柴胡皂苷d對小鼠免疫性肝損傷丙二醛、白介素-8的影響

李 嚴 王 磊

柴胡皂苷d對小鼠免疫性肝損傷丙二醛、白介素-8的影響

李 嚴 王 磊

目的觀察柴胡皂苷 d對免疫性肝損傷小鼠肝組織中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-8（IL-8）的影響。方法60只雄性昆明種小鼠隨機分為正常對照組、模型組和柴胡皂苷組，正常對照組一次性尾靜脈注射0.9%生理鹽水（20mg/kg），模型組和柴胡皂苷組一次性尾靜脈注射刀豆蛋白A（20mg/kg），模型組給予0.9%生理鹽水（160mg/kg）灌胃，柴胡皂苷組給予柴胡皂苷d（160mg/kg）灌胃，正常對照組給予0.9%生理鹽水（160mg/kg）灌胃，每日2次，連續7d，末次給藥后4h再次尾靜脈注射ConA（20mg/kg），12h后檢測肝組織中SOD、MDA的含量和血清TNF-α、IL-8的含量。結果模型組小鼠肝組織中SOD的含量明顯低于柴胡皂苷組，柴胡皂苷組小鼠肝組織中SOD的含量明顯低于空白對照組，差異具有統計學意義（P＜0.05，P＜0.01）；柴胡皂苷組小鼠肝組織中MDA含量明顯低于空白對照組、模型組，差異具有統計學意義（P＜0.01、P＜0.05）；柴胡皂苷組小鼠肝組織中TNF-α、IL-8的含量明顯低于空白對照組、模型組，差異具有統計學意義（P＜0.05，P＜0.01）。結論柴胡皂苷d對ConA所致的小鼠免疫性肝損傷有較好的保護作用。

柴胡皂苷d；肝損傷；SOD；MDA；IL-8；TNF-α

柴胡主要化學成分為揮發油、柴胡皂苷及多糖。柴胡皂苷可分為 a、b、d、e、f、h，其中最具活性的成分是柴胡皂苷d。研究發現柴胡皂苷具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調節內分泌及免疫系統等作用。目前，國內外學者把柴胡皂苷應用于腎病、肝纖維化、腫瘤等疾病的治療，筆者從柴胡皂苷 d對免疫性小鼠免疫性肝損傷的 SOD、MDA、TNF-α、IL-8的影響來研究其對肝損傷細胞的保護作用[1]。

1 資料與方法

1.1一般資料①動物雄性昆明種小鼠60只，清潔級，體重（25±3）g，6周齡，實驗室溫度20～26℃，相對濕度60%～80%，定時通風換氣，每日12h光照環境飼養。②藥物與試劑：刀豆蛋白A(Concanavalin,ConA)；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)檢測試劑盒，TNF-α、IL-8的ELISA檢測試劑盒，柴胡皂苷d。③儀器2K-15低溫高速離心機；玻璃勻漿器；752型紫外可見分光光度計；HH-S11.2電熱恒溫水浴器；550酶標儀。

1.2動物分組及處理60只小鼠適應性喂養 3天后，隨機分為正常對照組、模型組、柴胡皂苷組，每組20只，正常對照組一次性尾靜脈注射0.9%生理鹽水（20mg/kg），模型組和柴胡皂苷組一次性尾靜脈注射ConA（20mg/kg），模型組給予0.9%生理鹽水（160mg/kg）灌胃，柴胡皂苷組給予柴胡皂苷d（160mg/kg）灌胃，正常對照組給予0.9%生理鹽水（160mg/kg）灌胃，每日2次，連續7d，末次給藥后4h再次尾靜脈注射ConA（20mg/kg）。

1.3標本采集及處理小鼠尾靜脈末次給藥后注射ConA 12h后，摘眼球取全血，低溫條件下處死動物，摘取肝臟觀察大體外觀后，取同一肝葉組織制成勻漿待檢。

1.4指標檢測小鼠肝組織，剪碎后加入 0.9%氯化鈉溶液，冰浴中制肝勻漿，3500r／min離心 15 rain，取上清液，按試劑盒測肝勻漿中SOD、MDA的含量。血清 TNF-α、IL-8采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。按試劑盒說明書操作。

1.5統計學處理所有數據均采用SPSS 12.0統計軟件分析，所有計量資料用（±s）表示，采用t檢驗。

2 結果

模型組小鼠肝組織中 SOD的含量明顯低于柴胡皂苷組，柴胡皂苷組小鼠肝組織中SOD的含量明顯低于正常對照組，差異具有統計學意義（P＜0.01、P＜0.05）；柴胡皂苷組小鼠肝組織中MDA含量明顯低于正常對照組、模型組，差異具有統計學意義（P＜0.01、P＜0.05）；柴胡皂苷組小鼠肝組織中TNF-α、IL-8含量明顯低于正常對照組、模型組，差異具有統計學意義（P＜0.01、P＜0.05），見表1。

表1 三組小鼠肝組織中SOD、MDA、TNF-α及IL-8的比較

3 討論

ConA是一種在人體內對肝細胞有特異性毒性作用的植物凝集素，是一種能在體外激活T細胞的絲裂原，其活化T淋巴細胞而致免疫性肝損傷是該動物模型的基本病理特點。與其他中毒性肝損傷模型相比，該模型被認為更加近似地模擬人類病毒性肝炎和自身免疫性肝病等病理過程，其病變與人類慢性肝炎非常接近，并且有肝臟特異性和靶向性。因此更適合研究人類病毒性肝炎、自身免疫性肝病等的病理機制和進行抗肝損傷的藥物篩選[2]。綜上所述，柴胡皂苷d通過抗氧化及抑制炎癥因子保護免疫性肝損傷小鼠的肝細胞。對于柴胡皂苷d的其它方面作用機制還有待進一步研究。

[1]祖寧,李平.柴胡皂苷的生理作用及臨床意義[J].中國中醫藥信息雜志,2005,12(4):94-96.

[2]張秀明,陳科力,李翰明,等.蛇葡萄根的抗肝降酶及抗自由基損傷作用[J].中國藥師,1999,2(5):225-228.

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