紫外分光光度法測(cè)定雙黃連注射液的含量探究

【摘 要】雙黃連注射液的含量測(cè)定按部頒標(biāo)準(zhǔn)WS3-B-2104-96中含量測(cè)定項(xiàng)下要求，采用高效液相色譜法測(cè)定黃芩苷的含量。此方法不能及時(shí)對(duì)雙黃連注射液半成品的質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)控，故采用簡便、準(zhǔn)確的紫外分光光度法對(duì)其含量進(jìn)行測(cè)定，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，此方法有效，可行。

【關(guān)鍵詞】紫外分光光度法；雙黃連注射液；含量測(cè)定

一、實(shí)驗(yàn)材料

（1）儀器：紫外-可見分光光度法（普析T6新世紀(jì)）、高效液相色譜儀（島津SPD-10AVP型）、電子分析天平（GR202型）。（2）藥品及試藥：雙黃連注射液（規(guī)格20ml/支）、黃芩苷對(duì)照品（中國生物制品檢定所）、0.2mol/L鹽酸、95％乙醇。

二、實(shí)驗(yàn)方法

（1）對(duì)照品溶液的制備。精密稱取黃芩苷對(duì)照品15mg，置

100ml量瓶中，加95％乙醇溶液適量，微熱，使之溶解，加95％乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，再精密量取此溶液2ml置50ml量瓶中，加0.2mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。（2）供試品溶液的制備。精密量取雙黃連注射液2.5ml，置100ml量瓶中，加95％乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，再精密量取此溶液2ml置50ml量瓶中，加0.2mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。（3）測(cè)定方法。取供試品溶液及對(duì)照品溶液，在276nm波長處測(cè)定吸光度，計(jì)算即得。

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線及回歸方程。精密稱取黃芩苷對(duì)照品0.0116g，置50ml量瓶中，加95％乙醇溶液適量，微熱，使之溶解，加95％乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，制成每1ml約含0.2mg的溶液。然后，分別精密量取溶液0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、1.4ml置25ml量瓶中，加0.2mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，分別吸取體積（ml）0.6、0.8、1.0、1.2、1.4，濃度分別為（ug/ml）5.568、7.424、9.28、11.36、12.992，照紫外分光光度法，在276nm的波長處測(cè)定吸收度為0.330、0.438、0.523、0.615.0.721。以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，作線性回歸，計(jì)算回歸方程。回歸方程為：A=0.0517C+0.0459（r=.09992）。根據(jù)回歸分析，表明濃度在5.568～12.992ug/ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。（2）精密度試驗(yàn)。取線性關(guān)系項(xiàng)下濃度為9.28ug/ml黃芩苷對(duì)照品溶液，照紫外分光光度法，在276nm的波長處測(cè)定吸光度。重復(fù)進(jìn)樣6次，計(jì)算RSD值。吸光度分為0.513、0.511、0.512、0.513、0.511、0.511，RSD=0.2％。由此可見，黃芩苷的精密度良好。（3）溶液的穩(wěn)定性試驗(yàn)。按含量測(cè)定項(xiàng)下方法制備供試品溶液，室溫，密閉放置。于0、2、4、6、8、12、24小時(shí)分別測(cè)定吸光度，計(jì)算含量、RSD值。含量（mg/ml）結(jié)果為7.64、7.68、7.66、7.68、7.68、7.66、7.66，RSD=0.2％。由此可見，供試品溶液在室溫，密閉放置24小時(shí)有良好的穩(wěn)定性。（4）回收率試驗(yàn)。第一，對(duì)照品溶液的制備。精密稱取黃芩苷對(duì)照品15.7mg，置100ml量瓶中，加95％乙醇溶液適量，微熱，使之溶解，再加入95％乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。第二，供試品溶液的制備。精密量取已知含量（7.71mg/ml）的雙黃連注射液2.5ml，置100量瓶中，加入黃芩苷對(duì)照品溶液（0.157mg/ml）1ml，然后再加入95％乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，再精密量取此溶液2ml置50量瓶中，加0.2mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。同法操作，制備6份供試品溶液，依法測(cè)定，計(jì)算含量，結(jié)果（mg）分別為7.868、7.865、7.869、7.864、7.868、7.863。第三，回收率的計(jì)算。計(jì)算公式：回收率=（實(shí)驗(yàn)測(cè)得量－已知樣品量）/加入量×100％。結(jié)果：回收率（％）分別為100.64、98.73、101.27、98.09、100.64、97.45，平均值為99.5。此測(cè)定方法的回收率為99.5％，RSD=1.6％。（5）樣品的測(cè)定。取三個(gè)批號(hào)（0807261、0807271、0807281）的雙黃連注射液，依本法進(jìn)行含量測(cè)定，并與高效液相色譜法的檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果分別為：紫外法（mg/ml）：7.2、7.8、7.9；液相法（mg/ml）：6.7、7.2、7.0。通過含量測(cè)定結(jié)果的分析，紫外分光光度法與高效液相色譜法測(cè)定的結(jié)果基本一致。

綜上所述，在高效液相色譜法規(guī)定的276nm波長處，用紫外分光光度法測(cè)定雙黃連注射液的含量，此方法精密度高，重現(xiàn)性、溶液的穩(wěn)定性好，回收率、線性范圍符合測(cè)定要求。該方法具有簡便、快捷、準(zhǔn)確、時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。可以作為雙黃連注射液半成品的質(zhì)量監(jiān)控。

參 考 文 獻(xiàn)

[1]中華人民共和國藥典委員會(huì)．中華人民共和國藥典[M]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010（1）

[2]中國藥品生物制品檢定所編著．中國藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范[M]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010（9）

[3]雙黃連注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)．WS3-B-2104-96