的比較CIK治療組血清HBeAg陰轉(zhuǎn)率、HBeAb陽(yáng)轉(zhuǎn)率以及ALT復(fù)常率均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。

表12 組觀察指標(biāo)比較例(%)

2.2 不良反應(yīng) CIK細(xì)胞治療組與IFNa2b組相似，主要為治療初期出現(xiàn)流感樣癥狀、低熱、外周血白細(xì)胞輕度減少，未經(jīng)特殊處理，繼續(xù)治療過程中均可消失。

3 討論

CIK治療組患者在療程結(jié)束6個(gè)月后，患者的ALT及HBV-DNA復(fù)常率、HBeAg轉(zhuǎn)陰率及HBeAb陽(yáng)轉(zhuǎn)率均高于干擾素治療組患者，除了HBV-DNA外，其他3項(xiàng)指標(biāo)之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。干擾素是最早運(yùn)用于抗HBV感染的藥物，具有直接抗病毒和調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞功能的雙重作用。在治療慢性乙肝患者時(shí)其產(chǎn)生的免疫應(yīng)答和患者體內(nèi)免疫系統(tǒng)的強(qiáng)弱有關(guān)，從本研究結(jié)果可以看出CIK療法的使用，通過免疫細(xì)胞的被動(dòng)輸入，增強(qiáng)患者的免疫應(yīng)答能力，有效抑制乙肝病毒在體內(nèi)的復(fù)制，促進(jìn)肝功能的恢復(fù)。因此，CIK細(xì)胞療法治療慢性乙肝，其對(duì)患者的抗病毒免疫能力的調(diào)節(jié)是逐漸增強(qiáng)的，且無(wú)毒副作用，不良反應(yīng)少，具有臨床應(yīng)用前景。

［1］杜清友，劉明旭，王福生.CIK細(xì)胞體外抗肝癌細(xì)胞的作用.中國(guó)癌癥雜志，2001，11:325-328

［2］第五次全國(guó)傳染病寄生蟲病學(xué)術(shù)會(huì)議.病毒性肝炎防治方案.中華內(nèi)科雜志，2001，40:62-68.

473000南陽(yáng)市第二人民醫(yī)院血液腫瘤科