不同方法檢測肌酐清除率的對比研究

吳 寧

云南省老年病醫院檢驗科，云南昆明 650011

肌酐是一種肌酸代謝的終末產物，其是由磷酸肌酸通過脫磷酸基，并閉合成環從而形成的一種內脫水物。血中肌酐的濃度主要是與腎小球濾過率有關，因而血清肌酐濃度的測定是評價臨床腎功能的重要指標[1]。目前實驗室血清肌酐的常規檢測方法主要有兩種：堿性苦味酸法和酶法[2]。本研究對本單位采用的酶法和堿性苦味酸法檢測肌酐的差異進行了比較，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 檢測儀器

采用日立7020和美國貝克曼DXC600全自動的生化分析檢測儀。

1.2 檢測和分析的方法

（1）酶法X于日立7020的 儀器進行檢測；堿性苦味酸法Y于貝克曼DXC600 儀器上進行檢測。（2）每天隨機抽取8 份臨床樣本，分別用兩種方法進行重復檢測，一共檢測5 d。（3）對檢測的結果進行記錄（Xij 和Yij），對每個檢測樣本的結果的均數（Xi 和Yi） 進行計算、樣本經重復檢測后的值間差值的絕對值（Dxi 和Dyi）和這兩種不同的檢測方法檢測的結果的均數之間的差值（Yi-Xi）。對進行重復檢測樣本得到的檢測值間的差值（Dxi 和Dyi）的均值進行計算。對兩種不同檢測方法檢測結果均值間差值（Yi-Xi）的均值進行計算。如果判斷大于平均數的4倍時，為無效的檢驗結果。

1.3 統計學處理

應用SPSS13.0統計軟件進行統計分析。采用Kappa常數（k）來評價兩者結果的一致性。Kappa值的判定標準：K＜0弱；0～0.2 差；0.21～0.40尚好；0.41～0.60中度；0.61～0.80高度；0.81～1最強。

2 結果

部分患者樣本檢驗結果見表1。所有樣本重復測定值間的差值均未超過兩種方法測定結果均值間差值的平均數，所有結果均有效。計算兩種方法測定患者血清樣本肌酐濃度結果，經Kappa檢驗，K=0.9237，一致性較好。

利用直線相關方程對兩法在不同肌酐濃度作預期偏倚和相對偏差。兩種方法的回歸線性方程是：Y=0.9987X+15.953，（相關系數r =0.997 9），以1/4 CLIA'88= 3. 75% 為判斷方法間的偏差臨床是否可接受的允許值， 結果顯示在低值和高值時苦味酸法與酶法的偏差不能接受。見表2。

表1 患者樣本檢驗結果

表2 兩種方法測定血肌酐預期偏倚、相對偏差及臨床可接受性

3 討論

目前肌酐測定方法主要包括化學法（堿性苦味酸法）、酶法、電極法、毛細管電泳法及高效液相層析法等。堿性苦味酸法的成本較低，操作較簡便，是一種測定肌酐的經典方法，但存在一定的缺陷，其受維生素C、乙酰乙酸、丙酮酸以及青霉素G、頭孢唑啉等能與苦味酸起反應的假肌酐物質的干擾，因而結果特異性不高[3]。

雖然酶法的實驗試劑價格較貴，但是基質效應對肌酐酶法的影響較小，測試結果穩定，有很好的重復性，特異性高，越來越受到實驗室的歡迎。同時肌酐酶法的線性范圍寬，是目前一種比較理想的肌酐檢測方法。而當血腫肌酐的濃度超出一定范圍時苦味酸法就比較難準確的進行測定了。相關研究表明堿性苦味酸測定方法的線性上限是2 210μmmol/L，而肌酐酶法的線性上限則可高達8 840μmmol/L[1]。本研究對分別采用肌酐酶法和堿性苦味酸法兩種不同的方法測定血清中肌酐含量的結果作了比較和偏倚的評估。肌酐酶法作為對照的方法，評估了Jaffe's 速率法，經Kappa檢驗，兩種不同方法檢測的結果一致性較好。隨著血中肌酐濃度的不斷增大，相對預期偏倚隨之減小。可以用直線回歸方程評估方法間的系統偏倚。兩種方法的回歸線性方程是：Y=0.998 7X+15.953 （相關系數r =0.997 9），以1/4 CLIA'88= 3.75% 為判斷方法間的偏差臨床是否可接受的允許值， 由結果得知低值和高值時苦味酸法與酶法的偏差不能接受，當血清肌酐濃度為100.00 μmmol/L、500.00 μmmol/L和900.00 μmmol/L時，Jaffe's 速率法的偏倚分別為11.78%、2.64%、6.51%，與徐國賓等[4]、陳雪梅等[5]的研究結果相同。

苦味酸法的測定結果與真值之間存在偏差， 當SCr＜100 μmmol/L， 實驗結果假性偏高，大約偏高5%～10%，但 SCr＞200 μmmol/L 時，測 試 結 果 則 假 性 偏 低，約10%～15%。亦有相關文獻報道當血清Cr ＜ 80 μmol/ L 時，兩種方法的測定值差異有統計學意義（ P＜0. 05） ，同時酶法的測定值普遍較苦味酸法低，甚至比正常參考值的低限低：當血清Cr＜200 μmol/ L 時，兩種方法的測定結果無統計學差異（P＞0.05） ：但當血清Cr＞200 μmol/L 時，兩者檢測結果有統計學差異，酶法的測定值均較苦味酸法的的高[6]。因此可以看出，酶法的靈敏度高，是一種理想的血清肌酐測定方法。回收試驗中酶法的平均回收率均高于苦味酸法的平均回收率[6]。

以上研究結果提示，當用不同的方法檢測同一份標本的血肌酐濃度水平時，不同的檢測的方法，檢測的結果并不相同[7]。因此在測定中，因為根據測定方法的不同建立不同的參考范圍，對比校正不同的檢測方法，才能給臨床準確一致的檢測結果。

[1]張東玲.肌酐測定的方法學進展[J].國際檢驗醫學雜志， 2006，27（6）：521-523.

[2]張建平，王治國.肌酐檢測的準確性問題研究[J].國際檢驗醫學雜志，2008，29（6）：501-503.

[3]武強，王龍武，申春梅.肌氨酸氧化酶法測定健康成人血清肌酐參考值的建立 [J].檢驗醫學， 2009，24（1）：69-70.

[4]徐國賓，李志艷.應重視實驗室檢查在慢性腎病早期診斷中的應用[J].中華檢驗醫學雜志，2006，29（11）：961-965.

[5]陳雪梅，王亞平，王芳. 兩種測定血清肌酐方法偏倚的比較[J].實驗與檢驗醫學，2010，28（5）：512-513.

[6]屈引婷， 王鴻. 兩種不同方法檢測血清肌酐結果的比較[J]. 現代檢驗醫學雜志， 2005 ，20 （4） ： 82.

[7]張建平，王治國.肌酐檢測的準確性問題研究[J].國際檢驗醫學雜志，2008，29（6）：501-503.