中風Ⅱ號對MCAO大鼠IL-17、IL-6含量的影響研究

林信富,朱亨癤,施 菱,武一曼,陳素娟,鄭雪花,林曉暉

(1.福建中醫藥大學中西醫結合學院，福建 福州 350108；2.福建省中醫藥研究院,福建 福州 350003;3.福建中醫藥大學附屬人民醫院，福建 福州 350003)

急性腦血管病發病率、病死率及致殘率都很高，且本病發病率不斷攀升，嚴重威脅人類健康。急性腦缺血損傷的機制非常復雜，炎癥反應在其中起重要作用。腦缺血的炎癥反應是在各種細胞因子介導下的按順序進行的連續動態反應過程，也就是所謂的炎癥瀑布反應或稱炎癥級聯反應。而白細胞介素6(IL-6)、白細胞介素6(IL-6)作為前炎癥細胞因子，在腦缺血炎癥級聯反應中發揮重要作用。

1 材料與方法

1.1 試驗藥物 中風Ⅱ號(由黃芪、丹參、水蛭、赤芍、川芎、鉤藤、地龍、生大黃等組成)，含生藥2 g/mL，由福建省中醫藥研究院屏山制藥廠監制。

1.2 實驗動物 健康雄性SD大鼠49只，由福建醫科大學實驗動物中心提供，體質量250～280 g。

1.3 試劑 IL-17、IL-6試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.4 方法

1.4.1 動物分組與給藥 實驗動物隨機分為:1)對照組(假手術組)7只；2)缺血組21只(缺血6 h組、缺血24 h組、缺血72 h組各7只)；3)治療組21只(缺血6 h治療組、缺血24 h治療組、缺血72 h治療組各7只)。治療組在術前連續3 d(每天2次)及術后每6 h予中風Ⅱ號1 mL灌胃，缺血組于同時間點灌胃生理鹽水1 mL。

1.4.2 MCAO大鼠模型制備 參照Longa等[1]線栓法制作大鼠大腦中動脈缺血模型。按時間點6、24、72 h分別處死取腦。假手術組僅手術切開頸部皮膚，分離出頸內動脈、頸外動脈后即逐層縫合皮下組織、皮膚。

1.4.3 神經功能缺損評分 各組動物在處死前分別進行神經功能缺損評分：0分，無神經功能障礙；1分，提尾見癱瘓側前肢回收屈曲不能；2分，除1級體征外，向癱瘓側推時感覺阻力明顯降低；3分，大鼠爬行時向癱瘓側旋轉或傾斜；4分，不能自發行走或處于昏迷狀態。

1.4.4 生化指標測定 在規定時間將各組大鼠斷頭處死，快速取腦，制備10%腦組織勻漿保存。采用雙抗體夾心ELISA法測定腦組織IL-17、IL-6含量，按試劑盒說明書進行操作。

2 結果

2.1 神經功能缺損評分分值 見表1。

表1 中風Ⅱ號對MCAO大鼠神經功能缺損評分的影響±s)

2.2 腦組織勻漿IL-17、IL-6含量比較 見表2。

3 討論

表2 中風Ⅱ號對MCAO大鼠腦組織IL-17、IL-6含量的影響±s，n=7) pg/mL

IL-6由多種細胞產生，正常腦內IL-6表達的量很少，多位于海馬、下丘腦、皮質。腦缺血后IL-6表達則明顯增加，而且具有神經毒性作用。資料[5-7]顯示,腦缺血后極早期即有腦內、血漿和腦脊液IL-6水平的升高，且其水平與神經功能和梗死范圍有緊密的關系。故有學者提出細胞因子IL-6是腦梗死的獨立預測因子。本研究結果也顯示，大鼠局灶性腦缺血后腦組織IL-17、IL-6含量明顯高于對照組,且隨缺血時間而逐漸增加，與其他學者的研究結果一致。

急性腦缺血屬于中醫“腦卒中”的范疇，其發病多與風、火、氣、瘀、虛等有關。中風Ⅱ號由黃芪、丹參、水蛭、赤芍、川芎、鉤藤、地龍、生大黃等組成，具有益氣活血通絡、清熱平肝熄風的功效。臨床與實驗研究[8-11]表明，中風Ⅱ號可增強腦組織對缺血、缺氧的耐受性，保護SOD及GSH-Px，清除自由基，減輕腦缺血再灌注損傷；并可抑制血小板CD54、CD62P的異常活化，抑制血小板聚集，改善腦梗死患者的細胞免疫功能;改善腦組織和神經功能損傷，減少患者病死率和致殘率。本實驗結果表明,治療組IL-17、IL-6含量明顯低于對應時間點缺血組，差異有統計學意義。筆者認為，中風Ⅱ號可能通過抑制促炎性細胞因子IL-17的過高表達，進而減少其下游細胞因子IL-6的含量,抑制炎癥級聯反應，從而發揮保護神經細胞、改善神經功能、防治腦缺血損傷的作用。

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