劉鋒
血細胞分析儀[1]由于具有較為良好的重復性、準確性、快速方便特性,使臨床檢驗工作得到大幅度上升,顯著提高了工作效率;由于血小板體積較小,容易受到干擾發生粘附、聚集和變性等情況,使得血小板檢測難以準確計數,其檢測結果變化、且很不穩定,計數結果與實際值出現顯著的差異,為了能夠提高血細胞分析儀對血小板檢測的精確度,我們對血細胞分析儀血小板檢測異常影響因素進行分析,具體報告如下。
1.1 儀器 血細胞分析儀采取Sysmex KX-21型(日產)及相應配套試劑;顯微鏡使用CX31光學顯微鏡(日本奧林巴斯公司生產)。
1.2 檢測方法 ①血細胞分析儀檢測:采靜脈血2.0 ml于EDTA-K2真空抗凝管,充分搖勻上機進行檢測。②顯微鏡檢測:采取手工顯微鏡檢測計數按照“全國臨床檢驗操作規程”(草酸銨法:血液20 μl加入0.38 ml血小板稀釋液,進行充分混勻、充液、進行鏡檢)對每個樣本進行3次計數,取血小板計數的平均值;取經抗凝血樣進行血片推制,采取瑞士染色,推制血膜符合標準具有顯著的舌狀,頭、體、尾,經瑞氏染色,后在顯微鏡下觀察血小板的大小、形態、有無凝集,以及血片中白細胞及紅細胞的大小、形態和碎片。③觀察內容:對4862標本進行血細胞分析儀檢測發現412例標本出現血小板檢測異常,并進行手工顯微鏡檢測,血小板無異常,對血細胞分析儀檢測血小板發生異常情況影響因素進行總結。
4862標本進行血細胞分析儀檢測發現412例標本出現血小板檢測異常,并進行手工顯微鏡檢測,血小板無異常,對血細胞分析儀檢測血小板發生異常情況影響因素進行總結,影響因素具有較為多的情況,具體見表1。

表1 412例檢測血小板發生異常影響因素(例,%)
在外周血細胞中血小板是體積最小的細胞,它具有較多的功能的細胞,主要參與機體自行止血整個過程,在內外凝血系統中具有較為重要的作用,由于其具有特性容易被破壞和發生附、聚集、變性等其他因素的干擾。
采血因素占影響因素中很大份額,老人、兒童、嚴重營養不良及體質較差患者由于靜脈血管不明顯常常發生采血困難,經過多次反復穿刺使得局部組織發生水腫及皮下出血,引起血小板發生聚集[2]、使得血小板消耗以及引起的組織凝血因子進入采集的血樣標本,形成微小凝血塊,進一步消耗血小板,是導致血細胞分析儀產生的結果偏低最長見到的因素。
溶血劑在血細胞分析儀試劑中非常重要,可以對血樣標本中紅細胞進行破壞達到溶解效果[3],并且使白細胞體積變化更有規律性,便于血細胞分析儀檢測,但溶血不充分,對紅細胞碎片不能夠徹底進行沖洗,使得血細胞分析儀檢測出現假陽性,導致對血小板計數值假性增高。
EDTA抗凝是臨床上采血最常用的抗凝劑,文獻報道在室溫條件下EDTA抗凝血,血小板會出現EDTA依賴性凝集[4],發生血小板EDTA依賴性凝集可能與血清中抗心磷脂抗體的滴度,血小板表面相關抗原的自身抗體有關,發生EDTA依賴性凝集后血細胞分析儀不能夠對凝集體的結構確認,導致血小板計數值假性減少。
經混合后的標本放置較長時間,由于溶解試劑具有滲透壓,對血小板具有破壞作用,血小板的體積隨時間的延長而發生變化,血小板的數量隨時間的延長而降低。
血液分析儀是利用電阻抗原理計數血小板[5],血小板的數量變化與體積變化密切相關;紅細胞和血小板的計數是在同一通道中進行,它們之間僅以體積大小來區別,因此,血小板的計數易受小紅細胞數量或紅細胞碎片的影響[6];大體積血小板導致血小板計數減少,由于分析儀不能對巨大血小板進行識別,將大體積血小板誤計入紅細胞,而導致血小板假性減少。
[1] 李輝.血細胞分析儀對血小板的影響因素.中華臨床醫學研究雜志,2005,11(17):2557.
[2] 魯力.淺談血細胞分析儀計數血小板的影響因素及其質量控制.現代醫藥衛生,2008,24(5):751.
[3] 李莉玲.探討血細胞分析儀測量血小板異常的因素.實用醫技雜志,2008,15(18):2370.
[4] 陳夢珍.血細胞分析儀測定血小板影響因素的探討.江西醫學學報,2005,23(3):243-244.
[5] 鐘素萍,馬粵健.Svsmex KX-21型血細胞分析儀計數血小板的影響因素的探討.海南醫學,2007,18(8):132.
[6] 廖忠.血細胞分析儀測定血小板的影響因素分析.廣東醫學院學報,2005,23(5):611-619.