黃芪多糖注射液中非法添加解熱鎮(zhèn)痛類藥檢查方法應用

孔曉鋒 古麗曼 木尼熱 盧 琳

(新疆獸藥飼料監(jiān)察所，新疆烏魯木齊830063)

黃芪多糖注射液，又稱抗病毒Ⅰ號注射液，具有誘導機體產生干擾素，調節(jié)機體免疫功能，促進抗體形成。用于雞傳染性法氏囊等病毒性疾病。現部分獸藥生產企業(yè)，為了提高藥物療效，非法添加解熱鎮(zhèn)痛類藥，致使用戶在不知情的情況下使用了這些產品，從而導致藥物在動物源性食品殘留，嚴重影響動物產品質量安全，進而危害人體健康，該試驗采用HPLC法，對黃芪多糖注射液中非法添加解熱鎮(zhèn)痛類藥，提供了檢查方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀：Agilent 1100型，配二極管陣列檢測器（DAD），美國安捷倫公司生產；電子天平：XS 105型，梅特勒－托利多公司生產；酸度計：FE 20型，梅特勒－托利多公司生產。

1.2 對照品

對乙酰氨基酚、安乃近、安替比林、氨基比林對照品，含量均為100%，由中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供。

1.3 試劑

甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純，水為超純水。

1.4 供試品

取黃芪多糖提取物（中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供）2.5 g，加純化水100 ml，即得含黃芪多糖以葡萄糖計，每 10 ml約 0.1 g。

2 色譜條件

色譜柱：Diamonsil（鉆石）C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鈉 6.0 g,加水100 ml使溶解，加三乙胺1 ml，用氫氧化鈉溶液調pH值至 7.0)－甲醇(65：35),流速：1.0 ml/min；檢測器：二極管陣列檢測器(DAD),波長范圍190～400 nm,記錄229 nm波長處的色譜圖。對乙酰氨基酚、安乃近、安替比林、氨基比林的分離度應符合規(guī)定。

3 方法與結果

3.1 對照品溶液

分別精密稱取安乃近對照品30mg，氨基比林、安替比林、對乙酰氨基酚對照品各12.5mg于25 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取上述溶液5 ml于25 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。

3.2 供試品溶液

取供試品溶液1 ml，加甲醇稀釋500倍。

3.3 測定

取上述對照品溶液和供試品溶液各10 μl,分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖及光譜圖。圖1 A為對照品色譜圖,圖1 B為供試品色譜圖,其中峰1為對乙酰氨基酚、峰2為安乃近、峰3為安替比林、峰4為氨基比林。

3.4 精密度試驗

精密吸取上述混合對照品溶液10 μl，連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖，以峰面積計算，結果見表1，表明儀器對多組分進行測定的精密度良好。

3.5 加標回收試驗

圖1 對照品、供試品、空白溶液色譜

表1 精密度試驗結果

按80%、100%、120%添加量，分別精密稱取安乃近、氨基比林、安替比林、對乙酰氨基酚對照品，分別添加黃芪多糖注射液 0.1、0.2、0.2、0.2 ml，用甲醇作溶媒定容至25 ml量瓶，每個濃度分別制備3份平行樣，每份樣品至少進樣2次，按3.3節(jié)方法測定，計算回收率，結果見表2。

3.6 檢測限試驗

檢測限溶液：取對照品工作液適量（2 ml或1 ml或0.5 ml），加黃芪多糖儲備液（取黃芪多糖注射液0.7 ml，加甲醇至 25 ml量瓶，搖勻）5 ml于 25 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取5 ml于25 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

取黃芪多糖空白溶液(取黃芪多糖儲備液5 ml于25 ml量瓶中，搖勻)、檢測限溶液各 10 μl,按 3.3 節(jié)方法進行測定，報告黃芪多糖空白溶液圖譜（見圖1 C）及測試藥物檢測限溶液光譜失真的濃度及圖譜，檢測限結果為4 μg/ml。

表2 回收率試驗結果

4 結論

本文采用HPLC法，可快速、準確地檢查黃芪多糖注射液中非法添加的解熱鎮(zhèn)痛類藥，對更好地控制產品質量，提供了檢測依據，具有一定的實用意義。

[1]中國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典二○一○年版一部[S].

[2]中國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典獸藥使用指南二○一○年版[S].