鐵皮石斛飲片對微生物生長的影響

譚愷

摘要 為探明鐵皮石斛超微飲片與傳統飲片對微生物生長的影響，明確中藥超微飲片的優越性，選用生長受鐵皮石斛影響明顯的2種微生物，通過液體培養比濁法研究了鐵皮石斛超微飲片與傳統飲片的作用效果。結果表明，鐵皮石斛超微飲片和傳統飲片對釀酒酵母的生長都有促進作用，且超微飲片的效果優于傳統飲片，其中0.08～0.12 g/mL鐵皮石斛超微飲片對釀酒酵母生長的促進效果與傳統飲片相比差異達顯著或極顯著水平。鐵皮石斛超微飲片和傳統飲片對大腸桿菌的生長都有抑制作用，并且超微飲片的效果強于傳統飲片，其中0.04～0.08 g/mL鐵皮石斛超微飲片對大腸桿菌生長的抑制效果與傳統飲片相比差異達顯著或極顯著水平，0.10 g/mL鐵皮石斛超微飲片對大腸桿菌生長的抑制效果與傳統飲片相比沒有顯著性差異。可見，超微飲片的有效物質浸出率高于傳統飲片，超微技術有利于中藥成分的溶出。

關鍵詞 鐵皮石斛；超微中藥；抑菌作用；促菌作用；微生態

中圖分類號 R285.5 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2018）01-0235-02

鐵皮石斛（Dendrobium officinale）為多年生草本植物，是一種名貴的中藥材 [1-3]，有“除痹下氣，補五臟虛勞贏瘦，強陰，久服厚腸胃輕身延年”的功效[4]。研究表明，鐵皮石斛對假絲酵母（Candida albicans）、釀酒酵母（Saccharomyces cere-visiae）、德巴利酵母（Debaryomyces hansenii）的生長具有明顯的促進作用，對保加利亞乳桿菌（Lactobacillus delbrueckii）和枯草芽胞桿菌（Bacillus subtilis）等有益細菌的生長也具有明顯的促進作用，能夠抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌等致病菌的生長，但是對綠膿桿菌、嗜熱鏈球菌、產氣桿菌、地衣芽胞桿菌的生長沒有明顯的影響[1]。

傳統中藥飲片工序簡單，臨床使用顯示了極強的生命力，但傳統中藥飲片服用前需臨時煎煮，使用和攜帶不方便，藥物有效成分煎出率低，藥材利用率低[1-2]。超微中藥采用現代科學技術與傳統的中藥炮制技術相結合，將傳統飲片加工成一種粒徑為微米級的新型中藥飲片，服用方便[5]。與傳統飲片相比，超微技術能更好地促進中藥材中有效成分的溶出[1，6]。中藥飲片經超微處理后，粒度更細、勻，藥材成分與溶劑的接觸面積增大，進入人體的超微飲片是大部分破壁后的全細胞成分[7]，因而超微飲片的療效較傳統飲片要高[8]。現選用鐵皮石斛作用明顯的釀酒酵母和大腸桿菌，研究超微飲片與傳統飲片的作用效果，以探討超微飲片對中藥藥效的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 菌株。研究證明鐵皮石斛對大腸桿菌的生長具有明顯的抑制作用，對酵母菌的生長有明顯的促進作用[1]。本研究選取大腸桿菌和釀酒酵母作為供試菌株，菌株由湖南中醫藥大學提供，制成菌懸液[1]，待用。

1.1.2 藥物。鐵皮石斛超微粉和常規細粉[1]，由湖南龍石山鐵皮石斛基地有限公司提供。

1.1.3 培養基[9]。YPD液體培養基，用于培養釀酒酵母[1-2]。牛肉膏蛋白胨液體培養基，用于培養大腸桿菌。

1.2 試驗方法

1.2.1 藥液制備。分別稱取適量的鐵皮石斛超微粉和常規細粉加入到對應菌種的培養基中，拌勻[1]，達到所需的濃度，根據相關文獻[1]的結果，使用0.04、0.06、0.08、0.10 g/mL等藥物濃度研究對大腸桿菌生長的抑制作用，使用0.06、0.08、0.10、0.12 g/mL等藥物濃度研究對釀酒酵母生長的促進作用，高壓蒸汽滅菌后，冷卻，待用。

1.2.2 超微鐵皮石斛對大腸桿菌生長的抑制作用。分別向已滅菌的2種鐵皮石斛飲片與液體培養基混合液中加入 0.1 mL對應的供試大腸桿菌菌液（以加菌液的培養基混合液作為參比）[1]，于搖床中37 ℃、120 r/min振蕩培養24 h，取樣，測OD660。

1.2.3 超微鐵皮石斛對酵母菌生長的促進作用。分別向已滅菌的2種鐵皮石斛飲片與液體培養基混合液中加入0.1 mL對應的供試菌菌液（以未加菌液的混合液作為參比），于搖床中28 ℃、120 r/min振蕩培養48 h，取樣，測OD660。

1.3 統計學分析

用SPSS 19.0軟件處理數據，各分組所得計量數據用平均值表示，用t檢驗比較組間均值，P<0.05有統計學意義[1-2]。

2 結果與分析

2.1 鐵皮石斛對大腸桿菌生長的抑制作用

由圖1可知，鐵皮石斛超微飲片和傳統飲片在試驗濃度范圍內對大腸桿菌的生長均有抑制作用，并且超微飲片的抑制效果強于傳統飲片。當2種鐵皮石斛飲片的濃度為0.04～0.08 g/mL時，鐵皮石斛超微飲片對大腸桿菌生長的抑制效果與傳統飲片相比差異達顯著或極顯著水平（P<0.05或P<0.01），而0.10 g/mL鐵皮石斛超微飲片對大腸桿菌生長的抑制效果優于鐵皮石斛傳統飲片，但二者相比沒有顯著性差異（P>0.05）。說明在一定濃度范圍內，隨著鐵皮石斛濃度的增加，對大腸桿菌的抑制作用增強，但當濃度達0.10 g/mL及以上時，其抑制效果最好。雖然超微飲片的有效成分浸出率比傳統飲片高，但差異不顯著。

2.2 鐵皮石斛對酵母菌生長的促進作用

由圖2可知，鐵皮石斛超微飲片和傳統飲片在試驗濃度范圍內對釀酒酵母的生長均有促進作用，且超微飲片的效果優于傳統飲片。當鐵皮石斛濃度為0.08～0.12 g/mL時，超微飲片對釀酒酵母生長的促進效果與傳統飲片相比差異達顯著或極顯著水平（P<0.05或P<0.01），而0.06 g/mL鐵皮石斛超微飲片對釀酒酵母生長的促進效果強于傳統飲片，但二者相比沒有顯著性差異（P>0.05）。這說明鐵皮石斛對釀酒酵母生長的促進作用在一定濃度范圍內隨著濃度的升高而增加，由于超微飲片有效成分的浸出率比傳統飲片大，鐵皮石斛濃度達0.08 g/mL時就表現出明顯的優勢。endprint

3 結論與討論

大腸桿菌屬于腸道的正常菌群，鐵皮石斛能夠調整脾虛便秘小鼠腸道的大腸桿菌數[10]，鐵皮石斛多糖含量為45%左右[11]，大量研究證明，鐵皮石斛多糖對大腸桿菌有明顯的抑制作用[12]，鐵皮石斛多糖可能是鐵皮石斛抑制大腸桿菌的主要成分。并且，脾虛便秘造模破壞了腸道細菌多樣性，經2種鐵皮石斛湯劑的治療，可以使腸道的微生態得到一定的調整，發現超微50%量湯劑效果優于傳統湯劑[13]。體內和體外試驗均證明超微飲片的有效成分浸出率高于傳統飲片。

酵母菌是腸道常見的有益菌，腸道酵母菌的改變也直接關系著腸道微生態平衡，七味白術散通過促進腸道酵母菌的繁殖，在治療菌群失調腹瀉中發揮著一定的作用[14]。鐵皮石斛能促進腸道酵母菌數量的增加，調整脾虛便秘小鼠腸道微生態平衡，對脾虛便秘的治愈起到一定的效果，并且鐵皮石斛超微飲片對腸道酵母菌的促進作用要強于傳統飲片[10]，說明鐵皮石斛中存在促進酵母菌生長的有效成分，有關具體成分還有待進一步研究。鐵皮石斛超微飲片對酵母菌生長的促進作用優于傳統飲片，進一步證明中藥超微飲片有利于中藥有效成分的浸出，提高中藥利用度，節省中藥材。

4 參考文獻

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