科技進(jìn)展

飼喂抗生素可誘導(dǎo)豬糞便中微生物原噬菌體

在養(yǎng)殖中抗生素可增加飼料消化率并阻止疾病的發(fā)生，但是其對(duì)動(dòng)物的全部影響還不清楚。抗生素可誘導(dǎo)某些細(xì)菌的原噬菌體變異，促進(jìn)耐藥基因轉(zhuǎn)移。我們運(yùn)用基因組學(xué)評(píng)估在飼料中添加抗生素對(duì)豬腸道噬菌體基因組 (viromes)的影響，抗生素為卡巴氧和ASP250（金霉素、磺胺二甲嘧啶、青霉素）。我們通過(guò)檢測(cè)16SrRNA基因序列檢測(cè)了細(xì)菌群落。ASP250導(dǎo)致細(xì)菌和噬菌體的群落改變，卡巴氧沒(méi)有導(dǎo)致細(xì)菌和噬菌體群落的改變。抗生素的抗性基因，例如具有多重耐藥性的細(xì)菌外排泵基因在viromes中被鑒定出，但是飼喂抗生素不能明顯改變它們的數(shù)量。在服用抗生素組的viromes中編碼噬菌體整合酶基因的數(shù)量明顯增加，證實(shí)服用抗生素誘導(dǎo)原噬菌體變異。

這個(gè)研究使我們進(jìn)一步了解運(yùn)用抗生素促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)是不安全的。這個(gè)研究證實(shí)了服用抗生素促進(jìn)噬菌體耐藥基因在腸道中轉(zhuǎn)移。

圖 豬糞便分離的病毒粒子的電子顯微圖

譯自：Allen HK，Looft T，Bayles DO，et al.Antibiotics in feed induce prophages in Swine fecal microbiomes.MBio，2011 Nov 29.[Epub ahead of print]

重組豬繁殖與呼吸綜合征病毒可誘導(dǎo)白細(xì)胞介素-1β表達(dá)

白細(xì)胞介素-1β (IL-1β)是感染后產(chǎn)生的重要的炎性介質(zhì)，而且它可以當(dāng)免疫佐劑使用。在這個(gè)研究中，我們構(gòu)建了一個(gè)重組豬繁殖與呼吸綜合征病毒 (vP129/swIL1β)，將表達(dá)IL-1β的mRNA插入到 ORF1b and ORF2f基因組之間的區(qū)域。vP129/swIL1β感染MARC-145細(xì)胞，每2×105細(xì)胞在感染后36小時(shí)分泌出1 947 pg的IL-1β。經(jīng)過(guò)MARC-145細(xì)胞動(dòng)力學(xué)分析顯示vP129/swIL1β病毒與改造前的病毒具有相同的復(fù)制率。感染了vP129/swIL1β的豬并沒(méi)有復(fù)制出病癥，然后用未改造的病毒接種，可見(jiàn)呼吸癥狀和嗜睡癥狀。外周血單核細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子用熒光微球免疫測(cè)定，顯示在感染vP129/swIL1β以后 7天和 14天 IL-1β、IL-4和 IFN-γ表達(dá)水平明顯增加。然而，在感染vP129/swIL1β或未改造毒株后沒(méi)有檢測(cè)到血清中 IL-1β水平的增加。總之，這個(gè)研究說(shuō)明一個(gè)重組PRRSV可作為一個(gè)用于疾病發(fā)展和免疫中研究不同細(xì)胞因子作用機(jī)制的工具，為治療和免疫新策略的研究提供了資料。

譯自： Lawson S， Li Y， Patton J， Langenhorst RJ， et al.Interleukin-1βexpression by a recombinant porcine reproductive and respiratory syndrome virus.Virus Res，2011 Nov 20.[Epub ahead of print]

豬帶絳蟲(chóng)囊尾蚴水泡液中的蛋白和抗原多樣化

豬囊蟲(chóng)病是由豬帶絳蟲(chóng)引起的，該病對(duì)發(fā)展中國(guó)家的人和豬的健康是一個(gè)威脅，對(duì)于該病既沒(méi)有一個(gè)很好的免疫診斷方法，也沒(méi)有一個(gè)有效的疫苗。考慮到宿主及寄生蟲(chóng)的個(gè)體差異可能是該寄生蟲(chóng)變異的原因 （變異導(dǎo)致診斷試劑與疫苗的研發(fā)很難成功），我們檢測(cè)了九個(gè)自然感染囊蟲(chóng)病的病例。用二維IgG免疫印跡技術(shù)檢測(cè)囊蟲(chóng)小皰液 （VF）中的抗原對(duì)病豬血清的影響。我們發(fā)現(xiàn)在這九個(gè)病例中，VF中蛋白和抗原存在巨大的變異。而且9只豬的血清中的IgG抗體反應(yīng)也有很大的差異，以至于2維免疫印跡圖像顯示的相同數(shù)量的斑點(diǎn)和相似度只有6.3%～65.3%。

囊蟲(chóng)抗原的顯著變異和感染豬IgG抗體的相應(yīng)反應(yīng)可用來(lái)設(shè)計(jì)診斷和預(yù)防豬囊蟲(chóng)病的免疫學(xué)工具，囊蟲(chóng)抗原的變異性大是豬帶絳蟲(chóng)致病性和感染性多樣化的原因。

譯自： Esquivel-Velázquez M， Larralde C， Morales J， et al.Protein and antigen diversity in the vesicular fluid of taenia solium cysticerci dissected from naturally infected pigs.Int J Biol Sci， 2011， 7(9):1287-1297.

中國(guó)雜交野豬繁殖與呼吸綜合征的調(diào)查

2008～2009年我們?cè)谥袊?guó)雜交野豬群中進(jìn)行了一個(gè)豬繁殖與呼吸綜合征病毒 （PRRSV）血清學(xué)調(diào)查。PRRSV新的遺傳標(biāo)記回收。通過(guò)實(shí)驗(yàn)室感染豬只的試驗(yàn)，顯示野豬參與了PRRSV的傳播。

譯自： Wu J， Liu S， Zhou S， et al.Porcine reproductive and respiratory syndrome in hybrid wild boars，china.Emerg Infect Dis， 2011， 17(6):1071-1073.

圖1 在中國(guó)提取的豬繁殖與呼吸綜合征病毒非結(jié)構(gòu)蛋白2的部分氨基酸序列 (畫(huà)線(xiàn)表示刪除)

圖2 家豬和雜交野豬接種ZCYZ后的病變對(duì)比觀察

噴霧干燥豬血漿對(duì)斷奶仔豬腸道屏障功能、炎癥反應(yīng)和腹瀉的影響

為了研究不同添加水平的噴霧干燥豬血漿 （SDPP）對(duì)于腸道屏障功能、黏膜炎癥及豬腸道健康診斷指標(biāo)的影響。用離體試驗(yàn)ussing箱法依據(jù)經(jīng)上皮電阻和3H-甘露糖和14C-菊粉細(xì)胞旁流測(cè)定回腸和結(jié)腸的屏障功能，用組織形態(tài)分析和促炎細(xì)胞因子黏膜水平估測(cè)腸道炎癥情況。與對(duì)照組相比，日糧添加2.5%和5%水平的SDPP降低了斷奶后7天仔豬盲腸的14C-菊粉細(xì)胞旁滲透性。日糧添加2.5%和5%水平的SDPP降低了斷奶后14天仔豬回腸3H-甘露糖和14C-菊粉滲透性。與0和2.5%SDPP添加水平相比，日糧添加5%水平的SDPP降低了斷奶后7天和14天仔豬盲腸的短路電流、凈電離子轉(zhuǎn)運(yùn)及糞便評(píng)分。組織學(xué)分析結(jié)果表明斷奶后7天和14天飼喂2.5%和5%水平的SDPP仔豬回腸和盲腸的黏膜固有層細(xì)胞數(shù)量較少。斷奶后7天和14天飼喂5%水平的SDPP仔豬結(jié)腸而不是回腸的促炎因子TNFα的水平低于對(duì)照組。斷奶后7而不是14天飼喂2.5%和5%水平的SDPP仔豬結(jié)腸和回腸促炎因子IFNγ的水平低于對(duì)照組。總之，此研究證實(shí)了日糧添加SDPP對(duì)斷奶仔豬的腸道屏障功能、炎癥反應(yīng)和腹瀉具有有益效應(yīng)。

譯自：Peace RM，Campbell J，Polo J，et al.Spray-Dried Porcine Plasma Influences Intestinal Barrier Function， Inflammation， and Diarrhea in Weaned Pigs.The Journal of Nutrition，2011， 141： 1312.

口服啤酒酵母降低了豬大腸桿菌內(nèi)毒素產(chǎn)生的免疫和皮質(zhì)醇響應(yīng)及死亡率

本文研究了活性干酵母 [啤酒酵母菌 （Scb）]對(duì)大腸桿菌脂多糖刺激新生斷奶仔豬 （日齡26.1±3.4）產(chǎn)生免疫/皮質(zhì)醇響應(yīng)及隨后的致死率的影響。母豬被分進(jìn)兩個(gè)處理組：飼喂組 （15頭） 和不飼喂組 （15頭），Scb（200 g/噸）， 試驗(yàn)16天。在第16天，所有仔豬經(jīng)內(nèi)置頸脈導(dǎo)管灌注LPS（25μg/kg·bw）， 此時(shí)記為 0小時(shí)。 在灌注 1～6小時(shí)每隔 30分鐘采集一次血樣，24小時(shí)采集一次血樣。0～6小時(shí)及24小時(shí)血樣的不同血細(xì)胞群每小時(shí)進(jìn)行計(jì)數(shù)。在所有時(shí)間點(diǎn)用豬的特異性ELISA分析血清皮質(zhì)醇，IL-1β， IL-6，腫瘤壞死因子-α （TNF-α）， 和干擾素-γ （IFN-γ） 的濃度。 與對(duì)照組相比，Scb處理仔豬累積ADG增加39.9%，LPS誘導(dǎo)的仔豬死亡率降低20%。與對(duì)照組相比，在灌注LPS之前，Scb處理組仔豬的白血細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞增加（P﹤0.05），LPS灌注后，兩個(gè)處理組均降低到基底值以下，在24小時(shí)恢復(fù)至基底值。灌注LPS前后1小時(shí)，在都達(dá)到峰值及隨后恢復(fù)到基底值之前，Scb處理仔豬的循環(huán)皮質(zhì)醇濃度低于對(duì)照組。灌注LPS后恢復(fù)至基底值之前，Scb處理仔豬IL-1β和IL-6的高峰產(chǎn)量低于對(duì)照組。Scb處理仔豬TNF-α的峰值產(chǎn)量在0.5小時(shí)升高，且比對(duì)照組高峰產(chǎn)量高，之后，兩個(gè)處理組均恢復(fù)至基底值。在二者恢復(fù)基底值之前，與對(duì)照組相比，Scb處理IFN-γ高峰產(chǎn)量增加 （P﹤0.05），振幅持續(xù)時(shí)間增加了3小時(shí)。這些結(jié)果明確之前不確定的飼喂Scb對(duì)免疫和皮質(zhì)醇響應(yīng)及對(duì)生長(zhǎng)和內(nèi)毒素導(dǎo)致的仔豬死亡的影響。

譯自：Collier CT，Carroll JA，Ballou MA，et al.Oral administration of Saccharomyces cerevisiae boulardii reduces mortality associated with immune and cortisol responses to Escherichia coli endotoxin in pigs.Journal of Animal Science，2011， 89： 52.