三七有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的氣相分析*

2012-07-26 02:30:02陳榮潔丁艷芬楊崇仁

云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào) 2012年4期

羅莉，陳榮潔，丁艷芬，楊崇仁，3△

(1.云南維和藥業(yè)股份有限公司，云南玉溪 653100;2.云南省植物提取物工程研究中心，云南玉溪 653100;3.中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所，云南昆明 650201)

三七［Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen］是我國(guó)名貴中藥材，也是云南重要的特色藥物植物資源［1］。三七有散瘀止血、消腫定痛的功效［2］，大量的藥理藥效及臨床研究表明三七有多方面的生理功能，已廣泛用于治療冠心病、心絞痛、腦血管后遺癥等疾?。?］。云南文山是三七道地產(chǎn)區(qū)［4］，歷史上曾在長(zhǎng)江以南省區(qū)引種［5］。隨著市場(chǎng)需求的增加，三七種植面積和種植區(qū)域不斷擴(kuò)大，2010年，云南省三七種植面積約12萬(wàn)畝，其中，5萬(wàn)多畝種植在文山州以外的地區(qū)。三七一般均需3年收獲，種植過(guò)程中各種病害嚴(yán)重，目前，大量使用各種農(nóng)藥甚至是禁用的劇毒農(nóng)藥，給臨床藥材應(yīng)用帶來(lái)極大風(fēng)險(xiǎn)。因此，開(kāi)展三七藥材農(nóng)藥分析檢測(cè)方法及使用情況分析，對(duì)三七產(chǎn)業(yè)健康持續(xù)發(fā)展意義重大。

本文建立了有機(jī)磷農(nóng)藥殘留［6］的多成分GCFPD分析方法［7］，對(duì)云南省不同產(chǎn)地的三七進(jìn)行分析和比較。

1 儀器、試劑與材料

1.1 儀器與試劑

儀器:Agilent 6890N氣相色譜儀，配有FPD檢測(cè)器。超純水系統(tǒng) (MILLIPORE)。

試藥試劑:分析純乙酸乙酯 (天津化工廠(chǎng))、無(wú)水硫酸鈉。

農(nóng)藥對(duì)照品:對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、樂(lè)果、氧化樂(lè)果、甲胺磷、久效磷、二嗪農(nóng)、乙硫磷、馬拉硫磷、殺撲磷、敵敵畏、乙酰甲胺磷 (農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所)。

1.2 測(cè)試植物樣品

3年生三七，地上部位;地下部位分為大根、主根、剪口，分別晾干，粉碎，待用。樣品分別采自云南省文山州、云南省紅河州彌勒縣和瀘西縣。鑒定人:楊崇仁教授。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 儀器及工作條件［8］

GC－FPD，GC:Agilent 6890N;色譜柱:HP－5 MS，30m×0.25mm×0.25μm，進(jìn)樣方式:分流進(jìn)樣;進(jìn)樣量1μL;進(jìn)樣口溫度230℃;檢測(cè)器溫度280℃;程序升溫:初始溫度80℃，10℃ min－1升至200℃，20℃ min－1升至250℃，保持10min。

2.2 對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備

取對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、樂(lè)果、氧化樂(lè)果、甲胺磷、久效磷、二嗪農(nóng)、乙硫磷、馬拉硫磷、殺撲磷、敵敵畏、乙酰甲胺磷等12種有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)照品適量，用乙酸乙酯分別制成每1mL約含100μg的溶液，即得。

2.3 混合對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備

精密量取上述各對(duì)照品儲(chǔ)備液1mL，置20mL棕色量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4 供試品溶液的制備

取本品粉末 (過(guò)二號(hào)篩)約5g，精密稱(chēng)定，加無(wú)水硫酸鈉5g，加入乙酸乙酯50～100mL，冰浴超聲處理3min，放置，取上層液濾過(guò)，藥渣加入乙酸乙酯30～50mL，冰浴處理2min，放置，濾過(guò)，合并兩次濾液，用少量乙酸乙酯洗滌濾紙及濾渣，與上述濾液合并。取濾液于40℃下減壓濃縮至近干，用乙酸乙酯轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，并稀釋至刻度，精密量取1mL，置活性炭小柱［120～40目，0.25g，內(nèi)徑 0.9cm(如 Supelclean ENVICarb SPE Tubes，3mL活性炭小柱)，用乙酸乙酯5mL預(yù)洗］上，置多功能真空樣品處理器上，用正己烷－乙酸乙酯 (1∶1)混合溶液5mL洗脫，收集洗脫液，置氮吹儀上濃縮至近干，精密加入乙酸乙酯1mL使溶解，即得。

2.5 測(cè)定法

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各1 μl，注入氣相色譜儀，測(cè)定，即得。

3 結(jié)果與討論

本項(xiàng)研究參照《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄IXQ農(nóng)藥殘留量測(cè)定法，建立了12種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量同時(shí)測(cè)定的方法 (表1)。理論板數(shù)按敵敵畏峰計(jì)算大于6000，相鄰色譜峰的分離度大于1.5。12種有機(jī)磷農(nóng)藥混合對(duì)照?qǐng)D譜如圖1。該法分離度高，重現(xiàn)性好，操作方便，不僅可作為三七等中藥材的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測(cè)定，也適于農(nóng)作物及其產(chǎn)品的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量檢測(cè)。

按本方法檢測(cè)的結(jié)果表明，從三七中檢出3種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，即二嗪農(nóng)、馬拉硫磷和對(duì)硫磷。在瀘西和彌勒的莖葉中檢測(cè)出二嗪農(nóng)，殘留量為0.13mg/kg;在文山大根中檢測(cè)出馬拉硫磷，殘留量為0.03mg/kg;在文山和瀘西的三七中均檢出對(duì)硫磷，且瀘西莖葉的殘留量高達(dá)0.58mg/kg(表2)。

農(nóng)藥殘留一般與施肥方式、農(nóng)藥性質(zhì)、施肥部位、天氣條件、環(huán)境條件相關(guān)，因此，各地三七的農(nóng)藥殘留有明顯的差異。

大部分中藥材在栽培過(guò)程中均需施用大量農(nóng)藥，但農(nóng)藥殘留在藥材中的監(jiān)管很少，這是個(gè)普遍問(wèn)題，因此，不僅是三七，所有栽培中藥材農(nóng)藥殘留監(jiān)管均需重視并制定相應(yīng)控制標(biāo)準(zhǔn) (日本肯定列表可作參考)。

目前，我國(guó)已制定了一些農(nóng)藥在部分農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥最大殘留限量 (MRL)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。其中規(guī)定二嗪農(nóng)允許殘留量最大的是在花生中不得過(guò)0.5mg/kg;馬拉硫磷允許殘留最大的是在原糧、大豆、葡萄中不得過(guò)8mg/kg;規(guī)定了在蔬菜、水果中不得使用對(duì)硫磷，允許殘留量最大的是在原糧、棉籽油中不得過(guò)0.1mg/kg;雖國(guó)家未規(guī)定上述3種農(nóng)藥在三七中的最大殘留量，但本文通過(guò)分析，瀘西莖葉的對(duì)硫磷殘留量高達(dá)0.58mg/kg，顯然，為了保證藥材的安全性，三七的農(nóng)藥殘留應(yīng)引起必要的重視。