陳致印,胡一鴻,金晨鐘,朱定萍,王 瓊
(1.湖南人文科技學院生命科學系,湖南 婁底 417000;2.平涼市產品質量監督檢驗所,甘肅 平涼 744000)
膳食纖維是人體平衡膳食結構的必需營養素之一,不能被人體內消化酶分解和吸收,稱為“第七營養素”,對人體具有重要的生理功能[1-2],如降低便秘、腸癌、肥胖癥、II型糖尿病和冠心病等慢性病的發生率。膳食纖維按其水溶性可分為不溶性膳食纖維(Insoluble dietary fiber,IDF)和可溶性膳食纖維(Soluble dietary fiber,SDF)兩類??扇苄陨攀忱w維在許多方面的生理功能比不溶性膳食纖維更強[3],其應用范圍更為廣泛。因此,可溶性膳食纖維的制備具有特別重要的意義。
香芋(Eolocasia esculenta schott)屬天南星科芋屬,為多年生單子宿根性草本植物,是熱帶亞太地區重要塊莖類作物之一[4]。香芋引進我國種植已久[5],資源極為豐富,營養物質含量也高。香芋除了富含蛋白質、鈣、磷、鐵、鉀、鎂、鈉、胡蘿卜素、煙酸、B族維生素、皂角等多種成分外,還含有大量可溶性膳食纖維成分,如黏液多糖、黏液皂素、堿性物質等成分,具有重要的生理功能[6]。多年來,人們對香芋的研究主要集中在栽培方面,有關其深加工研究報道很少,目前仍沒有對其可溶性膳食纖維提取方法的研究報道。本試驗以香芋為原料,探討提取其中水溶性膳食纖維的方法,以期為香芋資源的深度開發提供依據。
香芋(購于當地市場);纖維素酶(20 000 U/g)(山東棗莊杰諾生物酶有限公司);標準葡聚糖Dextran 2000(瑞典Phamrmacia公司);氫氧化鈉、鹽酸、無水乙醇、等藥品均為國產分析純。
F160型粉碎機(北京中興偉業儀器有限公司);R-201L旋轉蒸發儀(西安常儀儀器設備有限公司);PHBJ-260便攜式pH計(上海將來實驗設備有限公司);HH-8型恒溫水浴鍋(江蘇宏華儀器廠);GZX-DH.300-BS-II電熱恒溫干燥箱(上海躍進醫療器械廠);臺式離心機Thermo Scientific(Heraeus Megafuge 1.0 R)。
1.3.1 工藝流程 香芋→恒溫干燥(60℃)→粉碎→過篩(60目)→加水(香芋粉∶純凈水=1∶40)→調pH值→纖維素酶酶解→恒溫水解→高溫滅酶(90℃,10 min)→冷卻→離心分離→

1.3.2 提取率測定方法 可溶性膳食纖維烘干至恒重,稱取質量,其與干樣品重的比值即為提取率,計算公式為:

1.3.3 性能測定方法 持水力(Water holding capacity,WHC)測定:準確稱取250 mg過40目篩的樣品,放入離心管中,加入25 mL去離子水,振蕩后在室溫下靜置60 min。離心(15 min,3 000 g),除去上清液,稱重,換算成每克干樣品保持水的量(g/g干物質):

膨脹力(Swelling,SW)測定:稱取1.00 g過40目篩的樣品,放入20 mL的具塞刻度玻璃試管中,加入20 mL去離子水,振勻后在室溫(20℃)下放置16 h,觀察樣品在試管中的自由膨脹體積(mL)。按下面公式計算每克樣品的膨脹力(mL/g):

1.3.4 單因素試驗和正交設計試驗 分別選取水浴溫度,pH值,提取時間,以及酶用量先進行單因素試驗。根據單因素試驗結果,采用4因素3水平L9(34)設計(表1)進行正交試驗。

表1 試驗選取因素及水平
2.1.1 單因素試驗 圖1顯示,提取溫度在35~55℃時,可溶性膳食纖維提取率隨溫度的升高而升高;當提取溫度高于55℃時,可溶性膳食纖維提取率隨著溫度的升高而降低。這是由于可溶性膳食纖維主要成分為天然果膠和β-葡聚糖,如果膠、瓜爾豆膠、卡拉膠、黃原膠、甘露糖、葡聚糖、海藻酸鈉、真菌多糖等,提取溫度過高,會使其本身分子結構受到破壞,從而降低提取率[7]。因此,提取溫度控制在55℃左右較為適宜。
圖2顯示,隨著pH值的升高,可溶性膳食纖維提取率有所上升,至pH值為5.5達到最大,之后隨著pH值的升高提取率下降。這可能因為酶是一種特殊的蛋白質分子,其催化能力與pH值密切相關,當pH值超過酶活性的最佳范圍時,提取效率有所下降。
圖3顯示,可溶性膳食纖維提取率隨酶解時間延長而增加,但當酶解時間超過120 min后提取率增加的趨勢減緩。這可能是因為在提取過程中有效成分的濃度差是提取的推動力,在提取初期,濃度差大,提取速率快,產物增加得也快[8];隨著提取時間的延長,溶劑中有效成分濃度增大,與固相中的濃度差逐漸變小,推動力也就變小,所以提取率減緩,直至提取達到平衡,產物濃度也趨于恒定[8]。因此試驗選定最佳酶解時間為120 min。
圖4顯示,隨著酶濃度的增加,可溶性膳食纖維提取率逐漸增加,當酶濃度達到2.5%時其提取率最高,達33.4%;隨著酶濃度的進一步的增加得率反而減少??赡苁怯捎谙阌笾泻写罅坎蝗苄岳w維,酶濃度過低,不溶性纖維水解不完全,而酶濃度過高,使膳食纖維中可溶性纖維素等生理活性物質分解,造成提取率降低,所以纖維素酶的濃度以2.5%為最宜。

圖1 溫度對提取率的影響

圖2 pH值對提取率的影響

圖3 時間對提取率的影響

圖4 酶用量對提取率的影響
2.1.2 正交試驗 綜合考慮多因素相互作用對于香芋水溶性膳食纖維提取的影響,根據單因素的試驗結果,采用L9(34)正交設計對香芋水溶性膳食纖維提取的條件進行優化,重復2次,正交試驗結果見表2。

表2 正交設計與數據處理
根據極差分析,影響香芋水溶性膳食纖維得率的各因素主次關系依次為:水浴溫度(D)>pH值(B)>酶用量(A)>提取時間(C),水浴溫度影響最大,水浴時間影響最小,最優組合為A1B1C3D2,即酶用量為2.0%,pH值為4.5,水浴時間150 min,水浴溫度為55℃。這與正交試驗中的最高提取率組合A3B1C3D2水平不一致,故需要驗證試驗。兩次驗證試驗得到的水溶性膳食纖維提取率分別為39.86%和39.90%,高于正交試驗中的最高提取率組合A3B1C3D2,因此采用A1B1C3D2組合,水溶性膳食纖維提取率能達到39.88%。
研究水溶性膳食纖維物理特性,能夠判斷香芋纖維生理性能。在最佳提取工藝條件制備下,香芋可溶性膳食纖維的溶脹性為8.53±0.32 mL/g(n=3),明顯高于豆渣的溶脹性6.33 mL/g,說明香芋纖維在增加糞便體積、稀釋潛在致癌物方面的生理功能具有更明顯的優勢。香芋纖維持水力為4.24±0.26 g/g(n=3),低于大豆纖維 5.56 g/g[9],說明香芋纖維在增加水相體積,降低吸收速度和減少腸內吸收部位方面不及大豆纖維優越。
采用纖維素酶提取香芋中可溶性纖維,利用單因素試驗和正交試驗,對影響其提取結果的相關因素進行試驗和探討,通過極差分析和驗證試驗得出,提取香芋可溶性膳食纖維的最佳工藝為:酶用量為2.0%,pH值為4.5,水浴時間150 min,水浴溫度為55℃,可溶性膳食纖維提取率能達到39.88%。其提取率明顯高于豆渣纖維的提取率13.7%,也高于花生纖維的提取率6.98%[10]。這可能是由于香芋原料中淀粉含量相對較高,或者香芋纖維的提取工藝較為優越。
香芋纖維溶脹性為8.53±0.32 mL/g,高于豆渣;持水力為4.24±0.26 g/g,低于大豆纖維。這可能是由于香芋纖維黏多糖的黏度較差所致,可以通過添加蔗糖、明礬、硼砂和pH值改變其黏度[10],使其獲得更好的生理性能。
[1]Rodriguez R,Jimenez A,Fernandez-Bolanos J,et al.Dietary fiber from vegetable products as source of functional ingredients[J].Trends in Food Science and Technology,2006,17(1):3-15.
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