周銀麗,胡先奇,薛春麗,白建波,王 黎
(1.紅河學院農學系,云南蒙自661100;2.云南農業大學植物病理重點實驗室,云南昆明650201)
水稻潛根線蟲(Hirschmanniella spp.)是水稻的主要寄生線蟲,也是引起中國水稻潛根線蟲病的重要線蟲。水稻潛根線蟲侵染水稻根部,輕則影響水稻的生長發育,重則直接導致減產。據報道,全世界58%的水稻田遭受潛根線蟲的危害,造成25%的產量損失。潛根線蟲于1902年在印度尼西亞首先發現,1981年中國首次報道了水稻潛根線蟲,目前主要采用化學防治及綜合防治的方法進行防治。與傳統農藥相比,新型高效、無殘留、無公害的植物源農藥由于其有效成分為天然物質,施用后易分解為無毒物質,對環境無污染,對有益生物(即害蟲天敵)安全,可以大量種植等優點成為研究開發的熱點。近幾年,有些學者研究植物提取物對水稻潛根線蟲的防治作用。為找到更多能抑殺水稻潛根線蟲的植物源農藥,本實驗選用洋蔥、夾竹桃(花、葉)、細辛、煙葉、苦參、澤瀉6種天然植物,研究其提取液對水稻潛根線蟲的室內抑殺作用,為使用天然植物源農藥防治水稻潛根線蟲提供技術支撐。
供試植物為洋蔥、夾竹桃(花、葉)、細辛、煙葉、苦參、澤瀉,均采自蒙自地區,提取溶劑為0.05%鹽酸、0.05%氫氧化鈉、20%乙醇、無菌水。用貝曼淺盤法分離水稻潛根線蟲。
1.2.1 植物提取液制備
將收集到的植物經烘干(50℃,24 h)、用微型破碎機粉碎并過篩后,分別稱取6 g植物粉溶于50℃提取溶劑中,常溫振蕩(300 r/min,25℃),浸泡提取24 h后,用濾紙過濾提取液,并用相應的溶劑定容至100ml備用。
1.2.2 分離水稻潛根線蟲
用貝曼淺盤法分離水稻潛根線蟲。
1.2.3 殺水稻潛根線蟲活性評價
將獲得的各種植物提取液10 ml分別加入直徑為9 cm的培養皿中,挑取40~50條水稻潛根線蟲加入其中,置于室溫下,分別于24 h和48 h后用清水復蘇2 h檢查線蟲死亡數,每組處理4次重復,計算各處理的校正死亡率,并比較殺蟲效果。
水稻潛根線蟲在植物提取液中48 h平均死亡率為0~10.0%,測定結果用“-”表示;死亡率在10.1%~30.0%,測定結果用“+”表示;死亡率在30.1%~50.0%,測定結果用“++”表示;死亡率在50.1%~80.0%,測定結果用“+++”表示;死亡率在80.1%~100%,測定結果用“++++”表示。
線蟲死亡率(%)=死亡線蟲數/供試線蟲數×100
線蟲校正死亡率(%)=(處理組線蟲死亡率-對照組線蟲死亡率)/(1-對照組線蟲死亡率)×100。
洋蔥、細辛、煙草、澤瀉、苦參、夾竹桃(花、葉)無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性各項指標見表1。從表1可見,洋蔥無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性最強,處理24 h、48 h線蟲的校正死亡率分別為78.42%、88.23%;細辛、夾竹桃花、夾竹桃葉無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性較強,處理48 h線蟲的校正死亡率分別為75.79%、73.42%、71.24%;煙葉無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性中等,處理48 h線蟲的校正死亡率為47.15%;苦參、澤瀉無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性差,處理48 h線蟲的校正死亡率分別為26.64%、9.56%。
6種植物0.05%鹽酸提取液對水稻潛根線蟲的殺蟲效果見表1。從表1可見,細辛提取液殺水稻潛根線蟲活性最強,處理24 h、48 h線蟲的累計校正死亡率分別為91.64%、98.35%;洋蔥提取液殺水稻潛根線蟲活性次之,處理48 h后線蟲的校正死亡率為93.91%,表現出較強的毒殺作用;夾竹桃花提取液殺水稻潛根線蟲活性較強,處理48 h后線蟲的校正死亡率為79.89%;煙葉、夾竹桃葉提取液對水稻潛根線蟲有中等毒殺效果,處理48 h線蟲校正死亡率分別為43.78%、49.35%;苦參和澤瀉提取液的毒殺能力弱,處理48 h線蟲的校正死亡率分別為25.00%、16.56%。

表1 不同植物提取液殺水稻潛根線蟲活性評價

表2 不同植物提取液殺水稻潛根線蟲活性評價
從表2可見,洋蔥、細辛、夾竹桃花0.05%氫氧化鈉提取液殺水稻潛根線蟲能力較強,處理48 h線蟲的校正死亡率分別為86.15%、79.28%、76.56%;煙葉、夾竹桃葉、苦參提取液的殺水稻潛根線蟲活性次之,處理48 h線蟲的校正死亡率分別為46.47%、46.00%、33.91%;澤瀉提取液表現出弱的殺蟲能力,處理48 h線蟲的校正死亡率為13.92%。
從表2可見,夾竹桃花20%乙醇提取液殺水稻潛根線蟲活性能力最強,處理24 h、48 h線蟲的校正死亡率分別為83.24%、86.98%;洋蔥、夾竹桃葉、細辛提取液殺水稻潛根線蟲活性較強,處理48 h線蟲的校正死亡率分別為78.23%、77.45%、76.56%;煙葉和苦參提取液的毒殺能力中等,處理48 h線蟲的校正死亡率分別為42.89%、38.47%;澤瀉提取液殺水稻潛根線蟲活性較差,處理24 h、48 h線蟲的校正死亡率分別為3.34%、8.64%。
用細辛等6種植物的無菌水提取液處理水稻潛根線蟲,洋蔥提取液殺蟲活性強,細辛、夾竹桃(花、葉)提取液的殺線蟲活性次之,苦參和煙葉提取液殺蟲活性較差;而在0.05%鹽酸提取液中,細辛和洋蔥、夾竹桃花提取液均表現出較強的毒殺能力,除夾竹桃葉外,其余5種植物0.05%鹽酸提取液均比無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性強。
而6種植物0.05%氫氧化鈉提取液都具有一定的殺蟲效果,其中以洋蔥、細辛、夾竹桃花提取液殺水稻潛根線蟲能力較強,澤瀉提取液表現出較弱的毒殺能力。6種植物20%乙醇提取液中,夾竹桃花提取液殺線蟲活性最強,洋蔥、夾竹桃葉、細辛提取液具有較強的毒殺能力;煙葉和苦參提取液表現出中等的毒殺能力;澤瀉提取液殺線蟲的活性較差,說明不同植物選用不同提取液其殺線蟲活性也不同。
同一植物不同部位的提取液殺水稻潛根線蟲活性也不同,夾竹桃花20%乙醇提取液殺線蟲活性最強,無菌水提取液殺線蟲活性相對較弱;夾竹桃葉20%乙醇提取液殺線蟲活性相對較強,氫氧化鈉提取液殺線蟲活性較弱。從總體來看,花提取液毒殺水稻潛根線蟲效果比葉的好,說明植物不同部位含有的殺蟲成分及殺蟲物質可能不同。
實驗中發現,同一種植物,由于所選用的提取溶劑不同,其提取液殺線蟲活性也不同,其中變化較大的是夾竹桃葉,其0.05%氫氧化鈉提取液48 h的校正死亡率為46.00%,而乙醇提取液中48 h的校正死亡率為77.45%。由此說明,植物中不同有效成分溶于不同的提取溶劑中,在對植物進行殺蟲活性篩選時應有針對性地選用溶劑種類,這樣能減小植物中有效活性成分的漏選幾率。
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