宋士剛 楊在賓 楊維仁 姜淑珍 張桂國 魏建東
(1.東營市華譽飼料有限公司,山東廣饒257300;2.山東農業大學動物科技學院,山東泰安271018)
隨著畜牧業的發展,抗生素在畜禽養殖中得到越來越普遍的應用,其抑菌促生長的功效得到廣泛的認可,但是抗生素在動物機體中的殘留也逐漸得到社會的關注,因此尋找可以代替抗生素且能達到與抗生素相近效果的添加劑成為研究的熱點。這類添加劑的種類繁多,有抗菌肽類、植物提取物類等,本研究以抗菌肽為試驗材料,旨在研究抗菌肽對肉雞生產性能及抑菌功效影響的研究,為抗菌肽在肉雞養殖中的應用提供依據。
抗菌肽由上海邦成生物有限公司提供;抗生素為10%硫酸黏桿菌素。
選取1日齡健康AA肉仔雞480只,隨機分為6個處理(每個處理4個重復,每個重復20只)。本試驗分6個處理研究不同添加水平的抗菌肽對肉仔雞應用功效的影響。處理1為對照組(control,無抗生素和抗菌肽);處理2為抗生素對照組(control+CS),即處理1基礎上添加20mg/kg硫酸黏桿菌素(CS);處理3~6為試驗處理組,在處理1基礎上分別添加抗菌肽250、500、1 000、2 000mg/kg(即:control+250mg/kg AP,con?trol+500mg/kg AP,control+1 000mg/kg AP,control+2 000mg/kg AP)。肉雞分兩個飼養期,即1~21日齡和22~42日齡。日糧參照中華人民共和國肉雞飼養標準(NY/T 33—2004)和AA肉雞推薦飼養標準設計(見表1)。

表1 試驗日糧組成及營養水平(%)
肉雞在山東農業大學肉雞試驗雞舍進行飼養,自由飲水和采食。第一周溫度保持在32℃,之后每周逐漸降低3℃,直至降至26℃為止。另外第一周保持連續光照,之后每6 h停止光照0.5 h。
在肉仔雞21和42日齡時,從每個重復中抽取2只與平均體重相近的肉雞進行屠宰試驗。先稱重記錄宰前活重,將試驗雞宰殺,分離胸肌、腿肌;同時將盲腸端口用細線結扎,用鋁箔紙包好后放于0℃恒溫箱保存以待后續測定。
1.3.1 生產性能
在肉雞0、21和42日齡時,稱每個重復肉雞重;每周記錄每個重復采食量,從而計算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(FCR)。
1.3.2 屠宰性能
21和42日齡進行屠宰試驗時,屠體重為肉雞放血去除羽毛后的重量;半凈膛重為肉雞屠體重去氣管、食道、嗉囊、腸、脾、胰、膽和生殖器官。保留心、肝、腎、腺胃、肌胃(去角質膜和內容物)、腹部板油、肌胃周圍的脂肪和肺、腎的重量;全凈膛重為肉雞半凈膛重去除心、肝、腺胃、肌胃、脂肪及頭、腳的重量。其中全凈膛率、胸肌率和腿肌率的計算公式如下:

1.3.3 微生物指標
在肉雞21和42日齡屠宰試驗中分別取盲腸并結扎盲腸末端后厭氧保存。在無菌條件下將盲腸用手術刀片刮破盲腸,稱取其內容物后置入裝有玻璃珠的100 ml滅菌生理鹽水的三角瓶中,振蕩20 min后進行微生物的測定。測定前做測定細菌總數(好氧菌)、乳酸菌和大腸桿菌的預試驗,確定最佳稀釋倍數。
細菌總數(好氧菌)用營養瓊脂(海博生物科技,HBPM002)測定。將培養基傾入90 mm培養皿中,37℃預培養24 h,吸取0.1 ml菌液稀釋液滴注在預培養的空白培養基上,重復3次。37℃培養24 h,計數培養皿的菌落數。
乳酸菌數用MRS培養基(海博生物科技,HBPM 0384)測定。吸取0.1 ml菌液稀釋液注入空培養皿中,然后50℃左右的MRS培養基,搖勻、冷卻后倒置培養,重復3次。37℃培養48 h,計數培養皿的菌落數。
大腸桿菌選擇麥康凱瓊脂培養基(海博生物科技,HBPM016)測定。將培養基傾入90 mm培養皿中,37℃預培養24 h,吸取0.1 ml菌液稀釋液滴注在預培養的空白培養基上,重復3次。37℃培養24 h,計數培養皿的菌落數。
數據處理采用EXCEL和SAS9.1軟件進行統計學處理,方差分析使用One-way ANOVA,顯著性水平P<0.05。

表2 抗菌肽對肉雞生產性能的影響
由表2可知,日糧中添加粘菌素和抗菌肽能夠提高肉仔雞出欄體重、進食量,降低料重比。當日糧中添加抗生素、1 000和2 000mg/kg抗菌肽時,肉雞的ADG高于對照組(P<0.05,1~21、22~42、1~42 d),且添加2 000mg/kg抗菌肽時肉雞ADG高于抗生素對照組(P<0.05,1~21 d);日糧中添加2 000mg/kg抗菌肽時,肉雞的ADFI高于對照組(P<0.05,1~21、22~42、1~42 d),而與抗生素對照組差異不顯著;日糧中添加2 000mg/kg降低肉雞1~21 d階段的FCR(P<0.05),在22~42 d和1~42 d時分別添加250、500mg/kg和250、500、1 000mg/kg降低肉雞的FCR(P<0.05)。

表3 抗菌肽對肉雞屠宰性能的影響(%)
由表3可知,添加抗生素和抗菌肽可以影響肉雞屠宰性能。21 d時日糧中添加500mg/kg抗菌肽提高肉雞的腿肌率(P<0.05);42日齡肉雞屠宰時,添加抗菌肽和抗生素可以提高肉雞的全凈膛率(P<0.05);其余添加劑量沒有顯著差異,同時添加抗菌肽1 000、2 000mg/kg與添加抗生素相比可以提高肉雞的腿肌率。

表4 抗菌肽對肉雞盲腸微生物的影響(lg CFU/g)
對表4中盲腸微生物數據分析表明,添加抗菌肽2 000mg/kg和抗生素可以降低肉雞盲腸中好氧菌總數(P<0.05,21、42 d),添加1 000和2 000mg/kg抗菌肽可以降低肉雞盲腸中大腸桿菌數量(P<0.05,21、42 d),其余添加劑量沒有顯著減低好養菌總數及大腸桿菌數量,另外添加抗菌肽和抗生素可以增加乳酸菌數量但是差異不顯著。
解決抗生素類藥物殘留的有效途徑是研發替代物,抗菌肽作為飼料添加劑有著較好的前景。有研究結果證實,豬小腸抗菌肽有增加肉雞增重和降低料重比的效果,可提高雛雞生長速度和飼料轉化率;陳曉生(2005)研究報道顯示,用抗菌肽制劑作為肉鴨飼料添加劑,可有效提高肉鴨生產性能;同時,抗菌肽飼喂肉仔雞可以促進生長,與中草藥對比,在平均體重、飼料效率方面效果相當(黃永彤等,2004)。
本研究表明,日糧中添加抗菌肽和黏桿菌素可顯著提高肉雞ADG和ADFI,降低FCR,其中日糧添加抗菌肽2 000mg/kg時肉雞生產性能綜合表現最佳。其中添加低水平抗菌肽時肉雞FCR與對照組相比差異顯著,而添加高水平時差異不顯著,這可能與添加高水平抗菌肽顯著改善肉雞ADG和ADFI有關。由此可見,添加抗菌肽是通過提高肉雞ADG和ADFI而不影響FCR來達到改善肉雞生產性能的。
全凈膛率、胸肌率和腿肌率是衡量家禽產肉性能的主要指標。屈賢銘等(1989)研究表明,蠶抗菌肽可以對脂質體產生顯著影響。宋小珍等(2005)研究表明,抗菌肽、糖萜素等可在肉仔雞生產中替代抗生素的使用,并提高肉仔雞的產肉性能。本研究結果表明,21日齡時,日糧添加500mg/kg抗菌肽與對照組相比顯著提高肉仔雞腿肌率;42日齡時,添加不同梯度的抗菌肽和黏桿菌素均能顯著提高肉仔雞全凈膛率;這與上述研究結果一致,在肉雞生產中達到較好的屠宰性能。
動物機體內有建立一套平衡的微生態菌群共生系統和維持體內菌群穩態的機制。張熠(2006)研究表明,在日糧中添加外源性抗菌肽能抑制病原菌而對腸道正常菌群和機體細胞則無殺傷作用。馬為明(2004)研究結果顯示,抗菌肽和抗生素有極為相似的作用,系統研究抗菌肽、腸道微生物和動物免疫過程之間的關系可能是揭示抗菌肽促生長機理的關鍵。本研究結果表明,添加抗菌肽可以顯著降低肉雞盲腸中有害菌群數量,增加乳酸菌數量,與上述研究一致。由此可見抗菌肽可以改善腸道菌群微環境,減少有害菌群對腸道的損壞,降低對腸道消化吸收的影響,進而減少營養物質的浪費及降低腹瀉率;維持腸道菌群平衡及腸道健康,更有利于腸道營養物質的吸收,以達到改善肉雞生產性能的功效。
本試驗中添加1 000mg/kg抗菌肽時對肉雞生產性能、屠宰性能和盲腸微生物存在改善趨勢,當添加2 000mg/kg抗菌肽時與對照組相比差異顯著,而與抗生素對照組差異不顯著,由此可見當添加抗菌肽2 000mg/kg時可以取得最佳的生物功效。
[1]陳曉生,溫劉發,張輝華,等.飼料中添加抗菌肽對肉鴨生產性能及免疫器官、內臟器官的影響[J].畜禽業,2005,2:12-13.
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