孕婦血型抗體效價檢測產前診斷的探討

劉傳喜 阮 崢 丁 旭

（吉林大學第四醫院，吉林 長春 130011）

新生兒溶血病在我國由于ABO血型及Rh血型不不合造成的新生兒溶血病（HND），前者較為常見。研究證實孕婦產前IgG抗-A（B）水平的高低與ABO HDN的發病率盡管沒有絕對的一致性，但有高度的相關性[1,2]。孕婦血清中的IgG類抗-A和抗-B的效價測定可以幫助預測和判斷HDN的發生和程度[3]。本人用微柱凝集技術（MGI）檢測孕婦血型Ig類血型抗體效價水平。

1 材料與方法

1.1 研究對象

來自2010年1月至2011年6月來我院婦科門診就診的O型孕婦共計248人，年齡24～38歲，孕期為12～38周，其中配偶A型116人，B型102人，AB型23人，孕婦RhD陰性7人，配偶RhD陽性。

1.2 試劑與儀器

0.8%ABO反定型紅細胞懸液和抗人球微柱凝膠卡（均長春博訊生物技術有限責任公司生產）批號：20091209、20101103；0.2mol/L 2-巰基乙醇（2ME）（上海血液生物醫藥責任有限公司）；TO-3A型血型血清學用離心機和FYQ免疫微柱孵育器（長春博研科學生物儀器有限責任公司）；電熱恒溫水箱（ 天津市泰斯特儀器有限公司）。

1.3 試驗方法

1.3.1 標本預處理

取200μL孕婦血清標本和200μL 0.2mol/L 2-巰基乙醇應用液充分混勻，試管加塞蓋置37℃水浴60min，充分裂解血清中IgM類抗體，吸經2-ME處理的血清用生理鹽水做倍比稀釋，稀釋度分別為1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512，留待進行平行試驗。

1.3.2 MGI

取微柱凝膠試劑卡做好標記在微孔內各加入50μL與孕婦配偶相同血型的0.8%標準紅細胞懸液，再依次加入上述處理的稀釋度為1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512的血清50μL，置專用孵育器內37℃孵育15min，再放入專用離心機離心5min（900轉/分，2min；1500轉/分，3min），結果判定以出現1+號凝集的最高稀釋度的倒數為抗體效價。

2 結 果

結果判定以出現1+號凝集的最高稀釋度的倒數為IgG抗-A（B）和抗-D的價效，IgG抗-A（B）價效≥64為異常，抗-D檢出者為陽性，未檢出者為陰性。

在所檢測的241例O型血孕婦中，配偶血型組合（O-A）、（O-B）、（O-AB）的例數116、102和23，抗體效價≥64有81例，異常檢出例占總數的33.6%（81/241）其中IgG抗-A測定有139，例效價≥64有36例，異常檢出占總抗-A的14.9%（36/241），IgG抗-B測定有125例，例效價≥64有45例18.67%（45/241）。結果見表1。其中19例gG抗-A（B）效價≥64，O型血孕婦所生新生兒作HDN血清學檢查，結果見表2。

表1 241例O型血孕婦血清IgG抗-A（B）效價與例數分布

表2 19例O型血孕婦血清中IgG抗-A（B）效價于HDN關系

3 討 論

新生兒溶血病（HDN）是指母嬰血型不合引起的同族免疫性溶血。有報道說ABO溶血病占新生兒溶血的85.3%，Rh溶血病占14.6%，MN溶血病占0.1%。ABO血型不合中約1/5發病，RhD血型不合者約1/20發病。本病主要是母嬰間血型不合而產生同族血型免疫反應的遺傳性疾病。其次是RH系統，胎兒由父母新方面遺傳來的顯性抗原恰為母親所缺少，此抗原侵入母體，產生免疫抗體，通過胎盤絨毛膜進入胎兒血循環與胎兒紅細胞凝集、使之破壞而出現溶血，引起貧血、水腫、脾腫大和生后短時間內出現進行性重度黃疸，甚至發生膽紅素腦病。常導致胎兒早期流產或新生兒貧血，甚至造成新生兒死亡等嚴重后果。已知的可發生新生兒溶血病的20多個血型系統200余個血型抗原中，以ABO系統最為常見，其次RH系統，每個血型系統在遺傳上都是獨立的，并按孟德爾法則遺傳。引起新生兒溶血病以的ABO系統為最多，次為Rh系統，ABO血型系統引起防新生兒溶血病的比例比RH系統多[1]。檢測母親血清中是否存在IgG性質抗-A（B）抗體及效價，就可對ABO系統HDN發生進行預測，ABO溶血病通常以母親為O型，子女為A型或B型的發病率為高[2]，所以IgG-A（B）水平的測定對胎兒溶血癥狀的減輕，新生兒HDN發病率的降低有著非常重要的意義。對待妊娠約20周的、ABO血型不合的孕婦，特別是存在原因不明的流產、早產、死胎等情況的，需要動態監測血型抗體效價，若母親的IgG-A（B）≥128，結果很可能是嬰兒已經受害，若IgG-A（B）≥512，幾乎98.1%發病[3]。表2結果表明新生兒HCN發病率與母體內的IgG 血型效價呈正相關[4]。此時就需要格外重視，并積極采取措施降低孕婦體內IgG水平。

HDN的發病率隨著母體內的IgG類血型抗體水平增高而增大，所以對母體IgG-A（B）和抗-D效價進行有效的檢測，可避免免疫性溶血的發生，有利于早期診斷和治療。我院采用微柱凝膠免疫試劑卡檢測IgG血型抗體效價孕婦進行產前干預治療，可明顯降低HDN的發病率。

[1]劉達莊.免疫血液學[M].上海:上海科學技術出版社,1981:76-77.

[2]達莊.免疫血液學[M].上海:上海科學技術出版社,2002:128-131.

[3]孫悅玲,施選性,金春子,等.O型流產婦女再孕與IgG抗體效價的關系[J].中國優生與遺傳雜志,2005,13(10):68-69.

[4]武建,孔惠良,方美玉,等.孕婦體內ABO血型血清抗體動態觀察[J].臨床血液學雜志(輸血與檢驗版),2007,4(3):102-103.