胚胎移植在德國美利奴青年羊應用的初步研究

阿依努爾·亞森，董 紅，陳靜波，海力切木，霍 飛，鄭新寶

（新疆畜牧科學院畜牧研究所，新疆 烏魯木齊 830000）

胚胎移植在德國美利奴青年羊應用的初步研究

阿依努爾·亞森，董 紅，陳靜波*，海力切木，霍 飛，鄭新寶

（新疆畜牧科學院畜牧研究所，新疆 烏魯木齊 830000）

為探索青年供體母羊提前擴繁的利用效率，本研究選擇12只周歲齡德國美利奴母羊作為供體羊，分兩組注射不同劑量FSH進行超排，兩組分別平均獲可用胚枚1.16枚和4.3枚，組間差異明顯（P＜0.01），總受胎率59.4%。該結果表明周歲齡德國美利奴羊對超排敏感，可用于胚胎生產，建議實際生產中應適當提高FSH注射劑量。

德系美利奴青年羊；胚胎移植；

家畜超數排卵胚胎移植技術的廣泛應用使優質純種家畜的快速擴繁得以實現，給畜牧業帶來巨大效益。綿羊相對與牛繁殖年限要短的多，因此若能在性成熟初期即對其實施超數排卵胚胎移植將極大的提高優質母羊遺傳資源的利用效率。德國美利奴是肉毛兼用的優質綿羊品種，為滿足市場供應，本研究選取周歲德國美利奴羊母羊，用不同劑量的FSH處理，進行胚胎移植，取得的較為理想的效果，現將結果報道如下，以期為生產實踐提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗動物

1.1.1 試驗動物

從巴州種畜場45只周歲齡德國美利奴母羊中選擇12只發情正常的作為供體，平均體重34.75 kg,健康無疾病。配種公羊為德國美利奴成年公羊2只。受體羊為本地巴音布魯克土種成年母羊，經檢疫均為健康。供、受體飼養方式相同，均全年半放牧半舍飼的方式。

1.1.2 試驗器材與藥品

孕酮陰道海綿栓；加拿大垂體促卵泡素(FSH)；促黃體素(寧波三生藥業有限公司)；氯前列烯醇(寧波三生藥業有限公司)；PMSG（寧波三生藥業有限公司）；靜松靈；利多卡因；黃體酮（寧波三生藥業有限公司）；沖卵液：自制。

1.2 試驗方法

1.2.1 同期發情及超排處理

在試驗羊發情周期的任意一天埋植陰道栓，9 d后撤栓，同時肌注250 IU的PMSG，12 h后公羊試情。12只供體羊分成兩組減量注射FSH，注射總劑量分別為14mL和16mL。第三天注射FSH時如發情注射LH（1mL）促排。

1.2.2 供體羊發情鑒定及配種

所有供體羊均于撤栓后12 h開始用性欲旺盛的試情公羊進行早晚試情，每次試情時間不少于60 min，連續試情3 d。母羊開始發情時，興奮不安，試情羊跟隨、接受公羊爬跨，供體羊發情后注射LH同時立即用種公羊本交或結合進行人工輸精，每10～12 h時輸一次，輸3～4次。

1.2.3 沖卵及移植

以發情開始的第一天記為0 d，所有供體均于發情后第6 d用手術法經子宮角回收胚胎。為防止手術時腹壓過大而造成操作困難和生殖器官的損傷,于手術前24 h將供、受體單獨圈養，絕食。手術法沖胚。所回收的沖卵液要立即送入室溫在21℃～26℃的無菌室，鏡檢、計數及裝管，手術法移植。

1.2.4 妊娠檢查

檢查移植后20 d是否返情，40 d結合B超確定懷孕情況。

1.2.5 統計分析

應用SPSS13.0軟件，T檢驗的方法分析。

2 結 果

本試驗共回收胚胎41枚（包括透明帶），可用胚胎33枚，其中14mL組獲胚為9枚，可用數7枚；16 mL組獲胚35枚，可用胚胎數為26枚，差異極顯著（P＜0.01），總體移植受胎率59.4%，胚胎移植所產羔羊初生重4.07 kg（見表1）。

表1 FSH劑量對超數排卵效果的影響

以上數據表明：周歲齡德國美奴母羊對超數排處理敏感，所產胚胎移植后妊娠率和成年羊相比無差異，可用于胚胎生產。但在選擇FSH用量時應適當提高注射劑量。

3 討 論

3.1 年齡對超排的影響

供體的年齡是影響超數排卵效果的一個重要方面。不同年齡的動物對同種同劑量的激素反應不同。動物對超排的敏感性隨年齡的增長而提高，但高齡動物超排效果較差[1]。丁紅等[2]研究顯示，對2.5～4.5歲供體母羊沖卵時，可用胚數隨年齡增長呈上升趨勢，而5.5歲供體羊的獲卵數、可用胚數均低于2.5、3.5、4.5歲年齡組的結果。洪瓊花等[3]用3/4劑量的FSH相同的超排方案對育成羊進行超排，結果顯示，經產羊平均回收胚胎數明顯高于育成羊(P＜0.01)，可用胚胎數育成羊和經產羊間差異不顯著(P＞0.05)，但育成羊的可用胚率高于經產羊，分別為86.01%和81.15%。林峰[4]研究表明經產母羊排出的卵子質量要好于育成母羊，但兩者的同期發情率、平均獲胚數及采卵平均數差異不顯著。趙霞等[5]認為性成熟不久的供體羊，初次誘發排卵時適當降低FSH劑量可與成年經產母羊一樣有較好的超排效果。本研究結果顯示，周歲齡德國美利奴羊對超排敏感，16mL組平均生產胚胎5.8枚，其中可用胚4.3枚，妊娠率59.4%，均正常產羔，該結果較成年羊超排效果略差，表明周歲齡綿羊對FSH有一定敏感性，盡管其超排效果略差于成年綿羊，但其生胚胎質量與成年羊相比無差異。提示12月齡德國美利奴綿羊可用于超排，建議在實際生產中提高FSH注射劑量。

3.2 影響青年羊發情因素

綿羊初次發情的時間受遺傳、環境、出生時間及營養狀況的影響。美利奴綿羊通常情況下18～20個月齡第一次有發情表現，體重達到30～50 kg，占成年羊體重50%～70%[6]。春季出生的綿羊一般發情年齡要早于秋季出生的綿羊。營養狀況影響通過改變體內LH的分泌而影響發情。本次實驗中對45只平均體重在34.75 kg 12月齡德國美利奴埋植海綿栓誘導發情，結果其中12只表現出了明顯發情行為，發情率遠遠低于同批次處理成年母羊。造成發情率低的可能原因是所選擇的大部分羊生殖器官尚未發育完全，身體條件不具備接受藥物誘導發情的條件，且實驗進行時間在12月下旬，氣溫低，舍飼條件一般不利于綿羊發情。

此外，使用的配種公羊的膘情、體況及性欲等在胚胎移植中對結果也有很大影響。因此在超排前一段時間要對公羊進行加強運動和補飼。本次試驗中公羊沒有提前補飼和運動，在配種過程中因公羊性欲不好注射睪酮，但總體來說公羊性欲，精子活力和精子密度仍然不好，影響到了卵子的受精。

[1] 李建棟，柏學進，吳鐵榮，等.淺析影響奶牛超排效果四項因素的研究[J].養殖技術顧問,1997，(03):7～9.

[2] 丁紅，瑪依拉，楊冬梅，等.促卵泡素和年齡對綿羊超數排卵效果的影響[J].中國畜牧雜志,1998，(03): 18～20.

[3] 洪瓊花，邵慶勇，馬興躍，等.山羊超數排卵與胚胎移植技術的研究與應用[J]．生物技術通報,2004，（4）：39～43.

[4] 林峰.濟寧青山羊超數排卵效果研究[J].遼寧畜牧獸醫,2004,(10)：9～10.

[5] 趙霞.綿羊與波爾山羊胚胎移植技術及其影響的研究[D].內蒙古農業大學,2001碩士論文.

[6] E.S.E.Hafez,Reproduction in farm animals,blackwell seventh edition，2008.

Prelim inary Study on Superovulation in Prim iparous Germany M erino Sheep

AYINUER,CHEN jing-bo*,DONG Hong,HAILIQIEMU,HUO Fei,ZHEN Xin-bao
（Xinjiang Academy of Animal Scinece,Urumqi830000，China）

In this study,12 yearling German Merino ewes were selected as embryo donors,randomly divided into two groups and treated with two different doses of FSH (14ml and 16ml respectively)for superovulation. The transferable embryos collected from the two groups were 9 and 26,respectively,and the difference was significant(P＜0.05).The overall conception rate was 59.4%.The results show that primiparous German Merino sheep are responsive to superovulation with FSH,and can be used for embryo donors;When primiparous sheep are used as embryo donors,it is recommended tomoderately increase the dose of FSH.

primiparous germanymerino sheep;superovulation and embryo transplantation

S814.8

A

1003-6377（2012）04-0034-03

2012-08-18

項目資助：“十二五”農村領域國家科技計劃項目“西北地區優質肉牛肉羊快繁技術研究與應用”（2011BAD19B02-2）

阿依努爾·亞森（1984-），女，維吾爾族，實習研究員，從事動物繁殖與胚胎移植技術研究及推廣工作。

陳靜波（1956-），男，研究員，博士生導師，研究方向：動物遺傳育種與繁殖。