DC/CIK細胞治療對腎功能的影響

安東建 柴 琴 湯 效 譚小浪 王偉明

長沙市中心醫院腫瘤科，湖南長沙 410004

癌癥是中國成年人死亡的主要原因[1]。目前，手術、化療、放療等抗癌手段未在療效和生存獲益方面取得突破性進展。然而，隨著對腫瘤發生機制的深入了解和現代生物技術的飛速發展，自體細胞免疫治療已成為癌癥治療的第4種重要手段，在腫瘤多學科綜合治療中起著不可或缺的作用[2]。DC/CIK細胞是與DC(Dendritic Cell，DC)共培養的 CIK細胞 (Cytokine Induced Killer cell，CIK)。DC/CIK細胞治療是目前臨床應用較多的自體細胞免疫療法。作為一種新的治療手段，對其不良反應的研究較少，特別對腎功能的影響罕有報道。該文總結該科2010年1月—2012年5月收集152例接受DC/CIK細胞治療的癌癥患者的腎功能資料，探討DC/CIK細胞治療對腎功能的影響，為臨床安全使用提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

經病理學或細胞學確診的晚期癌癥152例，男97例,女55例。年齡21～83歲,中位年齡60歲。肺癌63例，肝癌14例，結腸癌12例，直腸癌8例，乳腺癌9例，胰腺癌5例，卵巢癌5例，鼻咽癌5例，宮頸癌4例，胃癌4例，食管癌3例，腎癌3例，淋巴瘤3例，喉癌2例，惡性黑色素瘤2例，胸腺癌2例，膽囊癌2例，輸卵管癌1例，腹膜間皮瘤1例，腦膠質瘤1例，上頜竇癌1例，外耳道癌1例，膀胱癌1例。

1.2 方法

1.2.1 DC/CIK細胞培養與回輸 抽取患者外周靜脈血100 mL。隨后，經淋巴細胞分離液進一步分離單個核細胞，用生理鹽水洗滌3次,再將細胞分別進行DC及CIK細胞的培養。DC細胞在d 0天用含IL-4、TNF等細胞因子的培養基進行培養，隔天需半量換液，培養至第9天細胞成熟，再混入CIK細胞培養中，共同培養。

CIK細胞第0 d加入含IFN-γ、抗CD3單抗等的無血清生長培養基。24 h后加入含人重組IL-1、人重組IL-2等無血清生長培養基。 每2～3 d更換培養基1次,補加IL-2。培養至第9天時加入DC細胞共同培養。第11天時進行細菌、霉菌等微生物培養檢測。第14天時收集DC/CIK細胞,將收集培養的細胞用無菌生理鹽水洗滌3次,細胞分成6袋，每袋分別加入5%人血白蛋白配成150 mL含細胞的懸液進行靜脈回輸。每天回輸1次,每次回輸細胞數量在1.5～2×109,連輸6次為1個療程,細胞總數在9～12×109之間。每個病人完成2個療程。

1.2.2 腎功能檢查 第1個療程DC/CIK細胞回輸之前，常規抽血做腎功能檢查。第2個療程DC/CIK細胞回輸之后，再抽血做腎功能檢查。依據前后2次腎功能檢查結果，進行對比分析和評估。腎功能檢查項目為：尿素（正常值1.7～8.3 mmol/L）、肌酐(正常值 44～97 μmol/L）、尿酸(正常值 142～420 μmol/L）。

1.2.3 評價標準 腎功能檢查結果按WHO抗癌藥物毒性反應分度標準，進行分級和評估。

2 結果

152 例患者在接受DC/CIK細胞治療前，腎功能正常。在完成2個療程的DC/CIK細胞治療后，有12例出現腎功能異常，發生率為7.9%，如表1所示。

表1 腎臟毒性反應

3 討論

DC細胞是目前已知的功能最強的抗原提呈細胞，具有極強的刺激活化初始T淋巴細胞能力，介導Thl型細胞免疫，從而發揮對腫瘤細胞的殺傷作用[3-4]。CIK細胞是將人外周血單個核細胞在體外用多種細胞因子共同培養一段時間后獲得的一群異質細胞[5],具有T淋巴細胞強大的抗瘤活性和非主要組織相容性復合體(MHC)限制性殺瘤的特點[6-7]。DC/CIK細胞是與DC共培養的CIK細胞，具有增殖速度快、抗腫瘤作用強大、殺瘤譜廣、安全性較高的特性[8-9]。

腎臟的基本功能是排泄體內的代謝廢物。隨著人口老化的加劇，腎臟急性損害的發生逐漸增多[10]。腎小球是腎臟的基本功能單位，具有濾過血漿形成原尿，輔助排泄代謝產物（例如含氮類廢物尿素、肌酸、肌酐、尿酸、各種胺類等）及維持體液酸堿平衡等作用，腎小球濾過功能是否正常對預防腎臟疾病至關重要[11]。

DC/CIK細胞治療腫瘤有一定療效，臨床應用已有多年。然而，對其毒副作用的研究較少，如何確保臨床安全使用，還應開展進一步的研究工作。該研究發現，單純使用DC/CIK細胞治療腫瘤，大約7.9%的患者發生急性腎功能損害，雖然絕大多數為I度損害，患者無明顯的臨床表現，經對癥處理后，本組也無一例發生腎功能衰竭。但是，如果不給予高度重視，不能早期發現，早期處理，仍有可能導致嚴重后果。本組病例發生急性腎功能損害的原因比較復雜，可能與以下因素有關：①本組病例均為晚期癌癥患者，一般狀況較差，每日進食量和飲水相對較少。②年齡偏大，多數在60歲以上。③DC/CIK細胞輸入人體后，短時間內大量殺傷腫瘤細胞，腫瘤細胞釋放大量核酸，導致高尿酸血癥。尿酸沉積于腎小管，引起急性腎功能損害[12]。④部分患者會出現癌性惡病質，其發生的重要機制之一就是蛋白質代謝異常，主要表現為骨骼肌蛋白消耗增加、瘦組織群下降、內臟蛋白消耗，導致蛋白質合成減少而分解增加，血清尿素、血肌酐升高，形成氮質血癥，損害腎功能[13-14]。⑤DC/CIK細胞在培養時，需加入一定量的白細胞介素-2。文獻報道，白細胞介素-2可引起如少尿、低血壓、血肌酐升高等毒性反應[15]。

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