提高自體游離脂肪移植成活率研究進展

慈海 綜述 熊偉 審校

20 世紀 80 年代中期，Illouz、Chajchir等［1］學者提出將通過脂肪抽吸技術所獲得的純化顆粒用注射器注射修復人體軟組織缺損的方法，即自體顆粒脂肪注射移植。由于自體脂肪移植具有獲取方便，來源豐富，操作簡單，填充后充盈外形好，成本相對低廉等多項優點，且不存在異體填充物或者移植物可能引發的排異反應等潛在的風險，已廣泛用于軟組織填充并且取得了一致的認可，成為了臨床最常用的軟組織填充物。然而戚可名研究團隊［2］指出顆粒脂肪移植后存活率低于60%;Ersek［3］研究也表明脂肪移植后吸收率在20%～90%。脂肪組織移植吸收率高的問題，被文獻廣泛報道，制約著技術的廣泛臨床應用。近年來許多學者通過探索脂肪移植的成活機制、改進其修復效果，積極開展基礎與臨床方面的研究。現結合國內外有關文獻綜近年來，綜述如下。

一、促進移植脂肪成活的基礎研究

1.自體顆粒脂肪移植概念:Illouz等1?提出來自體顆粒脂肪移植概念:通過抽吸技術所得到的脂肪不再是一塊完整的組織，而是彼此分離的脂肪細胞，盡管部分細胞已無活力，但仍有部分細胞完好無損;這部分細胞被注入自體組織后，能夠在局部血運建立之前通過滲透作用保持活力。脂肪細胞實質是處于一個脂肪細胞的培養基中，而細胞培養基總比一塊移植物有更多的機會存活。因此脂肪細胞的存活是可能的。

2.自體脂肪來源干細胞概念:脂肪干細胞(adipose－ derived stemcells，ASCs)是 Zuk 等［4］于 2001年分離獲得的干細胞，ASCs的性質由 De Ugarte等［5］使用免疫熒光法測定，證明 ASCs主要由間充質起源的細胞及少量其他細胞組成。Nakagami等［6］通過實驗認為 ASCs大部分聚集在血管周圍。在缺氧狀態下ASCs釋放的血管形成因子，并分化為血管內皮細胞，成為治療局部缺血性疾病血管發生的最理想細胞來源。

二、脂肪組織的獲取、制備及注射技術等方面的研究

1.脂肪組織的獲取:現在認可的獲取脂肪技術主要自兩種:(1)傳統的吸脂術，移植物為吸脂得到的半液態脂肪;(2)Coleman技術。Coleman SR發明的組織脂肪移植技術(structural fat grafting，SFG)于1988年被Clauser等報道，因為該技術保證脂肪的完整性，減少了脂肪破壞率和再吸收率，提高了脂肪成活率。1997年Coleman認為此技術是整形外科新進展性移植脂肪技術。自體脂肪移植是長期塑性的安全方法。而Pu等［7］也提出了Coleman技術優于傳統的吸脂術的觀點。

2.脂肪組織的注射技術:李青峰等［8］提出“三低三多”自體脂肪移植技術，即"3Ls和3Ms"技術，該技術采用注射器低壓抽吸獲取脂肪，低速離心處理脂肪后，將處理過的脂肪每次低容量多隧道、多平面及多點注射到面部受區。使脂肪最大面積的接觸周圍環境。

3.脂肪組織的儲存:有學者提出使用多次注射移植的方法解決脂肪移植后的吸收問題。一次手術獲取額外的脂肪組織并將其儲存，避免增加對供區的損傷。Macrae等［9］研究表明零度之下脂肪細胞中的線粒體活性較－32℃活性強。Uiimann等［10］也不建議移植冷凍時間太長的脂肪細胞。通過對比研究了三種不同的儲存方法:冷凍干燥法、甘油中儲存和液氮中凍存，Atik等［11］發現用液氮凍存的組織優于其他方法。Erdim 等［12］對4℃，－20℃ 和 －80℃三個溫度進行了比較，發現不同的溫度對組織活性的影響也是不同的，儲藏脂肪組織最有效溫度是儲存于4℃。

三、促進脂肪移植物存活的藥物及生長因子等研究

1.VEGF和血管生成素促血管生成因子VEGF和血管生成素協同作用于血管的再生中。劉宇蘭等［13］證實移植脂肪內注射攜帶VEGF的裸質粒，可生成具有活性的VEGF，對微血管的形成起促進作用，達到減少脂肪吸收率作用。1996年Davis發現了一種促進血管生成作用的糖蛋白，即血管生成－1(Ang－1)。郭杰等［14］研究表明注射 Ang－1 早期脂肪移植體血管密度可增加，成活率可提高。

2.bFGF堿性成纖維細胞生長因子能促進增殖和分化前脂肪細胞，促進脂肪再血管化，可脂肪細胞的成活。杜學亮等［15］的研究表明用以多聚糖酐珠為藥物載體的bFGF，能增加了微血管的數量，并縮短移植體缺血期。而且他的研究提出2μg bFGF對增加移植脂肪存活率有積極作用。

3.瘦素血管內皮細胞是瘦素的靶細胞。有由肥胖基因(ob)編碼，脂肪細胞釋放的瘦素的瘦素受體。王友彬等［16］提出，作用于中樞靶細胞的瘦素可促進脂肪代謝，促進分化血管內皮細胞，加速局部血管增生，增加血供，促進脂肪代謝。

四、干細胞療法:針對干細胞在臨床上的應用，Ogawa［17］提出:如果簡單高效，無損傷獲取并處理增殖細胞;如何分化干細胞成所需細胞及如何有效的建立起三維組織結構;如何保持細胞分化后的存活及組織的再生需要充分關注。內皮細胞和脂肪細胞可由脂肪來源干細胞分化，干細胞來源豐富、操作簡單，形成血管和脂肪組織，可滿足軟組織填充的要求。修復軟組織的缺損的人類ASCs構建組織工程脂肪組織，已于許多國家已經開始使用。

五、自體脂肪移植在臨床治療方面的應用

1.面部修復方面:4～6 mm脂肪珠在1986年被Ellenbogen［18］使用，成功地修復鼻唇部皺褶、痤瘡凹陷、眼瞼下垂、面部皺紋、面部萎縮及凹陷的瘢痕等。鄭泉洲［19］在2008年，通過臨床觀察280例756個部位病例的自體脂肪移植效果，認為面部修復，尤其是面部凹陷修復，使用自體脂肪顆粒注射移植效果理想。

2.皮膚損傷愈合方面:通過建立的建立豬皮膚損傷模型，方利君等［20］于傷后3，7，14d觀察抽吸法脂肪治療和剪切法脂肪治療創面愈合情況。得出自體脂肪移植能提高局部皮膚愈合速度的結論，比較發現以剪切法效果更佳。自體微粒皮及脂肪混合移植被劉順利等［21］使用修復深度燒傷創面，得出混合移植自體脂肪顆粒及微粒皮能促進創面愈合，提高深度燒傷創面的愈合質量，改善關節功能的結論。

小 結

自體顆粒脂肪移植已較廣泛于臨床中使用。但臨床廣泛應用，受到了移植成活率低等原因的限制。隨著脂肪成活基礎研究的發展、對脂肪細胞的損傷因素的研究和促進血管生成藥物深入探索，一定程度上提高移植脂肪成活率，但對于脂肪移植各因素如何提高移植脂肪成活率達到最理想的效果仍存在爭議，仍無規范化指導。需要進行更深入的研究。目前針對脂肪干細胞的研究方興未艾。通過對促進移植脂肪細胞成活的各種生長因子、藥物的應用研究及脂肪干細胞組織工程學的深入探索，以及脂肪移植的相關實驗及臨床應用將給整形外科的發展帶來新的契機。

1 Illouz YG.The fat cell"graft":a new technique to fill depressions［J］.Plast Reconstr Surg.1986;78(1):122 －123.

2 戚可名，王雪，熊斌，等.脂肪顆粒注射移植的實驗研究與臨床應用［J］.中華整形燒傷外科雜志，1994，10(2):108 －110.

3 Ersek RA.Transplantation of purified autologous fat:a 3－year follow － up is disappointing［J］.Plast Reconstr Surg.1991;87(2):219－227.

4 Zuk PA，Zhu M，Mizuno H，et al.Multilineage cells from human adipose tissue:implications for cell－ based therapies［J］.Tissue Eng.2001;7(2):211 －228.

5 De Ugarte DA，Alfonso Z，Zuk PA，et al.Differential expression of stem cell mobilization－associated molecules on multi－lineage cells from adipose tissue and bone marrow［J］.Immunol Lett.2003;89(2－3):267－70.

6 Nakagami H，Morishita R，Maeda K，et al.Adipose tissue－derived stromal cells as a novel option for regenerative cell therapy［J］.JAtheroscler Thromb.2006;13(2):77－81.

7 Pu LL，Coleman SR，Cui X，et al.Autologous fat grafts harvested and refined by the Coleman technique:a comparative study［J］.Plast Reconstr Surg.2008;122(3):932 －937.

8 Xie Y，Zheng D，Li Q，et al.The effect of centrifugation on viability of fat grafts:an evaluation with the glucose transport test［J］.J Plast Reconstr Aesthet Surg.2010;63(3):482 －487.

9 MacRae JW，Tholpady SS，Ogle RC，et al.Ex vivo fat graft preservation:effects and implications of cryopreservation［J］.Ann Plast Surg.2004;52(3):281－282.

10 Ullmann Y，Shoshani O，Fodor L，et a1.Long－term fat preservation［J］.J Drugs Dermatol.2004;3(3):266 －269.

11 Atik B，Oztürk G，Erdo?an E，et al.Comparison of techniques for long － term storage of fat grafts:an experimental study［J］.Plast Reconstr Surg.2006;118(7):1533 －1537.

12 Erdim M，Tezel E，Numanoglu A，et al.The effects of the size of liposuction cannula on adipocyte survival and the optimum temperature for fat graft storage:an experimental study［J］.J Plast Reconstr Aesthet Surg.2009;62(9):1210 －1214.

13 劉宇蘭，張一鳴，聶祝峰，等.重組人VEGF基因治療提高游離顆粒脂肪移植存活率的實驗研究［J］.中國美容醫學，2005，14(3):271－274.

14 郭杰，馬樂，鄭大偉.血管生成素－1對移植顆粒脂肪新生血管的實驗研究［J］.中華整形外科雜志，2006，22(4):317 －318.

15 杜學亮，羅少軍，郝新光，等.堿性成纖維細胞生長因子在顆粒脂肪移植后血運重建過程中的作用［J］.中華整形外科雜志，2005，21(2):128 －131.

16 王友彬，趙敏，戚可名，等.瘦素促進移植顆粒脂肪組織血管增生的實驗研究［J］.中華醫學美學美容雜志，2004，10(1):34－36.

17 Ogawa R.The importance of adipose－derived stem cells and vascularized tissue regeneration in the field of tissue transplantation［J］.Curr Stem Cell Res Ther.2006;1(1):13 －20.

18 Ellenbogen R.Free autogenous pearl fat grafts in the face－ －a preliminary report of a rediscovered technique［J］.Ann Plast Surg.1986;16(3):179－194.

19 鄭泉洲.自體脂肪顆粒注射移植美容術臨床觀察［J］.中國美容醫學，2008，17(3):337 －339.

20 方利君，管新明，王秋旭.不同取材方法自體脂肪移植對皮膚損傷愈合影響的初步研究［J］.中國美容整形外科雜志，2009，20(4):232－235.

21 劉順利，彭毅志，李曉魯，等.自體脂肪顆粒及微粒皮混合移植修復燒傷患者深度創面［J］.中華燒傷雜志，2008，24(2):122－125.