TRH靜脈注射對兔周圍神經再生的促進作用觀察

王 磊，呂 剛，曹 陽，智曉東，于德水，范中凱，嚴 鵬，賈志強，劉 超

(1遼寧醫學院，遼寧錦州 121001;2遼寧醫學院第一附屬醫院)

周圍神經損傷臨床常見［1］。如何促使損傷的周圍神經功能恢復和神經再生達到術前水平，目前尚無確切、有效的方法［2，3］。促甲狀腺激素釋放激素(TRH)是由下丘腦合成和分泌的一種三肽［4］，具有使呼吸加深加快、血壓升高、中樞神經系統興奮等生理作用。2011年11月～2012年3月，本研究通過靜注TRH治療兔周圍神經損傷，觀察其促進周圍神經再生的效果。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及試劑 雄性健康新西蘭兔12只，清潔級，體質量4～4.5 kg。TRH由上海生物制品藥廠生產，劑型為粉末狀，500 μg/支。

1.2 坐骨神經損傷神經再生室模型的制作及分組12只新西蘭白兔腹腔麻醉后，俯臥位，無菌條件下分離右側坐骨神經，在距梨狀肌下緣0.5 cm處剪斷。取一段硅膠管，顯微鏡下用9-0無創尼龍線將神經遠近端外膜與硅膠管壁縫合，神經遠近端分別引入管中，保持斷端間隙5 mm。建立坐骨神經損傷神經再生室模型。12只動物隨機分為對照組和實驗組，各6只。對照組、實驗組分別于耳緣靜脈注射生理鹽水TRH 40 μg各40 mL，1次/d。1個月為1個療程，間隔1個月進行下個療程，共2個療程。

1.3 觀察指標 ①大體觀察:傷口組織的愈合狀態、有無肌肉萎縮、足底潰瘍、有無炎癥及周圍組織與神經粘連情況。②組織學觀察:術后4、12周，兩組分別取2只兔再生神經橫切干中段及橋接體遠端5 mm處的神經段。HE染色和Loyez蘇木素染色，觀察再生神經內部結構，并于1 000倍光鏡下記錄單位視野內的有髓纖維數。再分別取2只兔術側再生神經制作超薄切片，透射電鏡下觀察軸突和髓鞘等超微結構。③電生理檢查:術后4、12周每組各取2只動物在麻醉下行神經電生理檢查，用MEB-2200肌電圖/誘發電位儀檢測傷側坐骨神經傳導速度(MCV)以及復合肌肉動作電位波幅(MAP)。

1.4 統計學方法 采用SPSS11.5統計學軟件。數據以±s表示，組間比較采用方差分析。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組動物一般情況 動物傷口均一期愈合。用藥第6周，實驗組發生輕度足底潰瘍2只，余有局部紅腫，輕度厭食2只;對照組無厭食情況，3只輕度足底潰瘍，余均呈局部紅腫。

2.2 兩組有髓纖維生成情況 ①光鏡觀察結果:術后4周，兩組均有一定數量的有髓纖維及少量結締組織生長，實驗組一定數量再生纖維軸突及雪旺細胞，其排列規則、致密整齊、結構均勻;對照組則排列紊亂、稀疏，并可見淋巴細胞浸潤。術后12周，兩組有髓纖維數量均有所增加，實驗組橋接體中段及遠端均可見再生纖維排列規則、分布均勻、髓鞘較厚;對照組則數量較少，分布不均，髓鞘較薄。②電鏡觀察結果:術后4周實驗組再生纖維髓鞘規則，并可見增殖的雪旺細胞;對照組再生纖維髓鞘形態極不規則，排列紊亂。術后12周，實驗組再生纖維髓鞘形態規則、較厚、內表層完整;對照組則形態不規則、較薄、內表層部分解離。

2.3 兩組術后4、12周再生有髓纖維數比較 見表1。

表1 兩組術后4、12周再生有髓纖維數比較(±s)

表1 兩組術后4、12周再生有髓纖維數比較(±s)

注:與術后同一時間對照組相比，*P＜0.05

組別 再生有髓纖維(條)橋接體遠端 橋接體中段實驗組術后4 周 70.67 ± 6.34* 68.82 ± 5.89*術后12 周 113.47 ±12.03* 84.24 ± 5.91*對照組術后4 周 62.24 ± 8.31 59.36 ±10.21術后12周82.32 ±14.57 73.36 ± 4.47

2.4 兩組術后4、12周傷側坐骨神經MAP、MCV比較 見表2。

表2 兩組術后4、12周傷側坐骨神經MAP、MCV 比較( ±s)

表2 兩組術后4、12周傷側坐骨神經MAP、MCV 比較( ±s)

注:與術后同一時間對照組相比，*P＜0.05

組別 MAP(mV) MCV(m/s)實驗組術后4 周 4.30 ±2.13* 9.25 ±3.01*術后12 周 6.90 ±2.53* 16.82 ±2.94*對照組術后4 周 2.20 ±1.56 4.45 ±2.26術后12周2.51 ±2.31 5.26 ±2.21

3 討論

周圍神經損傷是骨科常見疾病，自體神經移植是常用的治療方法［5，6］，然而神經移植后再生速度非常慢，治療效果不理想。TRH可作用于機體很多器官和組織，對其生長、代謝和組織分化等方面有重要影響［7］。TRH的作用由其受體介導，而 TRH受體廣泛存在于于大腦、脊髓背角和腹角及外周神經等組織中。TRH對呼吸系統的作用主要表現為呼吸頻率增加、潮氣量稍減少、肺通氣量不變或略增加，微量TRH注入腦室或中樞核團內即可引起明顯的呼吸增快效應［8］。TRH對心血管中樞也有明顯的興奮作用，主要表現為血壓升高、心率加快［9］。有學者發現TRH在通過增加交感神經活動而引起外周血管收縮、血壓升高的同時，對腦血管產生擴張效應，增加腦血流量，并伴有腦代謝增加。但TRH的腦血管擴張作用只在腦血流量減少的情況下才出現，而對清醒動物在正常血壓情況下，對腦血管阻力無作用。TRH以神經遞質或神經調節物的形式作用于中樞神經，促進麻醉后意識和呼吸的恢復，增強乙酰膽堿誘發的興奮性反應，對脊髓運動神經元具有類似谷氨酸的興奮性作用［8，9］。由此認為，TRH可能是腦內一種內源性興奮性物質，并在脊髓運動功能中起重要的調節作用［10］。

本研究發現，實驗兔靜注TRH后4、12周，實驗組再生纖維排列規整、結構均勻，髓鞘厚，數量多，明顯優于對照組。電生理檢查結果顯示，實驗組損傷側坐骨神經的MAP、MCV均優于對照組，說明靜注TRH能夠有效促進周圍神經的再生。

本研究中實驗組一次靜注的TRH劑量為40 μg，動物均未出現甲亢的癥狀。用TRH治療外周神經損傷時應掌握適當的治療劑量，這仍需進一步研究。有學者［11］曾用TRH治療神經系統疾病，取得肯定的療效，且沒有甲亢和心功能障礙發生，這表明TRH有希望在合適濃度及劑量下安全應用于人體。本研究為臨床應用TRH靜注治療外周神經損傷患者打下了理論基礎。

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