滇重樓和南重樓的顯微結構研究*

王艷芳，唐 玲，李榮英，李 戈

(中國醫學科學院北京協和醫科大學藥用植物研究所云南分所，云南景洪 666100)

重樓為延齡草科 (Trilliaceae)重樓屬 (Paris)多年生宿根性直立草本植物。全世界該屬植物共有24種，我國有19個種，8個變種和若干變形，種類最多，主要分布在川滇地區［1－2］。滇重樓 Paris polyphylla.Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.－Mazz和南重樓 paris vietnamensis(Takhi.)H.Li均為延齡草科重樓屬蚤休組植物，二者在重樓野生變家種過程中被廣泛引種種植，其中滇重樓是2010年版《中國藥典》收載的重樓藥材基原植物之一;南重樓作為民間用藥，由于其旺盛的生物學特性和相似的藥用特性顯示了巨大的藥用前景。以往關于重樓生藥鑒別研究主要集中在重樓與其他易混淆藥材的鑒定方面，關于重樓屬內的種間鑒定較少，本實驗通過對滇重樓和南重樓植物顯微結構觀察，意在為重樓屬植物不同種間鑒別和其他深入研究提供依據。

1 儀器與材料

1.1 儀器

石蠟切片機，SMZ－1500 Nikon生物顯微鏡及成像系統，無水乙醇，95%乙醇，冰醋酸，甘油，甲醛，二甲苯 (以上試劑為國產分析純)，石蠟(熔點54～56℃)。

1.2 材料

滇重樓Paris polyphylla.Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.－Mazz 2010年10－12月份收集于云南省西雙版納州地區，南重樓paris vietnamensis(Takhi.)H.Li 2010年11月份收集于云南省文山縣馬關地區，二者均經本文通訊作者李戈鑒定，憑證植物栽植于云南省西雙版納州藥植所勐海基地。

1.3 實驗方法

利用石蠟切片技術，制作滇重樓和南重樓植物的根、根莖、莖、葉的橫切面片，并對其進行觀察、比較分析。

2 實驗結果

2.1 根莖橫切面

南重樓和滇重樓多年生根莖顯微結構相似，根莖橫切面從外到內依次為栓皮層、薄壁組織和散布在其中的排列不規則的維管束 (圖1)。栓皮層是表皮細胞被損傷后由其下的薄壁組織細胞分裂栓質化形成，具有保護作用 (圖2)。薄壁組織細胞個大、壁薄、內含豐富的營養物質，是儲存淀粉粒的主要部位，同時薄壁細胞中有針晶束分布 (圖2，3)。維管束在根莖中呈類圓形或不規則排列 (圖1)，其結構主要為周木型 (木質部在外，韌皮部在內)(圖4)，少有韌皮部和木質部呈交互排列(圖5)。另有兩個維管束連在一起，呈縱橫分布(圖6，7)。

2.2 不定根橫切面

滇重樓和南重樓的根橫切面均包括表皮層、皮層、內皮層、維管束4部分 (圖8)，其中表皮細胞1層，較皮層細胞小，不角質化，有的細胞外壁突出成根毛 (圖9)，表皮及根毛常損壞。皮層有薄壁細胞組成，細胞近圓形，排列整齊，近內皮層細胞較外側小。內皮層由一層長方形的細胞組成，徑向壁有帶狀加厚的凱氏帶。維管束由1層較小的長方形中柱鞘細胞及里面的維管組織組成，其中維管組織由木質部和韌皮部交互排列，木質部內側管狀細胞比外側大，管狀細胞由內向外漸次成熟。

2.3 莖橫切面

二者的莖橫切面由外向內依次為表皮、薄壁組織、維管束3部分，其中表皮層細胞外壁較厚，內有顯著的細胞核。薄壁組織細胞近圓形，外部近表皮層細胞較小，內部細胞較大。維管束兩輪，散在薄壁組織內，為外韌型維管束 (圖10，11)。

2.4 葉部橫切面及表皮特征

滇重樓和南重樓葉包括葉片和葉柄兩部分，葉片由表皮層、葉肉和葉脈3部分構成 (圖12)。其中葉腹面的表皮稱為上表皮，表皮細胞橫切面觀為長方形 (圖13)，縱面觀為不規則型，細胞排列緊密 (圖14)。背面為下表皮，表皮細胞橫切面觀為圓形或長方形 (圖13)，縱面觀為不規則型，具有大量氣孔 (圖15)。葉肉有柵欄組織和海綿組織組成;中脈呈“V”形，為外韌型維管束。葉柄包括表皮、薄壁組織、維管束3部分，其中維管束7～9個，外韌型，中間最大的維管束呈“W”形 (圖16，17)。

3 討論

通過切片實驗，作者發現滇重樓和南重樓植株，包括根、根莖、莖、葉的顯微結構相似［3］，根莖由栓皮層、薄壁組織和散布在其中的排列不規則的維管束組成，維管束結構主要為周木型。不定根包括表皮層、皮層、內皮層、維管束4部分，內皮層由一層長方形的細胞組成，徑向壁有帶狀加厚的凱氏帶，維管組織由木質部和韌皮部交互排列，木質部內側管狀細胞比外側大，管狀細胞由內向外漸次成熟。莖橫切面由外向內依次為表皮、薄壁組織、維管束3部分，維管束兩輪，為外韌型。滇重樓和南重樓葉包括葉片和葉柄兩部分，葉片為異面葉，葉肉有柵欄組織和海綿組織組成，下表皮具有大量氣孔。二者相似的顯微結構用于種間鑒定仍有一定難度，至于其中分布的維管束、淀粉粒及針晶束形態和數量等跟植株的生長年限、生長環境更加密切。作者建議今后重樓屬內相近種間植物需要借助于植物性狀和其他手段相結合鑒別，包括分子技術等其他方法從分子水平進行鑒定［4－5］。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典 ［M］.北京:化學工業出版社，2010:243.

［2］李恒，楊興華，梁漢興，等.重樓屬植物 ［M］.科學出版社，1998:69－79.

［3］李強.四川重樓屬植物資源顯微鑒別及花粉育性研究［D］.四川農業大學，2008:20－24.

［4］唐榮華，王麗，唐小為，等.十一種重樓屬植物的RAPD分析［J］.四川大學學報，2003，40(4):778－782.

［5］朱英杰，陳士林，姚 輝，等.重樓屬藥用植物DNA條形碼鑒定研究 ［J］.藥學學報，2010，45(3):376－382.