葉麗敏1,許元科1,劉 寧2,劉衛榮1
景寧3個野生靈芝菌株的評比試驗
葉麗敏,許元科,劉 寧,劉衛榮
(1. 浙江省景寧畬族自治縣林業局,浙江 景寧 323500;2. 浙江博士園生物技術有限公司,浙江 景寧 323500)
對采自景寧畬族自治縣的BL09、BL11、BL12三個野生靈芝菌株與當前景寧畬族自治縣主栽品種韓芝進行子實體、生物學效率比較,結果表明,4個菌株在母種培養基上,BL09、BL11、BL12之間生長速度差異不顯著,而韓芝生長較慢,并與其它菌株存在極顯著的差異;BL09和BL11菌絲生長濃密潔白,氣生菌絲量大,菌絲邊緣整齊,BL12和韓芝則相對較差;4個菌株在原種培養基上的生長速度,BL09和BL11之間差異不顯著,BL09、BL11與BL12、韓芝之間存在極顯著差異,BL12和韓芝之間差異不顯著;菌蓋大小為BL09 > BL11 > BL12 > 韓芝,產孢量大小為BL09 > BL11 > 韓芝 > BL12;BL09和BL11產量較高,它們與韓芝和BL12之間存在顯著差異,BL12產量最低,評比結果表明,BL09無論在菌絲生長方面還是在子實體生長方面,均優于其它菌株,都表現出良好的長式,是較適宜于景寧生產推廣的優良菌株。
靈芝;野生菌株;品比試驗;初報
靈芝()屬擔子菌綱多孔菌目多孔菌科靈芝屬,是一種名貴的藥用真菌,在我國已有2 000多年的藥用歷史。《神農本草經》、《本草綱目》等醫藥著作中記載靈芝有扶正固本、滋補、健腦、強壯、消炎、利尿等功效。經臨床實驗證明,靈芝有調節免疫、抗腫瘤、抗癌和預防艾滋病的作用。靈芝的藥理活性與靈芝中含有豐富的有機鍺、各種礦物質、高分子多糖、三萜類化合物、甾醇等活性成份有關。景寧畬族自治縣土壤肥沃,水、氣、溫等氣候條件十分適宜靈芝的栽培,靈芝栽培種植的優勢突出,靈芝野生資源較為豐富。為篩選出適合景寧當地栽培推廣的優良菌株,特對采自景寧畬族自治縣的L09、BL11、BL12三個野生靈芝菌株與當前景寧畬族自治縣主栽品種韓芝進行比較試驗。
1.1 供試菌株
BL09、BL11、BL12自景寧畬族自治縣鶴溪鎮、渤海鎮、草魚塘林場等地野生靈芝菌株分離而得,韓芝來自浙江博士園生物技術有限公司,為目前景寧縣普遍采用的靈芝栽培菌種。
1.2 培養基配方
母種培養基:馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀3 g、硫酸鎂1.5 g、維生素B110 g、瓊脂20 g。
原種培養基:木屑78%,麥麩20%,石膏1%,白砂糖1%。
栽培料配方:木屑78%,麥麩20%,石膏1%,白砂糖1%或采用段木培養基。
1.3 母種制作
稱取200 g去皮馬鈴薯,切成薄片,沖洗,放入水1 100 ~ 1 200 mL燒煮,水開后再煮15 min,以馬鈴薯酥而不爛為度,用8層紗布過濾取濾液。如濾液不足1 000 mL則補足,然后加入瓊脂,燒至瓊脂完全融化,再用4 ~ 6層紗布過濾。在濾液中加入葡萄糖等,充分攪拌,使葡萄糖迅速融化,趁熱分裝試管。用吊桶或漏斗分裝,將3種培養基分別裝入18 mm×180 mm試管中。裝入量為試管高度的1/5 ~ 1/4。注意培養基不要沾著試管口,塞上硅膠塞,包扎成捆,裝入高壓滅菌鍋內,壓力升至0.12 kPa,保持30 min,待壓力表指針降至0后,打開鍋蓋,取出試管后斜放。在超凈工作臺內定量接入平板尖端菌絲,每個菌株接20支,25℃恒溫培養。
1.4 原種制作
木屑78%,麥麩20%,石膏1%,蔗糖1%混勻,按料:水 = 1:1.5加水拌勻后裝入30 cm×15 cm×0.05 cm,每瓶裝折合干料0.25 kg,用塑料環套口,121℃滅菌1.5 h,冷卻后在超凈工作臺內定量接入平板尖端菌絲,每個菌株接20袋,25℃恒溫培養。
1.5 栽培方法
拌料同原種,拌好后分裝到55 cm×15 cm×0.05 cm的聚乙烯塑料袋中,每袋裝折合干料0.75 kg,121℃滅菌2 h,自然冷卻后在超凈工作臺內定量接入原種,每個菌株接20袋,25℃恒溫培養。菌絲滿袋后移入塑料大棚,菌袋脫去袋膜進行覆土栽培,菌棒間留3 ~ 5 cm間隙,用含腐殖質的園田土填實,澆透水后覆3 cm細土,出芝期溫度控制在25 ~ 28℃并保持空間濕度在80% ~ 90%,定期通風。
1.6 試驗結果觀測
母種萌發后每天劃線、測量并記錄菌絲生長速度,記錄菌絲長滿試管的時間以及菌絲的濃密程度、氣生菌絲量等情況。原種待菌絲長到瓶肩部時開始沿菌絲生長邊緣劃線,測量并記錄菌絲生長速度、滿瓶時間以及菌絲的濃密程度等。栽培中觀察記錄原基形成時間、采收時間、觀察子實體的生物學性狀,包括菌蓋顏色、菌蓋直徑、菌柄長度,并記錄每潮芝產量,計算生物學效率等數據,本試驗共出3潮靈芝。
2.1 不同菌株母種試驗結果
各菌株母種生長情況見表1。
由表1可見,4個菌株在母種培養基上菌絲的生長速度平均為6.2 mm/d,種間差異顯著性比較(q檢驗)結果顯示,BL09、BL11、BL12之間生長速度差異不顯著,而韓芝生長較慢并與其它菌株存在極顯著的差異。從菌絲生長的形態上看,BL09和BL11濃密潔白,氣生菌絲量大,菌絲邊緣整齊,BL12和韓芝則相對較差。

表1 各菌株母種生長情況
2.2 不同菌株原種試驗結果
各菌株原種生長情況見表2。

表2 各菌株原種生長情況
由表2可見,4個菌株在原種培養基上的生長速度平均為5.8 mm/d,種間差異顯著性比較(q檢驗)結果顯示,BL09和BL11之間差異不顯著,BL09、BL11與BL12、韓芝之間存在極顯著差異,BL12和韓芝之間差異不顯著。
2.3 菌株栽培試驗結果
2.3.1 不同菌株子實體生物學性狀比較 由表3可見,韓芝原基形成較早,BL12較晚且原基形成率較低。BL09和BL12為單生,BL11和韓芝為叢生;BL11和韓芝菌柄較長,BL09最短但較粗;菌蓋大小為BL09 > BL11 > BL12 > 韓芝,BL09和韓芝為圓形紫芝為腎形,除BL11號較薄外其它均較厚。子實體顏色BL12較深為紫色,其它為紅褐色和橙紅色,韓芝顏色最淺。從整體形狀來看,BL09、BL12和韓芝較規整,BL12形狀不規則趨光性較強。產孢量多少為BL09 > BL11 > 韓芝 > BL12。

表3 各菌株生物學形狀比較
2.3.2 不同菌株生物學效率比較 由表4可見,BL09和BL11產量較高二者之間無顯著差異,它們與韓芝和BL12存在顯著差異,BL12產量最低。

表4 各菌株產量比較
不同菌株生物學效率與菌絲生長速度和密度存在一定的相關性。4個菌株的綜合評比試驗表明,BL09無論在菌絲生長方面還是在子實體生長方面,均優于其它菌株,都表現出良好的長勢,菌絲潔白濃密,氣生菌絲量較多不易發生污染現象,原基出現較早,原基形成率高,菌蓋大、形狀好,菌柄粗壯,生物學效率高。BL11號菌柄彎曲,菌蓋不規則,適于做靈芝盆景。BL12菌絲生長速度慢,菌絲較細弱,栽培時有污染發生產量低,綜上所述BL09是較適宜于生產推廣的優良菌株。
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Variety Comparative Test of 3Strains in Jingning
YE Li-min,XU Yuan-ke,LIU Ning,LIU Wei-rong
()
Comparative tests were conducted on fruitbody and biological efficiency of three wild strains(BL09, BL11, BL12) ofand, the main cultivar in Jingning, Zhejiang province. The result showed that growth ofHG was the slowest and had great difference with the other tested 3 strains cultivated on stock culture. The growth of BL09 had not evident difference with that of BL11, similar as the relation of BL12 with HG, but the first two strains had great difference with the later two ones. The size of pileus was ordered by BL09>BL11>BL12>HG, and yield of conidia production by BL09>BL11>HG>BL12. The test demonstrated that BL09 had advantages of white and abundant mycelium, more aerial mycelium, earlier primordium growth with higher survival rate, larger pileus, etc. The test resulted that BL09 was the best in the tested strains in the views of mycelial and fruitbody growth, and recommended to be cultivated in Jingning.
; wild strain; variety comparative test
1001-3776(2012)04-0061-03
S567.31
B
2012-04-18;
2012-06-11
葉麗敏(1970-),女,浙江景寧人,工程師,從事林業生產與技術推廣工作。